【小墨学堂】直播预告！培训班第四课：标准品其他常见问题解答与交流

硫氧还蛋白（Thioredoxins）是一系列广泛存在于生物体内的氧化还原酶，它能通过置换硫代二硫化物来减少二硫键的结合。常用作融合表达标签的硫氧还蛋白A(TrxA), 分量为11.6kDa，来源于大肠杆菌。

TrxA标签最独特的优点是它的热稳定性。TrxA本身不作为亲和标签来进行重组蛋白优化，而是通过在高温条件下将杂蛋白变性去除而重组蛋白得以保存。TrxA也具有极好的促溶效率，用作促溶标签时可将重组蛋白的可溶性表达从12%提高至95%。

下面是针对trx标签常见问答解析：

①trx标签蛋白序列

MSDKIIHLTD DSFDTDVLKA DGAILVDFWA EWCGPCKMIA PILDEIADEY QGKLTVAKLN IDQNPGTAPK YGIRGIPTLL LFKNGEVAAT KVGALSKGQL KEFLDANLAG SGSGHMHHHH HHSSGLVPRG

②带有trx标签会不会影响蛋白的抗原性

有可能的，trx标签是比较大的融合标签，有20多KDa，非常有可能改变蛋白的抗原决定簇。

一般为了不影响蛋白的功能，会在trx标签和目标蛋白之间加一个酶切位点，比如肠激酶的位点DDDDK，把trx标签去除掉。

③TRX标签蛋白怎么纯化

一般这个载体中都会有His 标签，直接用镍柱纯化即可

④常见的蛋白标签有哪些？有什么特点？

常见的蛋白标签有His-Tag、FLAG-Tag、HA-Tag、Myc-Tag、SUMO-Tag……

His-Tag

主要应用：蛋白纯化优选，也可用于检测。

特点：

• 分子量小，不影响目的蛋白的可溶性、结构和功能。

• 可在非离子型表面活性剂存在/变性条件下纯化，前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用，后者在纯化包涵体蛋白时表现突出。

• 可应用于多种表达系统，纯化的条件温和。

• 可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签。

• 免疫原性相对较低。

FLAG-Tag

主要应用： 广泛的应用于蛋白表达、纯化、鉴定、功能研究及其蛋白相互作用等相关领域，在真核表达系统中表达效率更高。

特点：

• 分子量小，不影响融合蛋白功能，比同类标签更具亲水性。

• 目的蛋白可直接通过FLAG标签进行亲和层析，此层析为非变性纯化，可以纯化有活性的融合蛋白且纯化效率高。

• 可以被抗FLAG抗体所识别，便于通过WB、ELISA等方法对含有FLAG标签的融合蛋白进行检测、鉴定。

• 融合在目的蛋白N端的FLAG标签，其可以被肠激酶切除（DDDK），从而得到特异的目的蛋白。

更多关于蛋白标签详情可以参看：https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag

义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索“义翘神州”与我们取得联系。

绝缘电阻测试仪，俗称数字摇表、数字兆欧表，已经越来越被广大电气人所接受。

很多老式摇表升级上来的工程师，或者很少接触使用摇表的新兵，往往用着用着就有很多困惑。

让我们一一盘点这些灵魂拷问：

1、绝缘电阻该怎么接线？

1） 首先被测系统必须断电，将绝缘表的 绝缘测试电压端和COM端，分别接上被测物。

以带绝缘层的导线测量为例，则一端接绝缘胶皮，一端接金属线，让 测试仪-表笔-绝缘胶皮-金属线-表笔-测试仪，成为一个回路。

小技巧：实际使用表笔接触绝缘胶皮时，建议先用铝箔等包裹绝缘胶皮，以免因为表笔接触面过小，遗漏故障点

2、为什么输出电压总是跳动？

绝缘电阻的基本原理可以类比一个典型的欧姆定律图：仪表有已知内阻，会输出恒定测试电压，同时检测电流。为了确保人身安全和设备安全，绝缘表设有限流保护。如果被测绝缘体电阻较低，或发生局部击穿，或分布电容较大，限流保护功能将起作用，此时会观察到电压的波动。绝缘表会根据实际的电压和电流计算绝缘电阻，测量结果仍可保持准确。

