HPLC、LC-MS或LC-MS-MS什么意思

1.利用ACE键合相的固定相选择

分离度方程式可以确定影响分离度的参数：柱效（N）、容量因子（k）和选择性（α）。

在过去几年里，柱效和使用超GX色谱柱（被称为“UHPLC”色谱柱）作为实现分离目标的手段已得到了极大的重视。

UHPLC已通过更快速的分离和更快速的方法开发提高实验室生产力来证明了其价值。

然而，选择性往往被忽视，且其重要性也被强调柱效所掩盖。这是令人遗憾的。

在影响分离度的三个参数中，选择性是Z为重要的。

（参见图1）通过利用柱效和选择性，通常可以实现更好和更快的分离。

图 1：N、α和k对分离度（Rs）的影响

提高N，α或k可以提高分离度（Rs）。

然而，从这些图中可以看出，随着N或k值的提高，对分离度的改善效果也逐渐降低。

另一方面，提高选择性（α）则没有这个问题，因此其成为开发分离方法时的Z佳优化变量。

在反相色谱中，固定相与分析物之间存在多种相互作用的机制，这可以用来实现分离。

这些相互作用机制包括：疏水性结合、π-π、氢键、偶极-偶极和形状选择性。

不同类型的键合相将提供其中一种或多种相互作用机制。表1列出了ACE键合相和每种可能的主要相互作用机制，这取决于分析物和流动相条件。

表1: 比较不同键合相的分离机制/相互作用                                                                                  

利用键合相的选择性实现更好的分离。
图2表明了两种ACE键合相即C18-AR与苯基之间的选择性差异。
尽管两种键合相提供了强π-π和偶极-偶极相互作用的可能性，但是在其它可能的相互作用机制（特别是疏水性结合）的强度方面，它们存在显著差异。

C18-AR可能具有其它不同的分离机制，可以为复杂的混合物带来更好的分离效果。对于其他混合物，可能不是这种情况，这是ACE键合相的优势。

当开发分离方法时，ACE键合相可以提供各种可供选择的重要保留机制。

非常强大且独特的C18-AR和C18-PFP相只有在ACE和ACE Excel色谱柱中可以获得。
通过利用柱效和选择性，可以实现更好的分离。

图 2：C18-AR与苯基相之间选择性差异的比较

色谱柱尺寸： 50 x 2.1 mm, 3 μm
流动相：

A= 20mM KH2PO4,pH 2.7（溶于水中）；
B= 20mM KH2PO4,pH 2.7（溶于甲醇/水中：65:35, v/v）
流速： 0.6 mL/min
温度： 60 ℃
检测： UV 214 nm
梯度： 5分钟内从3至B，并持续1分钟。

样品：
1. 甲硝唑
2. 3-羟基苯甲酸
3. 苯酚
4. 苯甲醇
5. 咖啡茵
6. 水杨酸
7. 喹喔啉
8. 苯甲酸
9. 奎宁
10. 非那西丁
11. 1,4-二硝基苯
12. 1,3,5-三硝基苯
13. 呋塞米
14. 1,3,5 -三甲氧基苯
15. 吡罗昔康
16. 卡维地洛
17. 苯甲酸乙酯
18. 去甲替林

