如何检测小胶质细胞活化为何不用流式细胞分选

AWP划痕 2016-06-29 04:40:30 375 浏览

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所絮之言 2016-06-30 00:00:00

流式细胞计是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量，并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器，它只能测量一个细胞的诸如总核酸量，总蛋白量等指标，而不能鉴别和测出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是说，它的细节分辨率为零。流式细胞计可同时进行多参数测量，信息主要来自特异性荧光信号及非荧光散射信号。测量是在测量区进行的，所谓测量区就是照射激光束和喷出喷孔的液流束垂直相交点。液流ZY的单个细胞通过测量区时，受到激光照射会向立体角为2π的整个空间散射光线，散射光的波长和入射光的波长相同。散射光的强度及其空间分布与细胞的大小、形态、质膜和细胞内部结构密切相关，因为这些生物学参数又和细胞对光线的反射、折射等光学特性有关。未遭受任何损坏的细胞对光线都具有特征性的散射，因此可利用不同的散射光信号对不经染色活细胞进行分析和分选。经过固定的和染色处理的细胞由于光学性质的改变，其散射光信号当然不同于活细胞。散射光不仅与作为散射ZX的细胞的参数相关，还跟散射角、及收集散射光线的立体角等非生物因素有关。在流式细胞术测量中，常用的是两种散射方向的散射光测量：①前向角（即0角）散射（FSC）；②侧向散射（SSC），

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如何检测小胶质细胞活化为何不用流式细胞分选:

流式细胞术分选后，细胞还能用来培养吗:

前沿文献解读 | 当小胶质细胞、MicroRNA与胶质瘢痕一起出现

今天要跟大家分享一篇关于M2型小胶质细胞外小泡（M2 microglial small extracellular vesicles，M2-sEVs）以及胶质瘢痕（glial scar）的研究。

先看图：

▲电镜下M2-sEVs.的形态

▲这是GFAP染色后，共聚焦显微镜下，不同处理措施（PBS、M2-sEV）下脑组织梗死区胶质瘢痕（glial scar）的形态。C：梗死中心区域；GS：胶质瘢痕区域；P：梗塞坏死灶周围区域。

再说结果：

▲ 甲苯基紫染色呈现不同处理措施下，脑组织萎缩体积的变化情况

（Sham：假手术组；PBS：脑梗死后通过尾静脉注射PBS；M2-sEV：脑梗死后通过尾静脉注射M2型小胶质细胞外小泡；miR-124-kd:通过基因敲除miR-124的脑梗死动物组）

▲ 组织梗死或存活比例情况及神经行为评分情况（mNSS）

▲ 动物转棒实验及右转实验情况

经过系列实验得出结论，也是本文的标题：《M2 microglial small extracellular vesicles reduce glial scar formation via the miR-124/STAT3 pathway after ischemic stroke in mice》即，M2小胶质细胞外小泡通过miR-124/STAT3途径减少小鼠缺血性卒中后胶质瘢痕形成。

实验研究方法，是通过阻断ICR小鼠大脑中动脉后连续7天，每天通过尾静脉注射M2小胶质细胞外小泡，来检测缺血后脑组织胶质瘢痕、梗死体积、神经功能评分情况的研究。

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