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- lksjy34 2017-12-15 12:17:21
- 详情可到索莱宝官 网 以下信息仅供参考: protease inhibitor从广义上指与蛋白酶分子活性ZX上的一些基团结合,使蛋白酶活力下降,甚至消失,但不使酶蛋白变性的物质。从放线菌发酵液中分离到亮肽素、抗痛素、糜蛋白酶抑素、抑弹性蛋白酶醛、抑胃蛋白酶素、磷酰胺素等,能分别YZ胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、糜蛋白酶、弹性蛋白酶、胃蛋白酶、金属蛋白酶等各种蛋白酶。都属于蛋白酶YZ剂。 蛋白酶YZ剂作用 破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速的被YZ以保持蛋白质不被降解。在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶YZ剂以防止蛋白水解。以下列举了5种常用的蛋白酶YZ剂和他们各自的作用特点,因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同,因此需要调整各种蛋白酶的浓度。由于蛋白酶YZ剂在液体中的溶解度极低,尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶YZ剂时应充分混匀以减少蛋白酶YZ剂的沉淀。 蛋白酶YZ剂有哪些 PMSF 1)YZ丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶,凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶); 2)10mg/ml溶于异丙醇中; 3)在室温下可保存一年; 4)工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1.0mmol/L); 5)在水液体溶液中不稳定,必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF。EDTA 1)YZ金属蛋白水解酶; 2)0.5mol/L水溶液,pH8~9; 3)溶液在4℃稳定六个月以上; 4)工作浓度:0.5~1.5mmol/L. (0.2~0.5mg/ml); 5)加入NaOH调节溶液的pH值,否则EDTA不溶解。 胃蛋白酶YZ剂(pepstantin) l)YZ酸性蛋白酶如胃蛋白酶,血管紧张肽原酶,组织蛋白酶D和凝乳酶; 2)1mg/ml溶于甲醇中; 3}储存液在4℃一周内稳定,-20℃稳定6个月; 4)1作浓度:0.7ug/ml(1umol/L) 5)在水中不溶解。 亮抑蛋白酶肽(leupeptin) 1)YZ丝氨酸和巯基蛋白酶,如木瓜蛋白酶,血浆酶和组织蛋白酶B; 2)lOmg/ml溶于水; 3)储存液4℃稳定一周,-20℃稳定6个月; 4)工作浓度0.5ug/ml。 胰蛋白酶YZ剂(aprotinin) 1)YZ丝氨酸蛋白酶,如血浆酶,血管舒缓素,胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶; 2)lOmg/ml溶于水,pH7~8 3}储存液4℃稳定一周,-20℃稳定6个月; 4)工作浓度:0.06~2.0ug/ml(0.01~0.3umol/L); 5)避免反复冻融: 6)在pH>12.8时失活。 蛋白酶YZ剂混合使用 35ug/ml PMSF………………………丝氨酸蛋白酶YZ剂 0.3mg/ml EDTA……………………金属蛋白酶YZ剂 0.7ug/ml胃蛋白酶YZ剂(Pepstatin)…………酸性蛋白酶YZ剂 0.5ug/ml亮抑蛋白肽酶(Leupeptin)…………广谱蛋白酶YZ剂
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