C18-AR相的疏水性更大，这可以为色谱峰对（13,14）和（15,17）提供更多的保留值和更佳的选择性。还要注意C18-AR与苯基相的洗脱顺序有很多变化。

图3给出了键合相选择能力的另一实例。

一个分离是用C18键合相的UHPLC色谱柱完成，另一个分离是用C18-PFP键合相的UHPLC色谱柱完成。

C18-PFP键合相提供的额外分离机制，使得总体分离效果更佳出色。

图 3：ACE Excel可以获得zhuo越的分离度和峰形：药物及其相关物质的UHPLC结果

条件
色谱柱尺寸：50 x 2.1mm
流动相：

A = 5mM甲酸（溶于水中）
B = 5mM甲酸（溶于甲醇中）
梯度：5分钟内从3至B
流速：0.6 mL/min
温度：40 ℃
检测：UV 254 nm

样品
1. 对乙酰氨基酚
2. 氢氯噻嗪
3. 甲基苯基亚砜
4. 甲基苯砜

在C18 UHPLC色谱柱和C18-PFP色谱柱上同样快速地产生色谱图。

然而，C18-PFP色谱柱可以为色谱峰对（13,14）和（15,17）提供更佳的选择性，因此能够提供优越的总体分离性能。

2.ACE和ACE Excel硅胶基质固定相几乎消除了硅醇基对色谱分离的不利影响，并且在为碱性化合物提供zhuo越峰形方面赢得了口碑。  

峰拖尾可以降低分离度，降低灵敏度，甚至干扰准确度和精密度（图4）。  

峰拖尾有许多潜在的原因，但分离碱性物质时的主要原因是硅胶固定相载体颗粒表面上的酸性硅醇基与分析物上的氨基之间的相互作用（图5）。  

图 4：峰拖尾对分离度和灵敏度的影响  

随着峰拖尾（Tf，拖尾因子）从1.0增加到2.0，分离度（Rs）从1.5下降到0.87。  

由于峰宽增加以及峰面积保持不变，灵敏度（峰高）也随着峰拖尾的增加而下降。  

ACE色谱柱采用具有极低硅醇活性的超惰性硅胶制成。  

这种超纯硅胶采用ZL技术进行有效键合和彻底封尾。  

导致这种硅胶基质的固定相几乎消除了硅醇基对色谱分离的不利影响。  

ACE色谱柱的超惰性特性使其成为分离极性碱性化合物的理想选择。  

当分离复杂碱性化合物时,与其他现代碱性去活色谱柱相比，ACE色谱柱总是能给出明显更好的峰形和柱效（图6）。  

图 5：峰拖尾相互作用  

硅胶固定相载体表面上的酸性硅醇基可形成与碱性化合物相互作用的离子交换位点。  

这种离子交换的相互作用通常可以导致峰保留（二次保留），并当采用反相HPLC分离胺类化合物时引起峰拖尾。  

一种几乎消除了硅醇基对色谱分离不利影响的硅胶基质固定相  

图 6：峰拖尾比较  

条件
色谱柱尺寸：50 x 2.1 mm
流动相：40％甲醇，60％水
流速：0.2 mL/min
温度：22ºC
样品：吡啶  

报告了碱性化合物（吡啶）在各种常见C18色谱柱上的塔板数。  

在10％峰高下测量塔板数，以使峰拖尾纳入在测量中。  

ACE C18-PFP由于其超惰性性质而达到了Z高塔板数。  

3.ACE Excel为UHPLC带来了享有盛誉的ACE HPLC性能  

重要的是要认识到色谱柱的选择性和柱效是独立的变量，在开发分离方法时您不必选择使用一种而不使用另一种。事实上，为了实现Z佳的总体分离效果，您应当对上述两个变量以及保留值进
行优化。当需要实现高速分离时尤其如此。（参见图7）  

图 7：利用柱效和键合相选择性来开发更快的分离方法  

条件：
流动相：  

A = 5mM甲酸（0.189）ml / L;
A = 5mM甲酸（溶于甲醇中）
柱温：40℃
检测：PDA, 254nm  

样品：
1. 阿司匹林
2. 非那西丁
3. 1,3-二硝基苯
4. 苯甲酸乙酯  

5. 尼美舒利
6. 布洛芬
7. 吲哚美辛

利用UHPLC色谱柱更高的柱效，可在更高的流动相流速下使用更短的色谱柱，以使这种混合物的分离时间缩短80%（相比HPLC色谱柱）。
然而，也可以通过优化键合相的选择性来进一步缩短分离时间，在这个案例中，就是利用了C18-PFP键合相所具有的增强的选择性。

