为什么土壤微生物的分离与纯化菌落培养不明显

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  261926978 2017-04-10 00:00:00

  为什么土壤微生物的分离与纯化菌落培养不明显 营养不足或微生物太少

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  zqwczc 2017-04-11 00:00:00

  1、土样采集：取10cm左右深层土壤10g备用. 2、制备土壤稀释液：称取土壤1g，放入有99mL无菌水的三角瓶中，振荡均匀，即为稀释10－2的土壤悬液.然后进行十倍梯度稀释，依次制备 10－3、10－4、10－5 、10－6 、10－7 稀释度的土壤稀释液. 3、培养基平板制备：按培养基配方各配置牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、马丁氏培养基、高氏Ⅰ号培养基各100ml.灭菌后分别倒3个平板.（高氏Ⅰ号培养基灭菌前加入10滴10%苯酚；马丁氏培养基倒平板前加入2ml去氧胆酸钠(2%)和0.4ml 1万单位/ml链霉素） 4、接种：用无菌吸管吸取0.1ml相应浓度土壤稀释液，以无菌操作技术接种在平板上，涂布均匀.细菌选用10－4、10－5、10－6 三个稀释度接种于牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，放线菌与霉菌选用10－2 、10－3、10－4 三个稀释度，分别接种于高氏Ⅰ号培养基、马丁氏培养基.（一个稀释度一个平板） 5、培养：细菌平板于37℃恒温培养1～2d，放线菌于30℃培养2～3d，霉菌于30℃培养3～5d ，观察. 6、计数：用稀释水样检测平板的菌落计数方法进行计数，报告细菌总数/(CFU·ml-1) 7、纯化：挑取典型菌落接种于相应平板，培养条件同上，培养 纯化.

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