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求助)ELISA整板显色(问题解决,感谢大家,

nahua789 2017-04-23 19:26:45 287  浏览
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全部评论(1条)

  • 戒565 2017-04-24 00:00:00
    肯定全板显色。包被在微孔板上的兔抗人抗体会和羊抗兔二抗反应。 建议你用兔抗人IgA标记HRP,板上包被兔抗人IgA。别去用什么二抗了。 建议你可以尝试饱和竞争法,应该会比夹心法好用。购买IgA抗原标记HRP。兔抗人IgA包被微孔板。 实验检测时,先加样本,反应后洗板,再加HRP标记的IgA抗原,反应后洗板加底物读数。 个人认为这样的饱和竞争法比夹心法更好一些。仅供参考

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  elisa出现全板空白的原因

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  试剂问题:试剂盒在运输、保存期间放置的温度过高,时间过长,导致抗原、抗体效价下降,酶的活力降低;试剂盒已经超出保存的有效期,抗原抗体效价下降,酶的活性降低。‌

  操作问题:漏加或者误加试剂,如忘记加酶、忘记加显色液、酶或显色液污染失效等。‌

  样本问题:样本存在内源性干扰物质,样本溶血、贮存过久、凝集不全、被细菌污染等。‌

  设备问题:洗板液配制中出现问题,如量筒不干净含HRP酶物;洗涤液配制有误等。具体原因分析:

  试剂问题:试剂盒在运输、保存期间放置的温度过高,时间过长,导致抗原、抗体效价下降,酶的活力降低;试剂盒已经超出保存的有效期,抗原抗体效价下降,酶的活性降低。

  操作问题:漏加或者误加试剂,如忘记加酶、忘记加显色液、酶或显色液污染失效等。

  样本问题:样本存在内源性干扰物质,样本溶血、贮存过久、凝集不全、被细菌污染等。设备问题:洗板液配制中出现问题,如量筒不干净含HRP酶抑制物;洗涤液配制有误等。

  解决方法:

  检查试剂:确保试剂在有效期内使用,避免高温存放;检查试剂是否有过期或失效的情况。‌13规范操作:严格按照操作规程进行,避免漏加或误加试剂;每次加液前核对标签,确保无误。

  处理样本:避免样本溶血、污染、过久储存等现象;检查样本中是否存在内源性干扰物质。

  设备检查:使用干净的器皿配制试剂,确保洗涤液正确配制;校正温育箱温度,确保温育时间和温度足够。

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