「“沃”的实验」学习平台正式上线，科研干货资料免费获取

来看看这是实验中的你吗？

抑郁造模实验中，小鼠总是伤痕累累达不到使用标准，上网也查不到原因，太心累了

到信号采集这步，突然发现小鼠的电极掉了，数据采集不到，去网上又找不到完整的资料

迷宫类行为学实验种类太多，找资料花了好长时间，要是所有的迷宫实验的资料在一起就好了......

查找科研资源如大海捞针，耗时耗力

效率提不上去，科研工作都耽误了

自从“沃”的实验 | 实验方法实战教程

直播课开播后

小沃也收到全国各地科研人

为助力科研，解决大家找资料难的困境

01实用性强

涵盖科研基础知识、实验技能、经验总结

02形式多样

囊括视频课程、实验手册、SOP流程图……

03内容丰富，持续更新

“沃”的实验线上学习平台将陆续上线，包含常见疾病动物模型、实验动物手术操作、实验动物行为评估、神经信号研究、细胞与分子研究……陪你走过整个学期，一站式助你提升科研技能

04操作便捷观看操作方便，可以随时观看学习

在这里你可以持续获取

最实用的生命科学研究资料

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“沃”的实验科研资源分享平台首批内容上线，我们为大家分享常见疾病动物模型——构建方法的视频课程+3大实验手册+2大实验解决方案流程图（SOP），涵盖8大动物模型构建课程，4位老师全面讲解每个造模的背景、方法等内容，全面汇总造模技术，助力大家系统性提升科研能力。

• 第一课：阿尔茨海默症模型

• 第二课：帕金森病模型

• 第三课：脑缺血模型

• 第四课：抑郁模型

• 第五课：焦虑模型

• 第六课：创伤后应激障碍模型

• 第七课：自闭症谱系障碍模型

• 第八课：成瘾模型

• 代谢类疾病研究手术与造模手册大全

• 呼吸系统疾病研究手术与造模手册大全

• 神经系统研究手术与造模手册大全

• 动物麻醉解决方案

• 给药手术解决方案

第一期干货内容已上线 →  https://mp.weixin.qq.com/s/gImD4GcLCVqQjJ74xjtWXg

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下期内容预告：

常见疾病动物模型——构建方法系列2

动物行为学实验可以客观性、科学性评价动物的沟通行为、社交行为、学习行为和探索行为等，它可以帮助科研人员探索认知、情绪和运动等复杂的生命现象，将其实验结果类比和推演到人，研究其行为信息的生理和病理意义。但在实验过程中，总会遇到一些大大小小的问题

• 动物行为学实验种类很多，不知道用哪种研究手段？

• 做旷场、高架十字迷宫等实验时，不清楚有哪些注意事项？

• 在做行为学实验数据分析时，哪些数据有用、如何处理数据来支撑自己的研究？

“沃”的实验

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第四期内容：

实验动物行为评估

带你get动物行为学实验的研究方法

「“沃”的实验」——全网最全的生命科学研究线上学习平台第四期，为大家分享实验动物行为评估方法，囊括学习记忆检测、运动检测、抑郁检测、焦虑检测、疼痛检测和行为学分析方法，3位老师线上为你详解超20种动物行为学实验方法，助你轻松完成动物行为学实验，从而提高研究效率与质量。

扫描二维码，即可进入学习

►学习记忆检测

• 奖赏相关行为学实验

• 自发活动相关行为学实验

• 惩罚相关行为学实验

►运动检测

• 损伤评估行为学实验

• 耐力评估行为学实验

• 协调评估行为学实验

► 抑郁检测

• 习得性无助实验介绍

• 悬尾实验介绍

• 强迫游泳实验介绍

• 糖水偏好实验介绍

• 旷场实验介绍

• 新奇物体探索实验介绍

• 新奇抑制摄食实验介绍

►焦虑检测

• 高架十字迷宫实验介绍

• O迷宫实验介绍

• 黑白箱实验介绍

• 饮水焦虑实验介绍

• 旷场实验介绍

• 新奇抑制摄食实验介绍

► 疼痛检测

• 疼痛分类及神经通路

• 机械刺痛检测方法

• 热刺痛检测方法

• 自发疼痛检测方法

►行为学分析方法

以西班牙Panlab公司的行为学视频记录分析软件Smart v3.0为例，介绍Smart v3.0软件分析旷场实验视频的操作过程，以及演示Smart v3.0软件的特色功能