与C18UHPLC色谱柱、C18 HPLC色谱柱相比，ACE Excel C18-PFP UHPLC色谱柱分别将混合物的分离时间缩短了80％以上以及96％，同时保持了所有峰的分离度。

ACE Excel UHPLC色谱柱的设计旨在充分利用低扩散、超高压UPLC®和UHPLC仪器（高达1000 bar），并可与所有市售UPLC和UHPLC系统相兼容。
ACE Excel UHPLC色谱柱可以为碱性化合物提供更佳的峰形，改善柱子与柱子之间的重现性，提供额外的利用多种分离机制的固定相，以及改善色谱柱的耐用性。

ACE Excel UHPLC色谱柱的可用性意味着色谱分析师在使用UPLC和UHPLC仪器时有更多的选择来获得更好的结果。

图 8：ACE Excel色谱柱提供快速、高分辨率的分离

条件
色谱柱：ACE Excel C18, 2 μm, 3.0 x 50 mm
流动相：60秒内从30%B至B
A =水+ 0.1％TFA B =乙腈
流速：2.5 mL/min
柱温：40ºC
压力：703 bar (10,335 psi)
检测：PDA, 254 nm
仪器：安捷伦1290 UHPLC
化合物
1. 乙酰苯胺
2. 苯乙酮
3. 苯丙酮
4. 苯丁酮
5. 二苯甲酮
6. 苯戊酮
7. 苯己酮
8. 苯庚酮
9. 苯辛酮

ACE Excel C18色谱柱可在不到60秒内提供这9种分析物的基线分离。

4.已经证实ACE HPLC色谱柱和ACE Excel UHPLC色谱柱具有持久耐用的、可靠的日常性能和zhuo越的色谱柱寿命。  

通过键合在硅胶固定相载体上的硅氧烷的酸化水解可以失去键合相，从而降低色谱柱的寿命。该酸水解随着流动相pH的降低和柱温的升高而增加。  

与C18相相比，较短的烷基相如C4和C3以及苯基相通常更容易失去键合相。此外，低纯度的硅胶固定相载体和低表面覆盖的固定相载体使得一些键合相更易于酸解。
由于使用超高纯度的硅胶固定载体粒子以及键合相的极高表面覆盖，ACE键合相表现出极高的稳定性。（参见图9）
尽管所有ACE键合相的稳定性都很优异，但是一些键合相并不像其它键合相那样稳定。例如，通常认为C18键合比柱长较短的烷基相、PFP相和苯基键合相更稳定。  

实际上，典型的苯基固定相稳定性不佳是该相在方法开发中不常被选择的主要原因之一。
为了解决这个问题而开发了ACE C18-AR，其允许色谱分析利用强大的π-π和偶极-偶极分离机制，并仍然享有C18相的坚固性及耐用性。  

如图10所示，ACE C18-AR不仅对典型的苯基键合相具有非常优异的稳定性，它甚至还比许多其他C18键合相表现出更佳的稳定性。  

类似地，ACE C18-PFP提供了多种分离机制，可以利用它们实现更佳的总体分离效果，同时从C18相的稳定性中受益。  

图 9：酸稳定性，pH 1.8  

条件
色谱柱：ACE 4.6 x 150 mm
流动相：50% CH3CN, 50%水
流速：1.0 mL/min
温度：22 °C
分析物：菲  

酸性暴露条件：
流动相：50% CH3CN 50% 0.1%TFA（溶于水中）（pH 1.8）
流速：1.0 mL/min
温度：22 ℃  

图10：加速柱稳定性研究：pH 1.9时80℃  

酸性暴露条件：
流动相：5:95 MeOH/0.1% TFA（溶于水中）（pH 1.9）
流速：0.20 mL/min
温度：80 ℃
色谱柱尺寸：50 x 2.1mm
分析物：菲  

