流式细胞术散点图参数中FSC-A与FSC-H是什么意思

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  乖乖小猪5188 2017-11-27 09:21:38

  前向角散射，即FSC与细胞直径平分正相关（大小），所以我们平时上机的时候，有时用FSC做阈值，排除碎片及其它颗粒，避免干扰。 侧向角散射，即SSC是指与激光束正交90度方向的散射信号，它对细胞膜、胞质、核膜的折射率更敏感，可以提供细胞内结构及颗粒性质的信息 FL2-A ，FL2-W 中A和W的含义 FL2-H1024，FL2-H256 中H的含义，1024和256又代表什么呢。 名词“道数”是怎么定义的？ w好像代表脉冲宽度，但是脉冲宽度反映的是细胞什么特性呢？ H-脉冲高度反映细胞什么特性呢？ 好像你做的是细胞周期分析， 如果是，FL2－A代表的是荧光峰面积，反映了细胞DNA含量（前提是用Rnase处理去掉了RNA）； FL2－W代表的是荧光峰宽度，这个值可以区分单个细胞和双联体细胞； 下面的1024和256是定义数据文件大小的（记得培训时工程师这么说的） －H好像没有什么特殊含义 ，就是指这个通道了， 一般检测那个通道的荧光就是选择哪个－H，比如FSC－H，SSC－H，FL1－H等等 流式涉及的调节参数太多了，主要的有： 1.电压 2.阈值 3.荧光补偿 4.通道选择：需要哪些通道、选择面积/高度/宽度、线性/Log 5.停止条件选择 太多太多了 FL2-A代表FL2 AREA，FL2-H即FL2 HEIGHT，通过这两个参数，可以将粘连体排除出去，因为粘连体跟多倍体有相同的FL2-A，但是FL2-H远远大于正常细胞。 正确的设置是将FL2-A设置在200附近。当然，不设在200也可以，但是那样会对日后的分析造成困难。200道是对周期分析Z佳的参数。 FSC是前向角散射，一般代表细胞的体积，值越大代表细胞越大。 SSC是侧向角散射，一般代表细胞的颗粒度，值越大代表细胞的颗粒度越大，颗粒度指细胞表面的皱折度，细胞内亚细胞器、颗粒的数目等。

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