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下期内容预告：

神经信号研究-调控与检测方法

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       2002年，珀金埃尔默推出了业内diyi台集高通量、高速度、高灵敏度、极大灵活性于一体的微孔板检测仪EnVision。EnVision以其优异的性能和稳定的表现成为了生物、医药相关行业标杆产品。

EnVision 2105

       截至2019年，EnVision在国内已拥有上千万经验丰富的用户。为了使这些高端用户得到更好的服务和体验，EnVision VIP Club应运而生。

       EnVision VIP Club是珀金埃尔默为高端用户量身打造的平台，旨在加强用户交流，拓展应用思路，提升研发效率。Club会组织形式多样的交流活动，加强用户间的沟通，分享行业Z新进展和动向。用户在参加活动的同时会获得相应的VIP积分，可用于购买耗材，抵扣仪器维护工时费，抵扣实验机时费，兑换高峰论坛入场券等，VIP会员更有机会和珀金埃尔默的研发团队进行面对面的交流，共同挖掘仪器的潜力…….

首批会员招募已启动，名额有限，我们期待您的到来！

登入路径

1、扫描关注“珀金埃尔默生命科学”微信公众号

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关于珀金埃尔默：

珀金埃尔默致力于为创建更健康的世界而持续创新。我们为诊断、生命科学、食品及应用市场推出独特的解决方案，助力科学家、研究人员和临床医生解决Z棘手的科学和YL难题。凭借深厚的市场了解和技术专长，我们助力客户更早地获得更准确的洞见。在，我们拥有12500名专业技术人员，服务于150多个国家，时刻专注于帮助客户打造更健康的家庭，改善人类生活质量。2018年，珀金埃尔默年营收达到约28亿美元，为标准普尔500指数中的一员，纽交所上市代号1-877-PKI-NYSE。

了解更多有关珀金埃尔默的信息，请访问www.perkinelmer.com.cn。

推陈出新

海洋光学隆重推出

新一代HR系列高分辨率光谱仪

系列首 款HR2现已正式上线！

分辨率？轻松拿捏！

HR2是一款高分辨率科研级光谱仪

全新的探测器

超高的采集速度

良好的热稳定性

一如既往的便携小尺寸

提供更高的分辨率和信噪比

重 点特色

高分辨率

• 2098个有效像素点

• 16-位 A/D分辨率 (65535 counts)

• 能探测到更弱、变化更快的光信号

• 提升杂散光控制

• 高信噪比

• 单次采集信噪比 380:1

• 高速平均模式信噪比 25833:1

• 超高的采集速度

• 微秒级积分时间 1µs-1.5s

• 优良的热稳定性

• 温漂 0.06 Pixels/°C

• 环境条件变化时有可靠光谱响应
  

• 更广的动态范围

• 单次采集动态范围 3000:1

• 系统动态范围 2.46*108

HR2系列在各大基础应用中表现良好

特别针对吸光度测量表现十分优异

搭配使用

OceanDirect跨平台软件开发工具包

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多次板载平均并大幅加强信噪比！

多种选择

18款预配置

多种可能性供您选择

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P.S. 若有配置问题欢迎随时来询问我们哦！

应用广泛

HR2适用于日常实验室使用

也可以嵌入OEM仪器并集成到工艺流水线中

LED/激光表征

• 采集时间短，可直接测量

• 无需附件仪器也不会饱和

紫外/可见光吸光度

• 吸光度极限值可到 2.5 AU

还可应用于...