使用设计用于加速柱降解下的条件，ACE C18-AR相显示保留损失极少，其寿命相当于高度稳定的ACE C18相。两种固定相均由相同的超纯硅胶而制成，而且比Zorbax SB-C18的耐久性更好(Zorbax SB-C18曾视作在高温和低pH条件下具有极好稳定性的固定相）。
正如预期的那样，基于低纯度硅胶（Waters Spherisorb ODS2）的C18键合柱在这些加速条件下寿命大大降低。
特别值得注意的是常规苯基色谱柱与ACE C18-AR的寿命比较结果。与ACE C18-AR相比，尽管使用高纯度二氧化硅，苯基色谱柱的寿命仍降低，这表明ACE C18-AR可能适用于那些使用苯丙基色谱柱寿命短的应用。  

将HPLC和UHPLC连接到通常被称为LC-MS的质谱仪上已经相当普遍。  

然而，质谱对可能从HPLC/UHPLC色谱柱上洗脱下来的微量的键合相（称为柱“流失”）非常敏感。柱  

流失可能会干扰分析结果，并且重要的是，LC-MS应用中所选择的色谱柱具有足够稳定的键合相以避免过量的柱流失。  

图11表明ACE C18-PFP色谱柱几乎没有“流失”干扰LC-MS分析。  

C18-PFP（以及ACE C18和ACEC18-AR）的稳定性使得这些色谱柱更适合LC-MS应用。  

图 11：ACE C18-PFP色谱柱的低柱流失使其成为LC/MS应用中的理想选择  

条件
色谱柱尺寸：50 x 3.0 mm
流动相：梯度：在5分钟内从5至95% B，95% B时持续5分钟
A: 0.1％甲酸(溶于水中)
B: 0.1％甲酸(溶于乙腈中)
流速：0.43 mL/min
温度：60ºC
检测：安捷伦1100 MSD ESI正离子快速扫描模式,快速扫描全50 – 1000 m/z
样品：空白运行  

