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你知道吗?PCR盖紧了盖子,也有可能出现试剂蒸发

艾普拜生物科技(苏州)有限公司 2022-12-13 14:44:16 186  浏览
  • 导读

    在PCR实验中,我们加完反应体系后,都会认真仔细的盖好盖子,并反复确认已经盖好了盖子,以避免出现试剂蒸发的情况。可是有时候我们也会有一些疑惑:明明已经确认盖子盖紧了,实验结束后,还是会出现试剂蒸发的现象。这是为什么呢?

    其实试剂的蒸发是PCR实验中常见的问题之一,影响试剂蒸发的因素也比较多。

    蒸发是指试剂在PCR实验过程中,反应液在高温下气化,又凝结在管壁或顶盖上,形成水雾或水珠,或直接从管盖或覆膜的气隙中溢出,造成反应液浓度变化、反应液量减少,有的甚至蒸干,导致实验无效等。

    影响试剂蒸发的因素主要有以下三点:

    01热盖压力、温度

    在PCR实验中,我们一般通过加热盖的办法来防止试剂蒸汽的凝结,热盖温度一般比反应液的温度高,以防止蒸汽凝结。

    PCR 仪的热盖大致可以分为以下四种:非可调式热盖、可调节式热盖、自适应式热盖和自动式热盖。而可调节式热盖利用手拧压紧式,拧不紧会发生试剂蒸发,通过增加热盖压力可以尽量减少边缘蒸发的现象。有时拧得过紧反而可能出现压坏管子、拧坏旋钮的情况。通常,采用电动智能热盖,能够自动感应不同高度的耗材,自动压紧耗材,压力均匀且恒定,从而能够减少试剂蒸发和人工误差,提高实验准确度和可重复性。

    02耗材形变

    对于蒸汽的泄漏,大部分人认为是热盖的压力不够所致。热盖的压力固然很重要,但这仅仅是一个方面,其实耗材也很关键。

    PCR 孔板通常为塑料材质,在受热后发生膨胀,产生较大地变形,用于放置 PCR 孔板的 PCR 金属基座则受热膨胀率极小,PCR 孔板受热膨胀后不能正常沿平面延展进而中间形成拱起状态,从而造成上方热盖不能全面地与 PCR 孔板上表面充分接触,造成温度、压力不均,引起 PCR 孔板边缘试剂的蒸发,影响 PCR 检测效果。

    03耗材密封不严

    热盖与耗材压紧并不等于盖紧了 PCR 管盖,PCR 孔板质量参差不齐。优质的耗材,管口和盖子表面光滑,盒盖后密封性好,不易泄漏。而劣质耗材,管口不平,有径向纹路,容易造成泄漏,甚至蒸干。

    因此在PCR实验中,尽量选择优质、合适的耗材。同时也可以扩大反应体系,尽量减少体系蒸发对反应的影响。


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你知道吗?PCR盖紧了盖子,也有可能出现试剂蒸发

导读

在PCR实验中,我们加完反应体系后,都会认真仔细的盖好盖子,并反复确认已经盖好了盖子,以避免出现试剂蒸发的情况。可是有时候我们也会有一些疑惑:明明已经确认盖子盖紧了,实验结束后,还是会出现试剂蒸发的现象。这是为什么呢?

其实试剂的蒸发是PCR实验中常见的问题之一,影响试剂蒸发的因素也比较多。

蒸发是指试剂在PCR实验过程中,反应液在高温下气化,又凝结在管壁或顶盖上,形成水雾或水珠,或直接从管盖或覆膜的气隙中溢出,造成反应液浓度变化、反应液量减少,有的甚至蒸干,导致实验无效等。

影响试剂蒸发的因素主要有以下三点:

01热盖压力、温度

在PCR实验中,我们一般通过加热盖的办法来防止试剂蒸汽的凝结,热盖温度一般比反应液的温度高,以防止蒸汽凝结。

PCR 仪的热盖大致可以分为以下四种:非可调式热盖、可调节式热盖、自适应式热盖和自动式热盖。而可调节式热盖利用手拧压紧式,拧不紧会发生试剂蒸发,通过增加热盖压力可以尽量减少边缘蒸发的现象。有时拧得过紧反而可能出现压坏管子、拧坏旋钮的情况。通常,采用电动智能热盖,能够自动感应不同高度的耗材,自动压紧耗材,压力均匀且恒定,从而能够减少试剂蒸发和人工误差,提高实验准确度和可重复性。