• 半导体行业：等离子体监控

• 生物制药、药品分析 (吸光度)

• 分子诊断设备: RNA/DNA

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您的想法就是我们的做法，

您的需求就是我们的追求！

心动不如行动，

您还在等什么？

快来联系我们一探究竟！

实验进展如何？

实验数据有了吗？

动物模型构建没人教？

换课题之后对动物模型构建不了解？

辛辛苦苦建立的动物模型

剔除掉了三分之一甚至一大半？

动物模型构建后该如何评估？

别着急，我们帮你准备了

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这本手册大全包含什么？

01.神经环路相关研究常用的手术操作

你想要的脑立体定位病毒注射实验、套管埋植实验、光遗传光纤埋植实验、微透析探针埋植实验、在体电生理电极埋植实验等统统都有。实验步骤如材料和试剂、设备、操作流程全都包含。
 

02.神经系统疾病动物造模和评估方法

AD、PD、PTSD、抑郁症、自闭症、颅脑损伤、脊髓损伤、视神经损伤、疼痛等疾病造模与评估方法全部都有。

该动物手术造模大全囊括了神经科学领域最常使用的动物实验操作技术以及动物模型构建的方法，具体内容包括相关疾病的研究背景、模型构建的操作和评估方法以及参考文献，为您提供规范的实验操作流程和更多的模型选择，提高实验的成功率和可重复性，助您实验顺利开展。

不要998，也不要98

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实验动物该怎么选择？

不同脑缺血模型，弄不清对应构建方法？

常用的血流监测技术，你都掌握了吗？

「全线赋能·“沃”的实验」之实验方法实战教程

直播第五期为大家聚焦

《脑缺血模型构建及检测》

从实验动物的选择、不同模型的分类

各个模型的构建方法到血流监测技术

两位老师将进行综合详细的讲解

全面助力你的科研实验研究

直播时间

6月21日（周二）19：00

报名方式

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主题：脑缺血模型构建

• 脑缺血研究背景

• 脑缺血动物模型构建

• 脑缺血模型构建实验仪器

讲师：孙绍强

瑞沃德行业解决方案专家，在膜片钳/钙成像/干细胞诱导方面有着丰富的实验经验，曾参与多项重大研发及自然科学基金项目，曾在Cell Stem Cell 上发表论文，专注于神经疾病，脑缺血及神经退行性疾病模型制备和机制研究，已为上百家客户提供专业的神经疾病整体解决方案。

主题：脑卒中研究中的血流监测技术

• 激光多普勒

• 激光散斑

• 超声多普勒

• 核磁共振成像

• 双光子显微镜

讲师：殷维君

瑞沃德微循环监测解决方案专家，在生理信号监测和血流血氧成像领域拥有丰富的经验，主导动物活体成像解决方案的设计及优化，专注于临床及临床前微循环监测解决方案的构建。

上期直播间互动问题

这次我们全部为小伙伴解答

Q1：组织剪切的大小有没有具体要求，肿瘤组织一般2-4mm可以吗？

A1：这要根据组织类型去判断，一般会预处理成10mm左右的组织块，太大可能会导致处理不完全，太小可能导致细胞死亡增加，甚至导致样本变稠等。

Q2：细胞活率80%就可以了吗，看到一些资料写的都要90%以上。

A2：这个需要根据下游实验的需求灵活调整，如果样本存活率不能达到要求的话，除了优化实验条件以外，还可以通过一些死细胞去除的试剂来优化已获得的样本。

Q3：低温解离细胞与常规的37度制备单细胞优势分别是什么？区别是什么？

A3：37℃条件下进行组织解离，由于细胞转录活跃，因此解离过程中基因表达可能会发生改变，可能会干扰应激反应相关基因表达，所以在进行snRNA-seq时可以通过使用冷活性酶释放细胞核，同时一些热敏感或者脆弱的细胞更适合采用低温解离的分离方式，但是低温条件对一些质密难解离的组织的处理效率可能会降低。

另外，温度对不同细胞种类也有一定影响，比如在进行脑组织解离时，热解离可能会影响神经元和星形胶质细胞的获取，但是会大量富集小胶质细胞，所以在进行组织解离时，根据获得目的细胞的需求要灵活调整解离方案。