柱流失可能会干扰LC-MS应用中目标分析物的检测和测量。  

ACE C18-PFP色谱柱未显示柱流失。  

所有ACE色谱柱的低流失特性使其非常适合LC-MS应用。  

UHPLC色谱柱可能缺乏耐用性。加上入口筛板堵塞的可能性，您可能面临色谱柱的耐用性不如HPLC色谱柱的问题。  

ACE Excel色谱柱非常宽容，并提供您期望从HPLC色谱柱中获得的相同耐用性和使用寿命。  

ACE Excel将改变您对UHPLC色谱柱耐用性的看法。  

ACE Excel色谱柱不仅填装的更好，还采用了ZL的入口筛板设计，使其比其它UHPLC色谱柱更不容易被堵塞。  

仍建议您像使用任何UHPLC色谱柱一样过滤样品和流动相，但ACE Excel色谱柱比其他UHPLC色谱柱更为宽容，并提供与HPLC色谱柱相同的耐用性和使用寿命。  

图 12：ACE Excel色谱柱在耐用性方面有良好的口碑  

将2.1×100mm ACE Excel C18 UHPLC色谱柱在平均1,000 bar（14,500 psi）压力下进行2000多个梯度的运行。  

在该稳定性研究结束时，柱效（塔板数）和保留时间基本保持不变。  

5.ACE Excel色谱柱具有口碑zhuo越的可重现性。  

柱子与柱子之间的可重现性受硅胶固定相载体的生成、固定相与固定相载体的键合以及色谱柱中固定相的填充的影响。  

在色谱柱的制备过程中，每个阶段被控制得越好，色谱柱的可重现性和质量则越好。
ACE色谱柱在色谱柱制备过程中的每个阶段均得到了全面控制。  

这些控制措施确保ACE色谱柱在柱间以及批次之间产生可靠且可预测的性能。  

图13提供了典型批次验证测试的实例。  

硅醇活性的细微变化是柱子与柱子之间选择性变化的主要原因之一。  

ACE和ACE Excel色谱柱由于使用超纯试剂和严格的制造工艺控制（可以获得具有均一表面特性的高纯度硅胶固定相载体）而具有出色的可重现性。  

将这种高纯度硅胶与先进的键合技术相结合，可以产生一系列高惰性的固定相，这些固定相几乎消除了色谱中的硅醇干扰，从而提供zhuo越的柱子与柱子之间的可重现性。  

6.ACE色谱柱可以提供从UHPLC到HPLC再到制备型HPLC的易扩展性。  

相同的质量控制，可以确保不同批次色谱柱的高重现性，也可以保证您更容易地在UHPLC和HPLC方法之间进行转换，或需要分离和纯化目标化合物时放大到制备应用上。  

柱效当然会改变，但可以预料的是，谱带间距（选择性）将相同。  

图14阐明了当使用相同的ACE键合相但不同粒径填充的色谱柱进行操作时，可以预见到分析物一致的谱带间距类型（选择性）。  

图 14：将ACE固定相从UHPLC（2μm）扩展到HPLC（3μm和5μm）再至制备型HPLC（10μm）时，选择性得到了保留与保证。

条件
流动相：35:65 MeCN/0.1%TFA（溶于水中）
温度：22 ℃
波长：254 nm

分析物
1. 尿嘧啶
2. 4-羟基苯甲酸
3. 乙酰水杨酸
4. 苯甲酸
5. 2-羟基苯甲酸
6. 对羟基苯甲酸乙酯

试验样品的这些色谱图在填充有相同的键合相但不同粒径的色谱柱上以相同的流动相条件运行，结果阐明分离从UHPLC扩展到HPLC再到制备型HPLC的容易程度。

当使用ACE Excel UHPLC色谱柱进行快速方法开发，且该方法必须可转移到HPLC时，易扩展性则显得特别有价值。

图 15：ACE固定相可以提供相同的选择性，无论它们是UHPLC、HPLC还是制备型HPLC色谱柱

条件
色谱柱：2.1 x 50 mm
流动相：1.4分钟内从30% B至90% B
A = 20mM甲酸铵+ 0.1％甲酸
B =乙腈+ 0.1％甲酸
梯度：在30％B时持续0.30分钟，在1.10分钟内从30至90％B，在90％B时持续0.40分钟
流速：0.5 mL/min
柱温：30ºC
检测：AB Sciex Triple Quad（TM）5500 MS，以ESI（+）模式运行
仪器：岛津Prominence UFLC系统

分析物
1. 甲苯咪唑
2. 普罗替林
3. 阿米替林
4. 洛哌丁胺

试验样品的这些色谱图在ACE Excel C18 2μmUHPLC色谱柱、ACE C18 3μmHPLC色谱柱和ACE C185μm色谱柱上以相同的流动相条件运行，结果阐明ACE固定相的选择性一致，无论填充粒径如何。

这使得从UHPLC到HPLC或HPLC再到UHPLC的方法转移更加容易。同时也使得从分析型应用扩展到制备型应用更加容易。

         液相色谱仪除了日常维护保养外，使用高纯度溶剂不仅能保护液相系统，也能增加结果的可靠性。HPLC级表示化学试剂的纯度，是可在GX液相色谱中使用的试剂的纯度，制备色谱法、平行分析或梯度分析需要使用到不同的HPLC级试剂。

         样品在注入液相系统前，必须选择一种合适的HPLC溶剂。在反相GX液相色谱中，当样品溶剂与流动相的洗脱强度有差异,尤其是前者的洗脱强度较强时,就会产生峰的变形及柱效的降低。解决该问题最有效的方法是使用流动相作为溶剂溶解样品,这样既可以避免样品溶剂和流动相之间任何强度或粘度的不匹配，也可以减少样品分析时基线的漂移。溶剂在流动相中起着重要的作用，并有助于将进样品通过分离柱后输送到检测器。为了满足不同的分析要求，可以购买不同纯度等级的溶剂来使用，HPLC分析需要使用高纯度的溶剂，但是同时也要考虑成本和实用性等方面。

