微生物培养的问题
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什么条件下接种为宜?液体种子比固体种子有什么优越性?如何缩短调整期?... 什么条件下接种为宜?液体种子比固体种子有什么优越性?如何缩短调整期? 展开
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- 6噗噗6 2008-08-07 00:00:00
- 不知
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- 王晋男4208 2008-08-07 00:00:00
- 下面是 微生物培养基-原理、制作和现象 很有用 http://www.foodmate.net/jianyan/weishengwu/media/ 视频: http://v.youku.com/v_show/id_co00XMTg2NzI0NDA=.html 固体培养基与液体培养基在培养微生物中的应用 固体培养基的产生为人们在体外模拟体内条件进而以固体培养基代替液体培养基培养细菌,较好地反映体内条件,缩小体内外环境的差异,增强体 内外试验的可靠性提供了条件。 1 原生质体的某些特征与培养基的物理状态密切相关。 细菌在体外和体内的生长情况是不同的,有的细菌在肉汤培养基中不繁殖,在软琼脂中长成L型细菌,在硬琼脂中即恢复细胞壁,琼脂含量越高,回复率也越高。培养于液体培养基中的大肠杆菌,许多菌细胞在温度降低时表现为异常的形态结构;若培养于固体培养中仅有少数菌细胞呈反常状态。从纤维囊肿患者分离的绿脓杆菌在琼脂培养基上产生粘液样菌落,在肉汤中则形成混浊的非粘液体匀质的细胞悬液。布鲁氏杆菌猪二号在琼脂平板上经72h培养形成典型的菌落,但在马丁汤培养基中长成乳白色的菌悬液。 2 固体培养基也能控制微生物的生长。 从粪链球菌(肠球菌)中分离的一种物质能YZ淋球菌在固体培养基上的生长而不能YZ其在液体培养基中的生长。 3 细菌在固体培养基和液体培养基中除了生长不同外,其细菌体内物质含量也不同。 研究表明:生长于液体和同样成份但含1%琼脂培养基中的15株金黄色葡萄球菌细菌细胞壁蛋白质提取物,细胞壁抗原用凝胶电泳分离,与鸡抗血清作免疫吸印,结果表明,含琼脂比不含琼脂培养基中生长的15株细胞壁抗原的高分子量(12×104~22×104)带增多,由此证实葡萄球菌细胞壁表面蛋白随培养基琼脂的改变而改变。 4 细菌的溶血性也受到培养基物理状态的影响。 溶血性葡萄球菌在牛血琼脂斜面上生长良好,溶血环明显,但在肉汤培养基中不生长。正常情况下,血琼脂平板上生长的肺炎球菌产生α-溶血;但在马血琼脂平板和厌氧条件下,39%的肺炎球菌菌株产生强烈的β-溶血;厌氧条件下培养的全部肺炎球菌菌株在青霉素YJ圈周围产生一个β-溶血环;肺炎球菌生长在含有红细胞和抗生素的肉汤培养基中,则不产生β-溶血。同样,某些葡萄球菌菌株也在青霉素、头孢噻吩、苯甲异恶唑青霉素或环丝氨酸YZ圈周围产生β-溶血环;但接种到含抗生素和红细胞的液体培养基中,则无β-溶血。 5 细菌的超微结构也受到培养基物理状态的影响。 大肠杆菌在胰蛋白酶大豆肉汤(TSB)培养基中,菌体长约2~3μm,宽约0.5~0.6μm,且表面粗糙;如生长于有薄膜的TSB琼脂培养基表面,菌体的长度较细,表面光滑。细菌超微结构另一个有趣的变化是葡萄球菌的固相表面(如将薄膜置于琼脂上)接触青霉素,几h后,菌细胞直径增至2~4μm,重量是正常的12倍,该菌细胞含有众多的厚横隔,可多至16个细胞堆集一起;相反,葡萄球菌在含同样浓度青霉素的TSB中培养,菌体仅轻度增大(直径1.5~2.0μm),横隔亦较少。在体外有膜培养中发现的较大且有许多横隔的葡萄球菌也能从实验性感染动物的经β-内酰胺类抗生素ZL的葡萄球菌感染病人中分离得到。说明体内生长的葡萄球菌的超微结构与体外生长含β-内酰胺类抗生素,有滤膜的固相培养基中的菌细胞无实质性差别,固体培养基体外培养细菌可以较准确地反映体内细菌的超微结构。 综上所述,固体培养基不仅在细菌的形态,生长状况,而且在细菌的超微结构上也可以较准确地反映体内细菌的超微结构,固体、半固体培养基较接近体内体液的状态,为体外模拟体内提供了条件。 缩短调整期的措施有三:1、使用对数期菌种;2、加大接种量;3、使用与原菌种相同的培养基。 增大接种量也可以缩短调整期,实际上利用的生物的一种群体效应,也就是通过种内的相互关系(如种内互助),使之更快地适应新环境,从而缩短调整期.像引进一种动物到新环境一样,如果引入少数个别的动物,那么就需要更长的适应时间甚至有可能无法生存;但如果引进的是一个种群,那么就会大大缩短适应的时间.另外,生物的生命活动也会影响环境,如果生物的数量多些对环境的影响更大些,从而使环境变得更适合生物的生存,从而缩短调整期
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