干货问题1：如果实际电压上不去，说明外部绝缘阻值太小。您应该选择更低的输出电压，来正确测量。

3、高压测量安全吗？仪表没有接地，如何放电？

福禄克绝缘表，全系标配放电电路，通过科学设计的内部负载，把测量结束后的电能回收到仪表内部消耗掉。保证使用者的安全。

福禄克绝缘电阻测试仪热门型号推荐：

Fluke 1508 绝缘电阻测试仪

Fluke 1503 绝缘电阻测试仪

如需了解更多福禄克绝缘电阻测试仪欢迎相关知识访问安泰测试网。

直播链接

抖音搜索「盛瀚色谱」，或识别下方二维码识别进入直播间

电脑端：

https://wx.vzan.com/live/tvchat-2061108449?v=1632624706069#/

        标准品其实就是指的是标准物品，值作为一种衡量标准;用做药物方面，则为含量测定中的标准含量。标准品包括化学计量标准品、冶金标准品和药检标准品。标准品是指国家药品标准中用于鉴别、检查、含量测定、杂质和有关物质检查等标准物质，它是国家药品标准不可分割的组成部分。国家药品标准物质是国家药品标准的物质基础，它是用来检查药品质量的一种特殊的专用量具;是测量药品质量的基准;也是作为校正测试仪器与方法的物质标准。在药品检验中，它是确定药品真伪优劣的对照，是控制药品质量必不可少的工具。

跟标准品相关的对照品则是指用于生物制品理化等方面测定的特定物质，由生产单位采用与制品生产工艺相同的方法制备。对照品应尽可能与制品原液配方一致，稳定性较差的，可加不含对测定有干扰物质的适宜的稳定剂。对照品由国家药品检定机构审查认可，其标准应不低于制品的质量标准。

对照品：是指用于鉴别、检查、含量测定的标准物质，由国务院药品监督管理部门指定的单位制备、标定和供应。标准品系是用于生物测定、抗生素或生化药品中含量或效价测定的标准物质，以国际标准品进行标定;对照品除另有规定外，按干燥进行计算后使用。

非标准品就是非标，不按照标准做出来的东西如柴油非标准品：

国标柴油的密度范围为0.810～0.855不同型号的密度不同常用

  如：

   0#柴油0.84密度公斤/升

  +10#柴油0.85密度公斤/升

  +20#柴油0.87密度公斤/升

  -10#柴油0.84密度公斤/升

  -20#柴油密度0.83公斤/升

  -30#柴油密度0.82公斤/升

  -35#柴油密度0.82公斤/升

  通常柴油密度以0.84计算,这样一吨柴油大约折合1190公升。那么你所说的非标柴油肯定达不到这样的标准，这就是为什么叫它非标柴油。非标准柴油，它和一般的柴油相比除了标准不够以外，就是价格问题，既然是非标的那价格肯定就要打折扣了，而且燃烧状态也是不一样的.

标准品其实就是指的是标准物品，值作为一种衡量标准;用做药物方面，则为含量测定中的标准含量。标准品包括化学计量标准品、冶金标准品和药检标准品。标准品是指国家药品标准中用于鉴别、检查、含量测定、杂质和有关物质检查等标准物质，它是国家药品标准不可分割的组成部分。国家药品标准物质是国家药品标准的物质基础，它是用来检查药品质量的一种特殊的专用量具;是测量药品质量的基准;也是作为校正测试仪器与方法的物质标准。在药品检验中，它是确定药品真伪优劣的对照，是控制药品质量必不可少的工具。

  跟标准品相关的对照品则是指用于生物制品理化等方面测定的特定物质，由生产单位采用与制品生产工艺相同的方法制备。对照品应尽可能与制品原液配方一致，稳定性较差的，可加不含对测定有干扰物质的适宜的稳定剂。对照品由国家药品检定机构审查认可，其标准应不低于制品的质量标准。

  对照品：是指用于鉴别、检查、含量测定的标准物质，由国务院药品监督管理部门指定的单位制备、标定和供应。对照品系是用于生物测定、抗生素或生化药品中含量或效价测定的标准物质，以国际标准品进行标定;对照品除另有规定外，按干燥进行计算后使用。

  非标准品就是非标，不按照标准做出来的东西如柴油非标准品：

  国标柴油的密度范围为0.810～0.855不同型号的密度不同常用

  如：

  0#柴油0.84密度公斤/升

  +10#柴油0.85密度公斤/升

  +20#柴油0.87密度公斤/升

  -10#柴油0.84密度公斤/升

  -20#柴油密度0.83公斤/升

  -30#柴油密度0.82公斤/升

  -35#柴油密度0.82公斤/升

  通常柴油密度以0.84计算,这样一吨柴油大约折合1190公升。那么你所说的非标柴油肯定达不到这样的标准，这就是为什么叫它非标柴油。非标准柴油，它和一般的柴油相比除了标准不够以外，就是价格问题，既然是非标的那价格肯定就要打折扣了，而且燃烧状态也是不一样的。

