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如何利用origin 处理DSC数据?

cuiyan5821107 2013-11-13 22:32:20 518  浏览
  •  

参与评论

全部评论(1条)

  • AB12CD29 2013-11-14 00:00:00
    就是下面那样的效果吗?分别画出4条曲线,后通过平移后三条曲线,让他们的坐标轴重合! 不是啦,直接选中一个X列和4个Y列,直接点你要做的图的类型(比如散点图) 他会直接把几条曲线(或数据点)画在一个坐标系中的gaojingjie(站内联系TA)大家回答好像不太对啊,我的意思上面一条DSC曲线就能画下面一条图中一条线。 正好做和你相同研究的人估计没有看到你的问题吧。gaojingjie(站内联系TA):cool::cool:stome(站内联系TA)DSC配带的软件就能处理吧,仔细找找alex809(站内联系TA)先确定结晶起始温度,分段取点进行积分(开始温度到取点的温度),Z后各段积分值再除以起始温度间总的积分值,即得到相对结晶度,以此作为纵坐标,(横坐标是取值点的温度),画图即可得到一旺百旺(站内联系TA)Originally posted by chemdjx at 2010-12-26 19:12:12: 这个问题你必须自己查资料,弄明白了公式就好办了。

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在整个扩增过程中会出现基线期,指数期,线性期和平台期。其中在基线期和指数增长期,扩增产物都是以指数级增长,但是在基线期我们没办法检测;而到了线性期和平台期之后,由于不同基因,或者不同条件下其扩增效率差别很大,因此没有办法计算模板的含量。因此,在指数增长期的CT值就成了计算模板含量的关键值。

▲ 图一:线性图谱

▲ 图二:对数图谱

为什么知道CT值就能够得到最初的目标基因含量呢?

如图三,表示一个基因单次扩增曲线。N为扩增产物的分子数,模板的分子数乘以1+扩增效率的n次方,n代表循环次数。也就是说,如果扩增效率为100%,产物的分子数就等于模板数乘以2的n次方。但是在线性增长期和平台期,扩增效率不可能是100%,因此PCR理论方程只在指数期成立,也就是图三绿色框的部分。

▲ 图三

数据处理:

以下三张图分别表示我们在做荧光定量PCR时提到的三个名称:扩增曲线、标准曲线、溶解曲线。

1、juedui定量:使用一系列稀释的已知浓度的标准品与未知样本同时进行测定,根据系列浓度标准品的CT值与起始模板量之间的线性比例关系。

注意事项:

☑  标准品必须来源可靠,浓度已知。

☑  标准品要和待测样品同时在仪器中扩增。

☑  只能根据标准品覆盖的浓度范围进行待测样本浓度的推测。

2、相对定量:是用来确定经过不同处理的样品之间的表达差异或目标在不同时相差的表达差异,也就是倍数差异。


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