         HPLC级溶剂的纯度通常超过99.9％，并且瓶身标签上还会标明其他杂质的含量。但是杂质会导致多余的峰，从而干扰色谱图中的主峰，对我们的分析结果产生干扰。杂质产生的原因有很多，可能溶剂纯度不够，可能是瓶身不干净或者软管不干净，还可能是溶剂吸滤头的过滤杂质效果不好。恒谱生不锈钢流动相进样口过滤器能安全有效地保护泵和止回阀，尺寸小，适用于各种品牌的HPLC系统和多种小瓶口的存储池容器。吸滤阻力较小，几乎没有背压和形成空化，兼容多种流动相管路，无需换吸滤头即可配不同规格的吸管，过滤微粒污染物效果好，无气泡，溶剂利用率高。

        在整个紫外线可见波长范围内，没有溶剂是100％透明的，常用的HPLC溶剂在一定波长范围内显示出透明性。大多数应用中会使用紫外线检测器，因此所选的溶剂应该尽可能具有低的紫外线截止波长，让大多数的样品组分在高于截止值的波长处显示出可测量的吸收度。除此之外，溶剂的粘度越高，填充柱中固定相的阻力将导致背压越高，因此所选溶剂也应具有低粘度才是比较理想的。

        大多数的溶剂在密封瓶中才能维持它的稳定性，但某些溶剂的保存期限有限。使用时要注意查看使用期，注意在有效期内使用，不要购买过多的溶剂避免ZH用不完产生了浪费行为。

      作为ZH的建议，所有溶剂在使用前通过进样口过滤器过滤并脱气，这样的预防措施将提高HPLC系统的使用寿命，也有助于增加分析结果的可靠性。

LC-MS的强大功能已经得到了生物医学实验室的认可。1,2现在的LC-MS仪器已经从研究到常规临床实验室范围广泛使用，并有效应用于以下领域：

· ZL药物监测 - 测量血浆，血液或组织中的药物（例如免疫YZ剂） 

· 滥用药物测试 - 测量在尿液或唾液中的药物（例如哌替啶，等等） 

· 激素测试 - 测量血清或血浆中的激素（例如类固醇或甲状腺激素） 

· 生物胺分析 - 测量血浆或尿液中的生物胺（如儿茶酚胺） 

· 新生儿筛查 - 通过使用LC-MS水平监测氨基酸和酰基肉碱检测可ZL的疾病

LC-MS仪器相对于其他分析工具具有很强的吸引力，原因在于该技术能够以非常高的灵敏度同时测量多种复杂分析物。此外，速度和信任也是患者护理的关键因素，同时成功的LC-MS生物医学分析具有高度灵敏度，可追溯性强和数据可靠的特性。因此，对于生物医学用LC-MS工作流程中的试剂水及其水在LC-MS成功分析实践中的作用将通过以下三个方面进行介绍。

 灵敏度 

超纯水被广泛用于LC-MS流程的各个环节（图1），所以是导致实验数据鬼峰，基线噪音和高MS背景等这些原因的主要污染源。同时也会使仪器或方法的灵敏度下降，使一些低浓度分析变的困难3。为了避免干扰，确保检测到的分析物是来自样品，而非来自实验用水4，实验过程需要使用高质量的超纯水，避免数据偏差和再次污染5。

Figure 1. The role of water in the LC-MS laboratory 

超痕量分析是LC-MS生物医学分析中的一个应用领域，在激素检测中，相较于其他实验成分，其中水的使用量是非常大的。因此将Milli-Q水（电阻率18.2MΩ·cm（25℃），TOC<5ppb）作为激素中雌二醇分析的实例进行分析。这个实验的结果如图2所示，其中MRM色谱图显示Milli-Q®水中不存在雌二醇，确保了分析方法的低检出限，使用标准加入法测得雌二醇浓度为265.40ng/L。 

前体离子273m/z和碎片离子255m/z用多反应监测（MRM）ESI+转换。HPLC和MS以及LC-MS/MS的仪器参数以及制备Milli-Q®水所用水源，见图2。

Figure 2. MRM chromatogram (ESI+) of estradiol in a sample and in Milli-Q®water.

