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使用 AdvanceBio SEC 色谱柱分析人促血红细胞生成素的聚集体

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概述
实验/设备条件
样品提取
实验/操作方法
实验结果/结论
仪器/耗材清单

人促血红细胞生成素 (Erythropoietin, EPO) 是zui早用于治疗贫血症的商业化糖蛋白之一。与其它生物治疗蛋白一样,聚集体监测是评价 EPO 的关键质量属性之一。在欧洲药典 (European Pharmacopoeia, EP) 10.0版 中,详细规定了使用体积排阻色谱 (Size Exclusion Chromatography, SEC) 结合峰面积归一化法分析 EPO 样品中的二聚体及其它大于主成分分子量的有关蛋白比例的方法。

相比之前的 EP 版本,10.0 版对 EPO 的体积排阻色谱方法所作的主要修订在于使用粒径较小且柱长较短的色谱柱。这样在保证分离度的前提下,大幅度缩短了分析所用的时间。Agilent AdvanceBio SEC 色谱柱采用新一代填料修饰工艺,能够更有效yi制 SEC 分析中可能存在的非特异性相互作用。其填料粒径为 2.7 μm,工作压力适中,同时可提供更高的塔板数与分离度。

本研究使用 Agilent AdvanceBio SEC 色谱柱并结合 EP 方法流动相和色谱条件,对 EPO 样品进行体积排阻分析。结果完全满足欧洲药典 EP 10.0 版中有关系统适应性的要求,表明该方法适用于 EPO 的生产过程质量控制以及其它相关的研究工作。


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