02耗材形变

对于蒸汽的泄漏,大部分人认为是热盖的压力不够所致。热盖的压力固然很重要,但这仅仅是一个方面,其实耗材也很关键。

PCR 孔板通常为塑料材质,在受热后发生膨胀,产生较大地变形,用于放置 PCR 孔板的 PCR 金属基座则受热膨胀率极小,PCR 孔板受热膨胀后不能正常沿平面延展进而中间形成拱起状态,从而造成上方热盖不能全面地与 PCR 孔板上表面充分接触,造成温度、压力不均,引起 PCR 孔板边缘试剂的蒸发,影响 PCR 检测效果。

03耗材密封不严

热盖与耗材压紧并不等于盖紧了 PCR 管盖,PCR 孔板质量参差不齐。优质的耗材,管口和盖子表面光滑,盒盖后密封性好,不易泄漏。而劣质耗材,管口不平,有径向纹路,容易造成泄漏,甚至蒸干。

因此在PCR实验中,尽量选择优质、合适的耗材。同时也可以扩大反应体系,尽量减少体系蒸发对反应的影响。


2022-12-13 14:44:16 186 0
灭菌器使用方法你知道吗?

灭菌器:灭菌器是一种可以杀死或去除传播介质上的所有微生物,包括细菌孢子和非致病性微生物的仪器。通常有三种方式: 湿热消毒灭菌、干热消毒灭菌、化学消毒灭菌。


灭菌器使用


压力蒸汽灭菌器

向外筒加水,并将消毒过的物品放入内筒。盖上盖并拧紧螺丝使其紧紧密封。灭菌器用煤气或电炉加热,同时打开排水管以排出其中冷空气。否则,压力表上显示的压力并不全是蒸汽压力,灭菌将不完整。

在所有冷空气排出后 (即,当水蒸气不断从排气阀排出时),关闭排气阀。继续加热,当压力表逐渐上升到所需压力 (通常为101.53 kPa,即15镑/英寸2,温度为 ℃) 时,调解火势,保持压力和温度 (注意不要压力过大,以免发生事故),保持15 ~ 30分钟。灭菌时间到达后,停止加热。当压力降至零时,慢慢打开排气阀以除去残留气体,并打开盖子以获取物料。当压力没有降至零时,不要突然打开排水龙头,以免液体从消毒器中喷出。


干热灭菌器

将培养皿、吸管、试管和其他玻璃设备装入盒子,并在门关闭的情况下加热。当温度上升到160 ~ 170 ℃ 时,保持温度2小时。到达时间后,停止加热。当温度自然下降到40 ℃ 以下时,你可以打开门拿起物体。否则,冷空气会突然进入,很容易导致玻璃破裂; 并且热空气溢出,这经常会灼伤提取器的皮肤。一般秸秆、试管、培养皿、凡士林、液体石蜡等可以用这种方法进行灭菌。


在选择灭菌锅时没有头绪,千挑万选后发现Yamato灭菌锅是个不错的选择。


Yamato灭菌锅优势

1. 更快冷却:标准装备有冷却风叶,大幅缩短冷却时间。

2.降低腐蚀 :内腔采用3mm镜面不锈钢,减少液滴附着可能,降低腐蚀性物质对腔体的侵蚀。

3.持久耐用:设计使用寿命20年。


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2021-11-25 15:58:55 930 0
sigma3k30离心机盖子盖不上
刚才离心还没事,Z后两个……离心机盖不上了……应该是什么问题?
2012-06-05 20:07:24 214 3
dxp软件是什么你知道吗?
 
