如果要使用PCR扩增一段已知的DNA序列，要如何设计引物

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  祎祎1208 2011-06-16 00:00:00

  可以找公司合成

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  四个人高兴*管 2011-06-15 00:00:00

  在指定的DNA序列上找一小段（一般18-30碱基）序列，一般要求GC含量在40-60%之间，没有错配和发夹结构（delta G值越小越好），如果成对设计，要求正负引物Tm值相近

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  一只小鸟5711 2011-06-15 00:00:00

  把这段基因输入设计软件里，调节引物位置，使变性温度在94度，退火温度=Tm-（5到10度） 延伸温度72度左右，满足这些条件基本就可以了，当然还要根据实际情况多次实验得到Z佳引物。如果你要扩增整个的基因，引物必须要在起始密码子之前，或包含起始密码子。Z后加上酶切位点就可以了。

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