hplc溶剂选择中的关键考虑因素

        选择用作HPLC分析流动相的溶剂是色谱分析过程的关键步骤。到现在为止，没有一种能够满足所有分析需求的通用溶剂，而且根据分析要求所使用的溶剂组合会变得更多。选择合适的溶剂是根据其物理性质以及与样品、色谱柱固定相的相容性。

        流动相溶剂选择的一般要求是：溶剂应当是高纯度，溶剂与固定相不互溶，并能保持色谱柱的稳定性，建议使用纯水或者液相色谱专用的溶剂；溶剂的性能与使用的检测器应当匹配；溶剂对样品应有足够的溶解能力，样品要完全溶于流动相。如果有不溶的样品将导致流动相分离或悬浮，会导致后续一系列的操作问题；溶剂应具有低的粘度和适当低的沸点；尽量避免使用具有显著毒性的溶剂。

        除此之外本文还讨论了选择合适的流动相溶剂的一些其他重要的考虑因素。

        成本

        成本是一个重要的考虑因素，因为HPLC需要高纯度等级的溶剂，特别在大型实验室中经常看到数十个HPLC系统全天候运行。这意味着每天会大量消耗高纯度的溶剂，因此成本方面的考虑至关重要。想要既符合实验要求又价格比较实惠的溶剂，很多时候都不能同时满足。如果这个时候溶剂还没有充分使用，造成浪费，就更得不偿失了。

        恒谱生2μ,5μ,10μ,20μm入口溶剂过滤器吸滤头，不会将空气引入系统，无气泡进入流动相管路，储液瓶溶剂抽取利用率可达99%以上，大大减少瓶底溶剂因无法净真空吸取而造成的浪费。

         吸光度

        通常，HPLC中使用的检测器基于样品成分对光的吸收。在选定的波长范围内，流动相成分的固有吸光度不能干扰样品的吸光度。理想情况下，流动相溶剂在目标波长范围下没有吸收光线是很好的。

        挥发性

        流动相溶剂应具有低挥发性。高挥发性溶剂可能导致流动相组成在使用和存储过程中发生变化，这会导致色谱图的重现性很差。

        黏度

        所选的溶剂应具有低粘度让流过色谱柱的流体不会产生高背压。色谱柱背压形成的原因有很多，样品的易吸附机制也可能会和柱前端的硅胶表面游离的硅醇基发生作用导致色谱柱背压升高。如果有颗粒物堵塞柱头也会导致色谱柱背压升高。为了防止色谱柱背压升高，我们可以选择在液相系统中加入在线过滤器，在线溶剂过滤器安装在液相泵和进样器之间，能够去除溶剂中的颗粒物，避免它们进入进样器，从而防止堵塞。HPLC技术对到达检测器的流动相的组成非常敏感，因此必须通过在线过滤器除去溶剂里的固体悬浮液。脱气也是去除任何少量溶解空气的必要条件，否则会导致流量限制或杂散峰。

        恒谱生不锈钢在线过滤器安装在泵的出口和进样阀之间，采用滤杯式结构受液面积大，使用寿命长，既可有效的防止颗粒进入系统，又能保证足够的液流。恒谱生液相超高压在线过滤器色谱耗材配件抗腐蚀性好；清洗或更换简便；不易堵塞，寿命产品；死体积少，不漏液，低背压，有多种规格可供选择。

        惰性

        所选溶剂应对样品组分，色谱柱填充物和色谱柱材料呈惰性。如果与这些成分中任何一种有反应性都可能导致形成沉淀物，气体或其他反应产物，从而破坏系统性能。溶剂与样品接触后不应形成单独的相。换句话说，应该与溶剂完全混溶。

        恒谱生科学仪器有限公司是致力于研发制造高质量色谱耗材配附件的高科技生产厂家，我们在无气泡较高净化能力的溶剂进样过滤器、超高压在线过滤器、较少死体积色谱保护柱与卡套、0.1微米高光洁度色谱柱柱管、鬼峰去除柱、管路接头等领域具有十多年丰富的生产经验和较强大的制造技术能力。

体视显微镜通常是实验室或生产现场“主力”。用户需要花费数小时通过目镜来检查、观察、记录或解剖样本。仔细评估哪些相关应用需要用到体视显微镜，是确保长期满意使用的关键所在。决策者们需要确保自己能够完全依照自己的需求来定制仪器。为帮助用户能更好的选择适合自己的体视镜，本文介绍了几个主要考虑的因素。

体视显微镜发展的历史

1890年左右，美国生物学家和动物学家Horatio S. Greenough提出了一种光学仪器的设计原理，至今仍被所有主要制造商所采用[1-3]。基于“Greenough原理”的体视显微镜可以提供高质量的真实立体图像。1950年代末，博士伦公司（Bausch & Lomb）推出了旗下一款带有格林诺夫设计的体式显微镜，其中有一项突破性创新：无级（变焦）变倍[3]。几乎所有现代体视显微镜的设计都是基于变焦系统。1957年，美国光学公司推出了一种立体显微镜，其光学原理基于望远镜或CMO（普通主接物镜）原理[3]。除了Greenough型外，这种体视显微镜由于其模块化和高性能而很快得到所有制造商青睐。