2011-12-22 07:06:01 318 4
荧光定量PCR试剂

荧光定量PCR试剂本生(天津)健康科技有限公司供应:移液器吸嘴,离心管,冻存管,培养皿全系荧光定量PCR耗材,产品包括:PCR单管、PCR八联管、96孔板、384孔板。

CG编号    产品描述    包装规格

DBI-2073    Bestar® SybrGreen qPCR Master Mix    
DBI-2043    Bestar® SybrGreen qPCR Master Mix    
DBI-2044    Bestar® SybrGreen qPCR Master Mix    
DBI-2074    Bestar® qPCR Master Mix (Taqman Probe)    
DBI-2041    Bestar® qPCR Master Mix (Taqman Probe)    
DBI-2042    Bestar® qPCR Master Mix (Taqman Probe)    
DBI-2141    Storm star qPCR Master Mix (Taqman Probe)    
DBI-2142    Stormstar qPCR Master Mix (Taqman Probe)    
DBI-2143    Storm star SybrGreen qPCR Master Mix    
DBI-2144    Stormstar SybrGreen qPCR Master Mix    
DBI-2241    Storm star qPCR Master Mix (Taqman Probe)(UNG)    
DBI-2242    Storm star qPCR Master Mix (Taqman Probe)(UNG)    
DBI-2243    Stormstar SybrGreen qPCR Master Mix (UNG)    
DBI-2244    Stormstar SybrGreen qPCR Master Mix (UNG)    
DBI-2220    Bestar® qPCR RT Kit ( gDNA Remover )    
DBI-2222    Bestar® qPCR RT Mix ( gDNA Remover)    
DBI-2223    Bestar® one step RT qPCR kit ( SybrGreen )    
DBI-2224    Bestar® one step RT qPCR kit ( SybrGreen )    
DBI-2225    Bestar® one step RT qPCR kit ( SybrGreen )    
DBI-2226    Bestar® one step RT qPCR kit ( Taqman Probe )    
DBI-2227    Bestar® one step RT qPCR kit ( Taqman Probe )    
DBI-2228    Bestar® one step RT qPCR kit ( Taqman Probe )    
DBI-2231    Bestar® HRM Master Mix    
DBI-2232    Bestar® HRM Master Mix    
DBI-2233    Universal qPCR Mix (Taqman probe)    
DBI-2234    Universal qPCR Mix (Taqman probe)    
DBI-2235    High-throughput qPCR Mix (Taqman probe)    
DBI-2236    High-throughput qPCR Mix (Taqman probe)

包装规格:

25 ml    
5 ml    
1 ml    
5 ml    
200 Reaction    
100 Reaction (50uL)

荧光定量PCR试剂

产品优势:本生生物代理实验室R耗材品种全,可替代仪器原厂耗材,性价比高,质量稳定,对用户可以节省实验成本。

适应客户:医院检验科PCR实验室,验室;第三方检测机构,科研院所,大专院校,制药厂,试剂生产厂家,疾控,检验检疫。

2021-10-13 15:23:06 306 0
透明盖0.2ml PCR八联管配荧光定量PCR八联盖
透明盖0.2ml PCR八联管配荧光定量PCR八联盖 本生生物公司供应:ELISA试剂盒,动物血清,荧光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量离心管,进口冻存管,细胞培养皿,培养板,培养瓶,进口吸头,仪器及手套,色谱耗材,针头过滤器,分光光度计。

0.2 ml PCR八联管  (透明色)

0.2 ml PCR八联管  (乳白色)

聚合酶链式反应:

同义词 PCR(生物学的聚合酶链反应)一般指聚合酶链式反应
聚合酶链式反应(PCR)是一种用于放大扩增特定的DNA的片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的特点是能将微量的DNA大幅增加。

V2081-C V2008-C(透明盖) 0.2 ml PCR八联管配荧光定量PCR八联管光学平盖

货号品名颜色规格
V2081-C0.2ml PCR八联管透明120条/包,10盒/箱
V2081-M0.2ml PCR八联管乳白色120条/盒,10盒/箱

 

透明盖0.2ml PCR八联管配荧光定量PCR八联盖产品优势:本生生物代理实验室耗材,PCR耗材品种全,可替代仪器原厂耗材,性价比高,质量稳定,对用户可以节省实验成本。

