酸性物质上HPLC制备，大家都加什么酸

ACE色谱柱可以提供从UHPLC到HPLC再到制备型HPLC的易扩展性。

相同的质量控制，可以确保不同批次色谱柱的高重现性，也可以保证您更容易地在UHPLC和HPLC方法之间进行转换，或需要分离和纯化目标化合物时放大到制备应用上。

柱效当然会改变，但可以预料的是，谱带间距（选择性）将相同。

图14阐明了当使用相同的ACE键合相但不同粒径填充的色谱柱进行操作时，可以预见到分析物一致的谱带间距类型（选择性）。

图 14：将ACE固定相从UHPLC（2μm）扩展到HPLC（3μm和5μm）再至制备型HPLC（10μm）时，选择性得到了保留与保证。

条件
流动相：35:65 MeCN/0.1%TFA（溶于水中）
温度：22 ℃
波长：254 nm

分析物
1. 尿嘧啶
2. 4-羟基苯甲酸
3. 乙酰水杨酸
4. 苯甲酸
5. 2-羟基苯甲酸
6. 对羟基苯甲酸乙酯

试验样品的这些色谱图在填充有相同的键合相但不同粒径的色谱柱上以相同的流动相条件运行，结果阐明分离从UHPLC扩展到HPLC再到制备型HPLC的容易程度。

当使用ACE Excel UHPLC色谱柱进行快速方法开发，且该方法必须可转移到HPLC时，易扩展性则显得特别有价值。

图 15：ACE固定相可以提供相同的选择性，无论它们是UHPLC、HPLC还是制备型HPLC色谱柱

条件
色谱柱：2.1 x 50 mm
流动相：1.4分钟内从30% B至90% B
A = 20mM甲酸铵+ 0.1％甲酸
B =乙腈+ 0.1％甲酸
梯度：在30％B时持续0.30分钟，在1.10分钟内从30至90％B，在90％B时持续0.40分钟
流速：0.5 mL/min
柱温：30ºC
检测：AB Sciex Triple Quad（TM）5500 MS，以ESI（+）模式运行
仪器：岛津Prominence UFLC系统

分析物
1. 甲苯咪唑
2. 普罗替林
3. 阿米替林
4. 洛哌丁胺

试验样品的这些色谱图在ACE Excel C18 2μmUHPLC色谱柱、ACE C18 3μmHPLC色谱柱和ACE C185μm色谱柱上以相同的流动相条件运行，结果阐明ACE固定相的选择性一致，无论填充粒径如何。

这使得从UHPLC到HPLC或HPLC再到UHPLC的方法转移更加容易。同时也使得从分析型应用扩展到制备型应用更加容易。

        HPLC一般指GX液相色谱，是一种多功能的分析方法，可对各种化合物进行分离和定量。它广泛应用于生命科学领域的应用、药物分析、食品分析、环境监测、精细化工产品分析等众多领域。HPLC的技术都具有基本原理，比如样品引入，色谱柱中样品组分的分离以及zui后使用多种检测技术进行检测。想了解制备型HPLC要先对分析型HPLC进行初步研究，两种技术之间的基本区别是操作规模，下面将ZD介绍区别：

        明确分析的目标

        在进行分析之前，你应该对分析目标有清楚的了解。你是希望获得有关样品成分纯度的信息然后进行定性，还是希望能快速分离、纯化产品。在DY种情况下，你可以使用分析型HPLC分离。在第二种种情况下，你可以使用制备型HPLC。

        规模

        在分析型中，样品通量很小，通常为微升水平，而在制备型中，进样量很大，是分析型的几百倍上千倍，从而可以产生毫克至克级的纯化合物。为了达到这个效果，制备型选用的是大流速的泵，粗粒径填料，粗管径的色谱柱，以提高色谱柱的载样量。

        尺寸

        与分析HPLC柱相比，制备型HPLC柱比较大。分析色谱柱通常直径为4.6mm。恒谱生分析HPLC色谱柱基于高纯硅胶，采用独特键合技术，具有优异的峰形，更好的选择、灵敏性和重要性。基质金属含量低，对所有类型的分析物均表现良好峰形。机械强度稳定性好，质控严格，确保优异的色谱柱性能和延长色谱柱寿命。优势在于：平衡时间短；高流速，低背压；使用寿命长；缩短分析时间，节约溶剂；高柱效，分离度佳。

        而制备色谱柱的内径通常在50-200mm的范围内。恒谱生C8、C18、C4制备液相色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝等组成。柱管用316L不锈钢制成，不锈钢柱内壁多经过抛光，提高柱效，减小管壁效应。广泛应用于医药、环境和食品等多个领域，满足从实验室分析到工业大规模制备的不同需求。

        与制备色谱柱相比，分析色谱柱填充的固定相粒径范围在3-5μm之间，而制备色谱柱填充的是大于10μm的较大颗粒。这样的粒径允许更高的塔流速，较长的长度和较宽的色谱柱直径可提供较低的背压。

        进样方式

        运用分析色谱分析时通常涉及多种的样品进样量，因此自动进样器是首要推荐的进样方式。相反，在制备分离中，样品数量很少，甚至可能只有一个样品只是进样量较大，因此可以使用大体积进样环。

         探测器选择

         由于分析要求，通常只将非破坏性检测器（例如UV，荧光或折射率检测器）用于制备级应用。与分析色谱分离相比制备色谱样品进样量大，因此检测器具有更大的流通池。