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猪肉食品中氯霉素检测的固相萃取方法(Copure® C18)

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内容节点
概述
实验/设备条件
样品提取
实验/操作方法
实验结果/结论
仪器/耗材清单

一、样品提取

 称取均质后的 5.0 g 猪肉试样,精确到 0.01 g。置于 50 mL 离心管中,加入 5 mL 水,于涡旋混合器上快速混合 1 min, 使试样完全溶解。准确加入 15 mL 乙酸乙酯,在振荡器上振 荡 10 min,以 3000 r/min 离心 10 min,准确吸取上层乙酸 乙酯 12 mL 转入 15 mL 的离心管中,置于浓缩吹氮仪在 45℃ 吹扫蒸干,加入 5 mL 水溶解,待净化。 二、SPE 柱净化(Copure® C18,1000 mg/6 mL) 

活化:小柱使用前依次采用 5 mL 甲醇、5 mL 水活化。 

上样和洗脱:将待净化液过柱,待溶液完全流出后,用 2×3 mL 水过柱,然后再用 5 mL 乙腈 / 水溶液 (2:8, v/v) 淋洗,弃去全部淋出液。用真空泵减压抽干小柱,最后用 6  mL 乙酸乙酯洗脱,收集洗脱液。 

重新溶解:洗脱液于 45℃用氮气吹干,用乙腈 / 水溶液 (2:8,  v/v) 定容至 1 mL,经有机滤膜过滤后上机供 LC-MS/MS 测定。 

三、仪器条件 

质谱仪:API 4000 色谱柱:Venusil ASB C18 (2.1 mm×150 mm, 5 µm) 流动相:A:10 mmol/L 乙酸铵溶液   B:甲醇 流速:0.2 mL/min 柱温:40℃ 进样体积:5 µL 离子源:电喷雾 (ESI),负离子模式 检测方式:多反应监测 (MRM) 表 1 质谱仪离子源参数

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