 可追溯性 

水纯化系统的在线监测功能使科学家们确定他们所使用的水是否符合LC-MS分析的要求。但是，当问题产生时，说明LC-MS分析过程中已经出现了污染，找到并消除其来源至关重要，因为污染隐患来源非常多，使用LC-MS实验时收集记录的水质参数的数据可以在特定的日期与污染源联系起来，从而促进水质评估和问题的排查。

而且，在所有临床实验室中，可追溯性都是质量管理体系中的重要需求，能使实验室符合认证，例如，ISO15189：2007标准或CLSI®C3—A4。所以，在这种情况下用电子方式记录水质参数的方法是一种确保高质量认证的解决方案。

 可靠性 

为了满足LC-MS生物医学实验室的要求，水源必须可靠。所以水纯化系统不仅要生产高质量的实验用水，而且这个质量必须始终如一。为确保水质的一致性，使用在线监测工具。水中的离子含量通过电阻率测量来评估，通常电阻率18.2MΩ·cm（25℃）的水表示不含离子杂质。 

为了检测有机污染物程度，可用可氧化总有机碳（TOC）计算;TOC低于5ppb的水（或μg/L）适用于LC-MS实验。因此，要检测水质的稳定性需要连续监测Milli-Q®水质的电阻率和TOC参数。图3显示了Milli-Q®系统提供的水质稳定性在线监测数据。

Figure 3. Levels of Resistivity (MOhm·cm) measured continuously and TOC (ppb) measured every 3 minutes as a function of volume produced by a Milli-Q® water system. Different colors refer to data obtained for three different sets of consumables installed by turns. 

 结论 

超纯水适用并符合LC-MS生物医学分析实验的要求，而且良好的水质对实验的高质量和稳定性至关重要。临床实验室LC-MS实验 可以使用Milli-Q®水净化系统即能符合LC-MS仪器高灵敏度的要求还可以获得可靠和可追溯的分析结果。

References

1. K. S-Y. Leung, B. M-W. Fong, LC–MS/MS in the routine clinical laboratory: has its time come? Analytical and Bioanalytical Chemistry, 406, 2289-2301 (2013). 

2. M. Himmelsbach, 10 years of MS instrumental developments--impact on LC-MS/MS in clinical chemistry, J. Chromatogr. B, 883– 884, 3– 17 (2012). 

3. A. Khvataeva-Domanov, S. Mabic, Four Ways to Better Water Quality in LC-MS, R&D Magazine, (2015); http://www.rdmag.com/articles/2015/09/four-ways-better-water-quality-lc-ms 

4. CLSI®C62-A - Liquid-Chromatography-Mass Spectrometry methods; approved guideline, Johns Hopkins Medical Institutions, First Edition, 5.3.1, 34, (2014); http://shop.clsi.org/chemistry-documents/C62.html 

5. Controlling Contamination in UltraPerformance LC?/MS and HPLC/MS Systems, Waters Corporation; http://www.waters.com/webassets/cms/support/docs/715001307d_cntrl_cntm.pdf 

6. B. Keller, J. Sui, A.B. Young, R.M. Whittal, Interferences and contaminants encountered in modern mass spectrometry, Anal. Chim. Acta, 627, 71-81 (2008). 

7. M. Vogeser, C. Seger, Pitfalls associated with the use of liquid chromatography-tandem mass spectrometry in the clinical laboratory, Clin. Chem. 56, 1234-1244 (2010). 