Tips 0.5-10ul进口加长吸嘴,无色, 灭菌, 替换板盒装

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智能空盒配进口加长 10ulTips96孔

BS-1159人26S蛋白酶体(26S PSM)ELISA试剂盒

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BS-1161人心型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)ELISA试剂盒

BS-1162人腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)ELISA试剂盒

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5ML 离心管盒

智能空盒适配BASIX短吸头10ul吸头

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温馨提示:不可用于临床。

   


2020-11-05 16:00:34 435 0
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2018-07-14 12:48:33 561 1
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频谱分析仪这些保养方法你知道吗?

据西安安泰频谱分析仪维修小编所知,校准频谱分析仪简称频谱仪,是用来显示频域信号幅度的仪器,在射频领域有“射频万用表”的美称。在射频领域,传统的万用表已经不能有效测量信号的幅度,示波器测量频率的信号也比较困难,而这正是频谱分析仪的强项。

  频谱仪与示波器属于两种类型的仪器,示波器主要显示时域信号幅度的变化,而频谱仪显示的是频域信号幅度的变化。西安安泰频谱分析仪维修小编认为,对于研究射频的工程师和爱好者,频谱仪是工作的好帮手,它可以形象地展示一定频率范围内信号的幅度,可以据此发现信号的存在和不同类型信号的特征。随着科技的发展,频谱仪也从传统的模拟线路进化到数字化频谱仪,被赋予更多的功能,以适应不断出现的复杂信号。

  频谱分析仪在射频领域应用非常广泛。频谱仪最基本的作用就是发现和测量信号的幅度。频谱仪可以以图示化的方式显示设定频率范围内的射频信号,信号越强,频谱仪显示的幅度也越大。通过这种特性,频谱仪被用来搜索和发现一定频段内的射频信号,广泛应用在监测电磁环境、无线电频谱监测、电子产品电磁兼容测量、无线电发射机发射特性、信号源输出信号品质、反无线等领域。

      频谱仪可以测量射频信号的多种特征参数,包括频率、选频功率、带宽、邻道功率、调制波形、场强等。西安安泰频谱分析仪维修ZX小编发现,在射频信号的频率测量方面,虽然频率计是专业的设备,但遇到时分多址的信号(GSM移动电话、IDEN、TETRA的信号)、跳频的信号、宽带的信号,普通频率计无法准确计数,功率计无法及时测量,而频谱仪由于基于信号捕捉,则可以有机会测量这些信号。针对这些常见的不稳定信号,很多频谱仪还在测量软件上做了优化,提供专用的自动测量工具。


  由于频谱仪具有图示化射频信号的能力,频谱图可以帮助我们了解信号的特性和类型,有助于ZZ了解信号的调制方式和发射机的类型。在军事领域,频谱仪在电子对抗和频谱监测中被广泛应用,不同类型的雷达信号、通信电台信号、应答机信号、“敌我”识别器信号都有各自不同特征的频谱图。在民用无线电管理领域,通过频谱图,我们可以及时发现非法使用的频率,这比传统扫描听的效率要多。

      在不明干扰源的定位中,频谱图有助于判断干扰信号的类型,并推断出产生干扰信号的可能设备,以缩小排查范围。频谱仪还是一部很好的场强仪,具有比较大的动态,一些具有自动测量功能的频谱仪可以方便地读出目标信号的场强数值,同时可以显示目标频率周边的情况。但,西安安泰频谱分析仪维修ZX小编了解到,实际应用中,有很多手持频谱仪就替代了场强仪。


2021-08-20 11:29:27 784 0
频谱分析仪这些保养方法你知道吗?