Q4：裂红处理有什么注意事项吗？

A4：如果直径6-8μm的细胞占比较高，且有核率偏低，这表明红细胞含量可能较多，需要进行红细胞裂解，如果红细胞裂解依然不干净，不建议增大裂解体系，建议适当延长裂红时间，或适当增加裂红次数。

Q5：流式染色时间及温度如何选择？

A5：染色本身取决于抗体抗原之间的结合能力，染色时间和温度，受限于抗体浓度，一般根据选择抗体的说明书推荐的浓度和孵育时间、温度选择。我的实践经验：当不清楚说明书的情况，我会选择室温染色12-15min（取决于抗体浓度微调），或4度冰上30min。注意染色时间尽量不要让细胞破损，否则死细胞碎片会影响流式结果。此外细胞消化完毕后应该尽快染色处理，特别是一些凋亡染色、胞内酶染色为保持细胞物质活性，应尽快染色。

Q6：请问流式细胞实验中单抗进行荧光需要什么样的对照？

A6：关于对照设置，这个比较复杂，一般我们是选择同型对照作为阴性对照组，得到的结果往往是比较好的。所谓的同型对照就是同种属同亚型、相同荧光标记物、使用剂量和浓度相同，且属于非特异性结合的抗体为同型对照组。通常用来消除抗体与抗原的非特异性结合造成的背景染色。 

还有一类就是最常见的纯阴性对照，检测细胞群不进行任何抗体处理，直接进行流式检测，这就是简单消除细胞和溶剂本身的影响，这种方法的好处是节约抗体，毕竟抗体很贵。

Q7：如何减少补偿的干扰？

A7：补偿干扰往往是多激光的流式仪器才会发生一定干扰情况，此时，可以根据抗体公司提供的染料搭配方案选择比较好，也就是发射光谱的波长峰尽量不重叠的染料，这样补偿干扰会尽量消除。因此，往往需要查看染料的波长范围，此外，对于4色以上的多色标记情况，一般不常见，此时往往染料的波长范围难以避免的重叠，这时候，推荐使用抗体公司推荐的配色方案，尽量避免发射光谱的重叠。此外很多流式仪器配套软件都带一定算法对补偿进行修正，可以适当修正这个影响。

Q8：细胞自发荧光如何解决？

A8：细胞自发荧光往往是细胞内物质带有荧光，植物细胞因为叶绿素原因会自带一定荧光，然后一些药物处理下，药物本身带有发色基团，也可能自荧光，此时，纯阴性对照的设置可以补偿一定的情况。然后就是染料的选择情况，染料荧光波长范围避免与细胞自发荧光的波长的重叠，这样会比较好一些。我之前做药物的细胞凋亡实验时候，考虑到药物的情况，就没有使用常见的凋亡检测的Annexin V染料，而改用Annexin V-APC 。尽量设置纯阴性对照、有条件做下同型对照，往往可以在数据处理时候适当减少部分因素的影响。这样流式的结果会更好。

如果您错过前四期直播课

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l 结构照明显微成像(SIM)

l 随机单分子定位成像（PALM/STORM）

l 受激发射损耗荧光成像（STED）

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　　实验干货—ELISA实验过程中的常见问题解答
 

　　ELISA实验中会遇到很多问题，不是这有点小问题，就是那有点小问题，那该怎么办呢?以下便是天津本生技术小编是我们在多年的实验过程中遇到问题的总结：

　　Q1.标曲不显色或显色很弱，样本显色

　　溶解标准品以及倍比稀释时，未涡旋震荡或不够充分。标准品溶解、倍比稀释时均需要涡旋震荡以充分混匀。单纯依靠移液器反复吹打，效率较低、效果也不一定。

　　Q2.标曲和样本均不显色

　　在孵育阶段静置在桌面上，这样非常不利于抗原抗体之间的充分接触，导致显色偏弱，推荐孵育阶段，使用ELISA用的微孔板振荡器，调至合适的频率，使抗原抗体充分接触，结合效果。如果排除上述原因，有可能是漏加了某个组分，如检测抗体、酶等。对于比较马虎的新手，一定要做好标记和记录，或者使用添加染料的ELISA试剂盒。

