柱前衍生法测定氨基酸注射液中18种氨基酸含量（安捷伦衍生方案+Spursil C18）

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方法： HPLC 基质： 标准溶液 应用编号： 103091 化合物： 1,Asp天门冬氨酸；2,Glu谷氨酸；3,Ser丝氨酸；4,His组氨酸；5,Gly甘氨酸；6,Thr苏氨酸；7,Cys胱氨酸；8,Ala丙氨酸；9,Arg精氨酸；10,Tyr酪氨酸；11,Val缬氨酸；12，Met蛋氨酸；13，Trp色氨酸；14，Phe苯丙氨酸；15，Ile异亮氨酸；16，Leu亮氨酸；17，Lys赖氨酸；18，Pro脯氨酸 固定相： —— SPE柱： —— 色谱柱： Spursil C18 5μm 150 x 4.6mm 样品前处理： 由HP公司（现Agilent公司）提供的氨基酸分析方法， 原理：一级氨基酸与邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生，二级氨基酸与9-芴基(FMOC)柱前衍生，经反相GX液相色谱分离测定氨基酸的含量。 进样程序： 10 从管3中吸取0.0 μL (洗针) 20 从管4中吸取5.0 μL (吸缓冲液) 30 从管3中吸取0.0 μL (洗针) 40 从管1中吸取1.0 μL (吸OPA) 50 从管3中吸取0.0 μL (洗针) 60 从样品中吸取1.0 μL (吸样品或标准溶液) 70 从管3中吸取0.0 μL (洗针) 80 以200 μL/min的速度混合7.0 μL，重复20次 (混合使反应) 90 从管2吸1.0 μL (吸FMOC) 100 以300 μL/min的速度混合8.0 μL，重复30次 (混合使反应) 110 进样（注入色谱柱） 注：管1－－OPA，管2－－FMOC，管3－－水，管4－－缓冲液硼酸缓冲液(0.4 mol/L) OPA (Phthaldialdehyde， 10 mg/mL) FMOC (9- Fluorenylmethyl, chloroformate，5 mg/mL) 色谱条件： 流动相：A:2.0 g醋酸钠+500 mL水，加130 μL三乙胺和5 mL四氢呋喃调pH=7.2 B:2.0 g醋酸钠+100 mL水，调pH=7.2，加入乙腈：甲醇（1:1）400 mL 流速：1.0 mL/min 柱温：40 ℃ 检测器：Agilent VWD （0-16.0min：338nm，16.0min变波长262nm至结束） 进样量：1.0 μL 文章出处： 华瑞制药有限公司 关键字： Asp天门冬氨酸；Glu谷氨酸；Ser丝氨酸；His组氨酸；Gly甘氨酸；Thr苏氨酸；Cys胱氨酸；Ala丙氨酸；Arg精氨酸；Tyr酪氨酸；Val缬氨酸；Met蛋氨酸；Trp色氨酸；Phe苯丙氨酸；Ile异亮氨酸；Leu亮氨酸；Lys赖氨酸；Pro脯氨酸；天然氨基酸；柱前衍生；18种氨基酸；Spursil C18；HPLC 摘要： —— 图谱： 1,Asp天门冬氨酸；2,Glu谷氨酸；3,Ser丝氨酸；4,His组氨酸；5,Gly甘氨酸；6,Thr苏氨酸；7,Cys胱氨酸；8,Ala丙氨酸；9,Arg精氨酸；10,Tyr酪氨酸；11,Val缬氨酸；12，Met蛋氨酸；13，Trp色氨酸；14，Phe苯丙氨酸；15，Ile异亮氨酸；16，Leu亮氨酸；17，Lys赖氨酸；18，Pro脯氨酸