（来源：北京坛墨质检科技有限公司）

Q1 

怎么设定麻醉动物的流量？

       动物的麻醉效果除了与蒸发器设置浓度有关，也与流入动物的氧流量有关。通过下面的列表可以看出，当蒸发器设定浓度为2%，测量兔子的呼气末异氟烷浓度的差异，一般流量越大，动物呼气末异氟烷浓度越大。

       根据我们测量和经验总结：一般建议小鼠氧流量为0.3-0.5L/min，大鼠为0.5-0.7 L/min，具体的流量根据动物的麻醉状态适当上下调节。非啮齿哺乳动物要高很多，跟动物的体重有关，也根据选择的呼吸回路相关。

Q2

如果需要同时麻醉多只动物，

怎么独立控制每只动物的麻醉流量？

       采用R510-07五通道流量计！把麻醉机快速升级为五通道麻醉机，不仅可以麻醉五只动物，而且每个通道可以独立调节气体流量，达到每只动物麻醉状态的独立调节。

五通道流量计

Q3

麻醉效果与蒸发器浓度相关，

那怎么调节麻醉机的浓度？

       蒸发器浓度的调节与蒸发器种类和麻醉剂有关，一般动物麻醉选用的是异氟烷和七氟烷的蒸发器和麻醉剂，并且在诱导时和麻醉维持时，浓度调节不一样，具体如下：

蒸发器

Q4

每次做实验时，要倒入多少麻醉剂呢？

       一般在使用麻醉机前，需检查蒸发器麻醉药的剩余量，确保麻药的容量在蒸发器示液柱刻度线之间，根据实验长短适量增加。 

       如果是新机首次使用，可以一瓶100ml的麻醉剂全部倒入蒸发器中，避免反复加药。瑞沃德的蒸发器容量为120ml，且做过3个月的密封性检测，不用担心蒸发器关闭时，麻醉药泄露。 

Q5

清空诱导盒内的麻醉气体需要多久？

       啮齿动物从诱导盒取出时，里面会有大量麻醉药残留。可通过麻醉机的快速充氧开关稀释诱导盒的麻药，避免实验人员打开诱导盒时吸入麻醉药。

       依据快速充氧速度10L/min 和诱导盒的体积，瑞沃德麻醉机快速充氧清空诱导盒内麻醉气体，参考时间如下：

       小鼠诱导盒约9秒。

       大鼠诱导盒约30秒。

       兔猫诱导盒2分钟以内。

       大动物诱导盒2分钟以内。

诱导盒

Q6

麻醉机配的回收器的风速调为多少？

       回收器的流速不同，产生气体的抽力也不同。使用回收器既能确保面罩处可以维持动物麻醉，又避免麻醉废药泄露到环境中。

回收器

       瑞沃德的回收器风速为35-60LPM，且大小可调。一般使用面罩麻醉单只啮齿类动物时，回收器风速推荐R档。可根据现场使用的面罩及通道数和流量计流量适当调节，确保麻醉废药被充分回收。以下是瑞沃德一款面罩与回收器的使用的测试结果。

你想要的

产品解读、实验演示、问题排查，

尽在

每个工作日12：45

上海安谱实验直播平台！

未来两周的精彩直播预告新鲜出炉，请查收！

8月10日-8月21日精彩直播预告

加入粉丝群，赢大奖

赶快拉上小伙伴，加入粉丝群，

抽取时尚品味大奖吧！

直播链接

     直播前，打开淘宝app，店铺搜索“安谱实验直播平台”，进入店铺，即可看到直播预告。

    或者，复制下面这段话，打开淘宝即可进入店铺：fu致本段内容￥c8HTcbR1Tmp￥咑幵ta0寶【上海安谱实验直播平台】

最xin标准解读、权威专家直播、技术干货分享，尽在“安谱实验学堂”

你想要的

产品解读、实验演示、问题排查，

尽在每个工作日12：45

上海安谱实验直播平台！

未来两周的精彩直播预告新鲜出炉，请查收！

8月24日-9月4日精彩直播预告

p.s：8月24日为视频上传，不设直播（视频将于24日13：30上传）。

加入粉丝群，赢大奖

赶快拉上小伙伴，加入粉丝群，

抽取时尚品味大奖吧！

直播链接

     直播前，打开淘宝app，店铺搜索“安谱实验直播平台”，进入店铺，即可看到直播预告。

     或者，复制下面这段话，打开淘宝即可进入店铺：fu植本段内容￥2AkfcXfX2mE￥咑幵τa0寳【上海安谱实验直播平台】

更多检测标准解读

专家培训课程

技术经验干货分享

VX关注公众号：安谱实验学堂