　　Q3.标曲显色，样本不显色

　　当样本中目的蛋白浓度低或者样本中干扰因素较强，就无法检测到。目ELISA仍然是蛋白检测灵敏度的方法，与不同技术结合后，衍生出了多种类型的ELISA，提高了检测灵敏度。

　　对于目的蛋白浓度特别低的样本，可以尝高敏ELISA，但这也并不意味着一定能检测到样本浓度，只能说可以提高样本的可测率，并使结果更加可靠。因为通常用普通ELISA检测的样本OD值都偏低，而高敏ELISA可提高样本OD值，使之尽量位于标曲范围内，得到的数值也更加可信。

　　Q4.标曲和样本都显色，但复孔的CV大

　　这个问题就跟移液器和实验者的操作有关了。移液器的使用维护不规范，就会造成移液的误差较大;实验者自身的操作习惯、加样的一致性对复孔的CV也有很大影响。

　　掌握移液器的正确使用和维护。关于个人的操作可练习移液动作、加快速度，确保移液的精密度。

　　Q5.本底偏高，样本值测不到

　　标曲的本底即Blank孔的OD值一般要求控制在0.1以下(对于高敏ELISA可以适当放宽要求)。尤其是样本值特别低的时候，本底过高会掩盖目的信号，导致无法测到样本值。

　　在加入TMB显色后，需实时观察标曲显色情况。通常在S5孔有肉眼可见的微弱蓝色，即可终止反应。

　　Q6.样本经不同梯度稀释，计算得到的样本值差异较大

　　有时候我们不清楚样本中目的蛋白的浓度如何，应该如何稀释，那么我们就会做下预实验，确定稀释倍数。然而有时候同一样本做了几个不同梯度稀释后，计算得到的样本值之间差异较大，应该选择哪一个稀释倍数呢?

　　这里涉及到了基质效应。通常血清样本加样量较高时，血清中的各种蛋白会抗原抗体的接触，基质效应较明显。而经过稀释后，干扰因素也随之稀释，影响就会较小。当某两个梯度稀释后，计算得到的样本值接近时，我们就可以认为在该稀释梯度时，样本中的干扰因素影响较小，计算得到的值也是接近真实的。然而这样的稀释是针对目的蛋白浓度较高的样本而言。对于浓度很低的样本，经过多倍稀释后，就更加测不到了，此时可按照厂家说明书推荐的加样方式操作。

　　Q7.不同试剂盒中的组分能否通用

　　除非是公用的试剂如洗液、检测缓冲液，其它组分不建议用其它试剂盒的组分，甚至是同一指标不同批次的试剂盒里的组分。这些组分(包括标准品、标准品稀释液、检测抗体、酶等)都是经过优化的，如果贸然使用其它试剂盒的组分，有可能对结果产生影响。

　　ELISA试剂盒本生公司产品种类已超过万种，正广泛应用于科研院校、中心实验室、分子生物学等科研域。公司丰富的产品既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求，也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。

在做基础研究时加入动物实验不仅会使研究工作更完善，也会提高投稿的命中率，但是想把实验做成功却不是件容易的事儿，因为在动物造模中总遇到各种难题：

• 搞不清动物建模标准化的流程，做起实验磕磕绊绊

• 造模需要注意的细节多，反复摸索十几遍才造模成功

• 明明按照文献中的实验方法造模，却还老是不成功

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第二期内容：

常见疾病动物模型——构建方法系列2

帮助大家解决造模中遇到的难题

“沃”的实验——全网最全的生命科学研究线上学习平台第二期内容，为大家分享常见疾病动物模型构建方法，涵盖8大视频课程+2大实验手册+3大建模的标准操作流程。

5位老师线上为你讲解不同动物模型的背景、造模方法等内容，理论结合实践，希望能给大家的动物建模带来更多新思路和新灵感。

  8大视频课程

  2大实验手册

  3大建模的标准操作流程

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下期内容预告：

 实验动物手术操作-手术方法