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  频谱仪与示波器属于两种类型的仪器,示波器主要显示时域信号幅度的变化,而频谱仪显示的是频域信号幅度的变化。西安安泰频谱分析仪维修中心小编认为,对于研究射频的工程师和爱好者,频谱仪是工作的好帮手,它可以形象地展示一定频率范围内信号的幅度,可以据此发现信号的存在和不同类型信号的特征。随着科技的发展,频谱仪也从传统的模拟线路进化到数字化频谱仪,被赋予更多的功能,以适应不断出现的复杂信号。

  频谱分析仪在射频领域应用非常广泛。频谱仪最基本的作用就是发现和测量信号的幅度。频谱仪可以以图示化的方式显示设定频率范围内的射频信号,信号越强,频谱仪显示的幅度也越大。通过这种特性,频谱仪被用来搜索和发现一定频段内的射频信号,广泛应用在监测电磁环境、无线电频谱监测、电子产品电磁兼容测量、无线电发射机发射特性、信号源输出信号品质、反无线等领域。

      频谱仪可以测量射频信号的多种特征参数,包括频率、选频功率、带宽、邻道功率、调制波形、场强等。西安安泰频谱分析仪维修中心小编发现,在射频信号的频率测量方面,虽然频率计是专业的设备,但遇到时分多址的信号(GSM移动电话、IDEN、TETRA的信号)、跳频的信号、宽带的信号,普通频率计无法准确计数,功率计无法及时测量,而频谱仪由于基于高速的信号捕捉,则可以有机会测量这些信号。针对这些常见的不稳定信号,很多中频谱仪还在测量软件上做了优化,提供专用的自动测量工具。


  由于频谱仪具有图示化射频信号的能力,频谱图可以帮助我们了解信号的特性和类型,有助于最终了解信号的调制方式和发射机的类型。在军事领域,频谱仪在电子对抗和频谱监测中被广泛应用,不同类型的雷达信号、通信电台信号、应答机信号、“敌我”识别器信号都有各自不同特征的频谱图。在民用无线电管理领域,通过频谱图,我们可以及时发现非法使用的频率,这比传统扫描听的效率要高得多。

      在不明干扰源的定位中,频谱图有助于判断干扰信号的类型,并推断出产生干扰信号的可能设备,以缩小排查范围。频谱仪还是一部很好的场强仪,具有比较大的动态,一些具有自动测量功能的频谱仪可以方便地读出目标信号的场强数值,同时可以显示目标频率周边的情况。但,西安安泰频谱分析仪维修中心小编了解到,实际应用中,有很多手持频谱仪就替代了场强仪。

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2021-09-06 14:38:12 942 0
示波器的这些安全操作你知道吗?

很多人都知道示波器是用来干什么的,也知道示波器都有哪些种类和品牌,当然也知道如何操作。但是,有人知道示波器的安全操作都有哪些吗?下面,请听听西安安泰示波器维修中心小编给大家的科普,希望能帮到大家!

      西安安泰示波器维修中心小编为大家整理了这十一点示波器的安全操作,希望大家日常能够用到:

  1、机壳必须接地

  为了安全,示波器的机壳必须接地。通电前,应检查电源线有无磨损、断裂和裸露导线,以免引起触电事故:检查电源电压是否与仪器工作电压相符。

  2、注意使用环境

  避免在直射阳光下或明亮的环境中使用示波器。在强光下使用示波器时,西安安泰示波器维修中心小编建议大家要用遮光罩,并注意光点不要长时间停留在一点上,以免损伤荧光屏。还应避免在强磁场中使用示波器(例如周围放置有大功率变压器会产生强磁场),因为受外界磁场的影响,测出的波形会有重影和嗓波干扰,甚至使显示的波形失真。

  3、测试前的估算

  测试前,应首先估算被测信号的幅度大小,若不明确,可先将示波器的 V/DIV 选择开关置于最大档,避免因电压过高而损坏示波器。

  4、注意扩展档位和旋钮的位置:

  大部分示波器都设有扩展档位和旋钮,定量测量时一定要检查这些旋钮所处的状态,否则会引起读数错误。

  5、直流输入方式:

  在使用示波器直流输入方式时,应先将示波器输入接地,确定好示波器的零基线,才能方便地测量被测信号的直流电压。

  6、测高压应注意安全:

  采用示波器测试高压电路时,西安安泰示波器维修中心小编提示大家,要特别注意安全。要站在绝缘物上,单手操作,不要触及设备和其他接地物体,更不要接触高压测试点。接探头时,先切断高压测试电路电源,接好后,再进行测试。

