MTT比色法细胞活力检测实验中有哪些注意事项？

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  a91549865 2011-04-01 00:00:00

  博凌科为解答：（1）选择适当的细胞接种浓度。一般情况下，96孔培养板的内贴壁细胞长满时约有lo6个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大，因此，在进行MTT比色法细胞活力检测实验前，掌握每一种细胞的贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线，确定实验中每孔的接种细胞数和培养时间，以保证培养终止致细胞过满。这样，才能保证形成酌量的MTT结晶，与细胞数量呈线性关系。 （2）避免血清干扰。用含15%胎牛血清培养液培养细胞时，高浓度的血清物质会影响实验孔的光吸收值。由于实验本底增加，会使实验敏感。因此，一般选择浓度小于10%胎牛血清的培养液进行。在呈色后，尽量吸净培养孔内残余培养液。3）设空白对照。与实验孔平行设不加细胞只加培养液的空白孔。其它实验步骤保持一致。Z后比色时，以空白孔调零。

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