8. Millitrack? e-Solutions, A unique set of data management and monitoring software solutions for water purification systems, MilliporeSigma; www.emdmillipore.com/millitrack-esolutions

前天的文章介绍了赛默飞针对GB2763-2019 食品中农药Z大残留限量，推出了市场上wei一的集GC-MS/MS、LC-MS/MS和IC-MS/MS三大技术平台为一体的全流程解决方案。（链接：https://www.yiqi.com/zt5210/news_43033.html）今天就要给大家继续介绍LC-MS方案的技术特点。

LC-MS方案的技术特点

一、一个前处理一针进样一天完成

本解决方案通过一次 QuEChERS 样品前处理，在 LC-MS/MS上一针进样，25min内完成正负模式同时采集，可在一天内实现筛查和确证超过 460 种农药，其中GB2763-2019 监管范围内的近400种，大大节省了人力、物力和成本。

二、二维方法包： 仪器方法包、耗材包

1.成熟的方法包

多目标物的检测，仪器方法的优化十分的繁琐，从每个化合物质谱参数的优化，到整体液相条件的选择，从数据库到定量方法的建立，每个实验室都要耗费巨大的精力。这些工作，赛默飞的工程师们已替您完成，为您精心准备了基于强大的TraceFinder软件的database及采集、定量方法包，为您分析的全流程保驾护航。您所需要做的，就是动动鼠标，把方法导入即可。

赛默飞针对GB2763的database中包括了每个农药的名称、分子式、分子量、CAS号，以及保留时间、加和模式等信息，便于使用和查找。对于有多种加和模式的农药品种，根据其响应，数据库中尽可能的给出响应较强的多种加和模式的SRM条件。

同时由于食品的多样性，复杂的基质有时会对某个子离子的响应产生干扰，进而影响定性和定量的准确性。这一点赛默飞也给大家提供了备选方案，对于每个农药品种，提供了多个子离子的Z优SRM质谱条件，同时整合在database中，便于根据不同食品基质来选择Z适合的监测离子对。

2.全系列的耗材包

除了仪器方法包，赛默飞还贴心的为您提供色谱耗材和前处理耗材包：

三、三大技术保障：扫描速度快、选择性高、前所未有的稳定

1.wu与伦比的扫描速度(600 SRM/秒)

——更多化合物/样本，更多样本/天

2.高选择性SRM带来优良的选择性

——0.2 Da FWHM, 0.4 Da FWHM

3.前所未有的稳定性

——保证每一次分析运行，保障您的每一次投资

苹果基质中1μg/kg加标水平，一针进样，超过460种农药正负离子同时采集，轻松获得足够的扫描点数，提供高质量数据的同时，保证了定性定量的准确性。

茶叶基质中连续进样100针，峰面积变化趋势

四、四大技术特点：高灵敏度、优异的回收率和重复性、出色的线性关系

面对复杂基质中的多残留检测，赛默飞的三重四极杆质谱表现从来没有让您失望。在苹果基质中1 μg/kg的加标水平下，超过80%的农药品种的回收率和重现性可以满足欧盟Z新的SANTE 12682/2019的苛刻要求；10 μg/kg的加标水平下，超过95%的农药品种回收率在70~120%之间，RSD<20%。

增强型双模式离散打拿极检测器，在扫描范围内提供ji致的线性范围及动态范围，同时延长电子倍增器使用寿命，保证长时间有效工作！如下图所示，农药在基质样品中轻松获得优异的线性关系，即使在1~5 ng/mL低浓度范围，也实现了良好的拟合，保证了在整个线性范围内定量的准确性。

GX快速地农药多残留检测

上述结果表明，赛默飞针对GB2763-2019推出的LC-MS/MS多农残解决方案，基于一套简单的QuEChERS样品前处理流程，利用Vanquish超GX液相色谱系统对复杂样品强大的分离能力，加上TSQ三重四极杆质谱wu与伦比的扫描速度（600 SRM/秒）、灵敏度和稳定性，实现了一个前处理、一针进样正负同时分析超过 460 种农药，其中近400 种为 GB2763 监管的农药，只需一天便可得出分析结果，从而使GX快速地农药多残留检测成为可能。

hplc荧光检测器的优点是什么？