如何应用流式细胞仪检测荧光蛋白的表达量

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  巧慧12 2015-02-12 00:00:00

  可以.这个是流式细胞仪一个常见的应用. 上流式细胞仪以前，需注意的是 1.细胞打散到单细胞的悬液，没有聚团成块.如果有顾虑的话用纱网过滤一次才用. 2.细胞悬液的浓度不能过高和过低.详请参考你的仪器说明建议值.我的经验每毫升一百万足足够了.少些读取慢些也没有大问题，一支样品少过十万的话，就很容易得不到足够的数据.太多则读取过快，准确性可能降低，更多更危险，可能造成仪器管道堵塞. 3.如果上机时间能保证，细胞直接打散均匀在PBS里面就可以上机了，除了贴壁细胞需要的胰酶处理按照普通传代步骤来做，之后洗一次，没有什么其他处理.如果细胞悬液制好后可能需要等待（超过半小时），则用1-2%多聚甲醛或溶液保存细胞.注意避光避免丢失荧光信号.这样保存放4度冰箱一两个礼拜之后也还是可以上机，误差不大.

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