  7、垂直方式的选择:

  当同时观察两路波形时,将垂直方式 ( VERTICAR MODE) 中 的 ALT 按 钮 按下,即两个通道交替显示波形。若仅观察一路波形,将 CH1 或 CH2 按下即可,但不要选 ALT 交替方式,以避免相互间的干扰。

  8、幅度的控制:

  荧光屏显示波形的幅度,通过调节电压衰减 ( VOLTS/DIV) 的系数,一定要控制在 8 格之内,如果超出 8 格,将无法观察,这对示波器的正常工作不利。

  9、示波器可作为高内阻电压表使用:

  示波器可作为高内阻的电压表使用,因被测电路中有一些高内阻电路,若用普通万用表测电压,由于万用表内阻低,测量结果会不准确,同时还可能会影响被测电路的正常工作;而示波器的输入阻抗比万用表高得多,测量结果不但较为准确,而且还不会影响被测电路的正常工作。

  10、注意被测信号的幅度:

  被测信号电压不应超过示波器规定的输入端最大输入电压(峰值),以免损坏示波器。

  11、注意日常维护保养:

  示波器在长期使用中,要保持干燥和清洁,在使用时应防止振动和冲击。用完后,关断电源,拆除引线,以减少偶然事故发生。不用时,加外罩,防止灰尘侵入,以免造成尘埃积聚而引起高压飞弧,甚至损坏。


2021-10-27 10:24:50 383 0
血清移液管的特点你知道吗?

  血清移液管的特点你知道吗?

  移液管由医用级高级聚苯乙烯(GPPS)制成,非常适合清晰观察并减少移液器表面的液体附着,以确保准确输送。通用设计使移液管适 用于大多数品牌的辅助装置。质量是通过按照ISO9001和ISO13485对生产过程的控制和管理来保证的。提供六种不同尺寸的灭菌或非灭菌:1、2、5、 10、25、50ml。刻度经过校准,可精确分配至 ±2% 以内。

  除管身有不同精度刻度标记外,用不同的颜色环标记不同的容量规格,更便于工作时的识别和使用;部分管端部带有滤芯过滤塞,能更好的防止在吸取 样品时发生交叉污染。

  

  血清移液管的特点你知道吗?我司由具有行业背景和丰富市场经验的业人士组成,于为生命科学研究域提供产品,为广大科研工作者提供服务。 既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求,也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。

2021-12-27 10:37:14 194 0
锥形培养瓶的特点你知道吗?

  锥形培养瓶的特点你知道吗?


  锥形培养瓶(简称摇瓶)是培养基配置、混合及储存的理想选择,主要用于培养对氧气要求较高的细胞质,也可用于悬浮液中培养细菌、真菌、动植物细胞。规格:125ml摇瓶、250ml摇瓶、500ml摇瓶、1000ml摇瓶、2.8ml摇瓶、5ml摇瓶,本生(天津)健康科技有限公司供应:移液器吸嘴,ELISA试剂盒,动物血清,全系荧光定量PCR耗材,产品包括:PCR单管、八联管、96孔板、384孔板。

  【产品特点】

  摇瓶采用医用级PETG、PC材质,符合食品药品接触管理要求;

  产品采用独立真空包装,取用方便,避免交叉感染;

  瓶体无缝,一次性成型,避免表面结痕或者细胞撞壁破裂;

  表面光洁度达到镜面要求,通透性接近玻璃,减少了细胞贴壁的风险;

  瓶口尺寸符合国际SBS标准,适合于生物反应器的快捷连接;

  采用电子束灭菌,SAL=10-6,确保无DNase/RNase,无热源、无内毒素;

  锥形培养瓶的特点你知道吗?我司由具有行业背景和丰富市场经验的业人士组成,于为生命科学研究域提供产品,为广大科研工作者提供服务。 既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求,也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。

2021-12-27 10:54:28 232 0
蒸发时蒸发皿内出现较多晶体如果持续加热可能产生的后果
 
2015-06-02 01:23:36 450 2

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