使用免疫荧光显微镜观察细胞结构需要

倒置荧光显微镜下的免疫荧光细胞：探索微观世界的奥秘

显微镜观察免疫荧光细胞是一种重要的实验方法，用于研究细胞内蛋白质、核酸等成分的表达、功能和相互作用，目前，免疫荧光显微镜已经成为生物学研究中不可或缺的工具之一。

在倒置荧光显微镜观察细胞时，需要选择合适的显微镜参数，以确保观察的准确性和稳定性。例如，光源的种类、显微镜的分辨率、物镜放大倍数和荧光通过率等因素。此外，在进行免疫荧光显微镜观察细胞时，需要选择合适的荧光强度和荧光颜色，以避免对观察结果的干扰。

倒置荧光显微镜MF52-N采用无限远光学设计和数显LED荧光模块，光路经过深度优化，能提供简单易用的荧光激发和高质量的相衬、荧光和明场成像，可选双光路、一体供电、人走灯灭，广泛用于细胞培养、生物制药、医疗检测等领域。

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倒置荧光显微镜MF52-N应用于细胞

几年来科学家正在开发细胞疗法，希望能治疗多种疾病和疑难杂症。这就需要质量控制和各种有关仪器设备来支持免疫疗法和再生医学的发展。近期，明美上海区域安装倒置荧光显微镜MF52-N，观察mcherry荧光，应用于细胞治疗。

倒置荧光显微镜MF52-N下，细胞均匀分布，生长状态良好。作为一种新兴的治疗方式，细胞治疗在众多疾病特别是癌症、遗传疾病、传染病的治疗中展现出良好的效果。而明美倒置荧光显微镜MF52-N为治疗提升效率与提高准确性。

倒置荧光显微镜MF52-N配备数显LED荧光模块，可实现三通道荧光激发，可选BGUYR等不同通道，激发光强直观可视并独立记忆，可用于细胞培养、生物制药、医疗检测等科研应用。

您若对倒置荧光显微镜感兴趣或存在疑问，欢迎与我们联系，我们将竭诚为您服务！

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分辨组织样本的结构，了解显微镜在病理学应用中的多种功能

谈到显微镜在病理学家日常工作中的用处时，我们通常会想到诊断。除了病理学实验室工作流的这一阶段，显微镜在更早期的阶段也发挥着重要作用。实验室技术员或病理学家使用显微镜检查样本染色情况。

如果样本不经染色处理，在显微镜下只能看到组织切片或涂片标本的基本结构，但却无法看到进一步的细节。对于对比度不足的非常薄的切片尤其如此，有时几乎是半透明状态。 

图1：图像中所示为未染色的组织切片。没有苏木精和伊红等染色，几乎无法识别不同的细胞类型或组织结构，也就很难从图像中获取有用信息，甚至无法进行有效的诊断。

经染色处理后，样本的不同部分显示为不同的颜色和染色强度，从而使组织内的结构可见。最常见的染色组合是苏木精和伊红，简称为H&E染色。

图2：载玻片浸入不同的溶液中进行染色。

H&E染色的原理

H&E染色前，首先要对组织进行固定、脱水、包埋和切片处理，然后将切片贴到载玻片上。染色前，一般需要使用二甲苯等溶剂移除包埋介质，通常为固体石蜡。然后将切片通过分级醇溶液，降低浓度并置于水中对切片补水。

在下一步中，将切片浸入苏木精溶液中，对细胞核进行染色。染色的强度取决于组织类型、切片厚度、浸泡时间等因素。观察玻片的病理学家的偏好也有影响。用水冲洗后，用蓝色染色液将苏木精的红染色变为蓝色。 

图3：图中显示了40倍放大倍率下十二指肠内的细胞核。它们使用苏木精染为蓝色。尽管组织内的细胞很密集，伊红产生的淡粉色染色依然能够显示组织内的皱褶和其它结构。

检查强度和背景染色

在显微镜下快速观察后，实验室技术员或病理学家便可判断染色是否充分或过度。如果染色不充分，便需要在苏木精中再次浸染。如果染色浓度过强，切片显示背景染色，他们会使用酸性溶液淡化染色，实现切片染色的差异化。这一步骤后，需要再次使用蓝色染液并在自来水下冲洗。 

下一步是伊红染色。伊红是苏木精的复染剂，可差异化地染出红细胞、胶原，并通过粉色展现出平滑肌。分化同样需要根据组织的情况用水洗去过量的伊红。然后将染色后的玻片浸入梯度乙醇中，再浸入二甲苯，对玻片脱水。完成染色和脱水后，使用封片剂来封装切片。 

何时检查染色 

究竟是在苏木精染色后在显微镜下检查染色和分化，还是在伊红染色后，不同的方案做法也不同。在苏木精染色后检查，无论是再次浸染还是重复分化，都方便立即调整。在伊红染色后检查，可以让实验室技术员或病理学家对全染色玻片有一个更好的了解。 

快速检查在实验室工作流中具有重要的作用，可以确保负责诊断的病理学家看到需要的细节信息。

可见结构

使用明场照明可以观察H&E染色玻片。苏木精将细胞核染为蓝紫色，伊红将细胞质和结缔组织染为浅粉色。借助染色，病理学家可以轻松辨别不同的组织类型，例如肌肉或结缔组织，并发现切片中的畸形或不规则情况。这可以帮助它们识别反应特定的病理的变化，例如感染、慢性炎症或恶性肿瘤。借助可见信息，病理学家可以观察到组织内的结构变化，从而确定疾病的性质和进展。

图4：5倍放大倍率下的总览图显示了十二指肠中的三层组织：浆膜、粘膜下层和粘膜区域。每个区域对苏木精和伊红会有不同的反应，因此借助染料可以轻松辨别边界层。为识别潜在病灶，关键是要准确确定发生病理变化的确切组织部位和细胞类型。

图5：40倍放大倍率下的十二指肠显示了粘膜下层和粘膜区域之间的边界。通过H&E染色，可以轻松辨别不同的细胞类型。一种细胞突破两个组织隔室之间的天然障碍，通常为癌症进展的一种常见指示。

颜色差异

染色工作流和诊断中使用的显微镜需要可以很好的辨别颜色差异，这对及时、准确的诊断至关重要。检查染色时，通常使用小尺寸的独立正置显微镜，因为实验室工作台一般都比较拥挤。 

诊断使用的显微镜则应配置性能优异的相机，以便拍摄到报告和归档所需的细微的颜色差异。注释功能也有助于创建报告。如果您想了解更多关于适当临床显微镜的信息，可以阅读文章“如何选择临床显微镜”。

推荐阅读：

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· M. Barszczewski, P. Zorzi, P. Laskey, C. Müller, Clinical Microscopy: Considerations on Camera Selection, Science Lab (2022) Leica Microsystems

· C. Alwssandro, How to Benefit from Digital Cytopathology, Science Lab (2022) Leica Microsystems

· P. Zorzi, C. Müller, The Time to Diagnosis is Crucial in Clinical Pathology, Science Lab (2022) Leica Microsystems

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来源：明美倒置荧光显微镜应用于免疫荧光观察 (mshot.com)