图1：徕卡体视显微镜：A) S9 Greenough系列和B-D) M205 CMO系列。

体视显微镜选择前需考虑的4个问题

体视显微镜可以说是一项高额投资，因此选择过程中应当审视夺度，认真思考。要将显微镜的用途和性能发挥到极 致，用户应当考虑以下问题：

1.用途是什么？

• 是否涉及筛查和分类？

• 是否需要样本操作

• 是否需要形成书面记录？

2. 需要观察、记录或可视化哪些结构？

• 高分辨率是否比长工作距离或其他因素更重要？

3. 有多少不同的人员需要使用显微镜？他们在显微镜上的工作时长是多少？

• 如果显微镜使用时间较长，请务必考虑人体工学性的配件，因为此类配件可防止出现重复性劳损。

• 根据不同用户的人数，建议选用可以根据每个使用者偏好而进行调整的显微镜。

4. 购置显微镜的可用预算是多少？

• 模块化解决方案看起来投资更高，但从长远来看，其多功能性、适应不同使用者的能力以及各种各样的插件和配件，从而节省更多成本。

选择显微镜时需考虑的5大关键因素

1. 变焦范围、放大倍数、视场和工作距离

• 基本都在相同放大倍数下工作的使用者不需要太大的变焦范围。

• 如果工作流程中要求进行搜索、查找和样本操作，就会需要从低到高可调节放大倍数的较大变焦范围。

• 在相同放大倍数之下，可观看到的更大或更小的视场主要取决于目镜。更大的视场，可以让使用者更好的对样品进行定向观察。

• 更大的工作距离意味着样本顶部和物镜前透镜之前的距离更大，因此在使用期间能够更加轻松地操作样本。

2. 景深和数值孔径（NA）

• NA越高则分辨率越高，但景深通常会有减少。

• FusionOptics技术结合高分辨率可获得更大的景深。

3. 光学质量

• 平场光学件：校正整个物体视场上的图像平整度，适用于所有应用。

• 消色差光学件：针对于色彩重现不是ZD，而主要为了评估外形特征的应用。

• 复消色差光学件：样品观察时，如果对颜色要求非常高，那就需要使用高质量的光学件以及适当的光源

• 透过率：对于需要观察样本精密细节的应用需求，使用具有较佳透过效果的高质量光件会更突显优势性。对于要求较高的应用如研发用途，使用高透过率的光学件会有完全不同的效果

• 色彩重现：如果看清样本真实颜色是个重要指标，则应当使用高质量的光学件和恰当的照明。

4. 人体工学设计

• 人体工学配件能够让显微镜工作更加轻松并加快整个工作流程。例如，通过目镜观察样本时，变焦和对焦旋钮是否可以轻松调整？

• 如果显微镜交由不同的用户操作，确保可以根据每个用户的偏好进行调整。

5. 照明

• ZJ照明应当能够均匀照亮整个视场，带来理想的对比度并且准确揭示样本的真实颜色。

深度解释5大关键要素

1. 总放大倍数：物镜、变焦系数和目镜

体视显微镜的总放大倍数是物镜、变焦光学系统和目镜的合并的放大倍数[4]。

物镜拥有固定的放大倍数。仪器的变焦光学件允许在变焦系数范围内改变放大率。目镜也有固定的放大倍数。

为了求出通过目镜观察到的物体的放大倍数，必须将物镜、变焦光学系统和目镜的放大系数相乘。

总放大倍数的公式为：MTOT VIS = MO × z × ME，式中：

MTOT VIS 为总放大倍数（VIS代表“可视”）；

MO 为物镜放大倍数（Greenough系统中为1x且没有补充透镜）；

z 为变焦系数；

ME 是目镜的放大倍数。

一般来说，MO的数值介于0.32x和2x之间，z介于0.63x和16x之间，而ME则介于10x和40x之间。

放大倍数对视场的影响

观察目镜时会看到一个称为视场的圆形区域|4|。视场的直径取决于总放大倍数。例如，10x放大倍数的目镜视场直径为23。视场直径是指在物镜1x结合放大倍数与变焦光学之下通过目镜所观察到的视场为23 mm。

2. 景深：与放大倍数及分辨率的关系

景深由数值孔径、分辨率和放大倍数之间的关系来决定[5-7]。

为了获得样品ZJ的观察效果，适当调整显微镜的设置可以在景深和分辨率之间获得ZJ平衡。特别是在低倍率下，通过减小数值孔径，景深可以显著增加。因此，根据样品特征的大小和形状，找到分辨率和景深的ZJ平衡是一个关键。

FusionOptics技术的高景深和高分辨率

体视显微镜能够同时获得高分辨率和高景深的精密光学方法可由徕卡显微系统得到了实现[8]。通过一条光路，观察者的一只眼睛可以看到高分辨率、低景深的物体图像。同时，通过另一条光路，另一只眼睛看到同一物体的低分辨率，高景深的图像。人脑将两幅独立的图像组合成一幅ZJ的整体图像，具有高分辨率和高景深的特点。

图2：体视显微镜拥有两个独立的光束通道（1）。在FusionOptics技术帮助下，一个光束通道提供景深（2）而另一个光束通道则提供高分辨率（3）。大脑将两张图像融合成一张ZY化的空间图像（4）。

3. 消色差或复消色差透镜的光学质量

色差是一种畸变，在这种畸变中，透镜无法将所有颜色聚焦到同一个汇聚点[2,9]。这是因为透镜对不同波长的光具有不同的折射率（透镜的色散）。当光线在远离球面透镜ZX轴的点射入球面透镜表面时，其折射程度大于或小于射入靠近球面透镜ZX点的光线时就会发生球差。好的光学设计的目的是减少或消除色差和球差。以下透镜可用于减少这些问题产生的影响：

消色差透镜

• 校正了2个波长（红色和绿色）并让两者在同一平面上聚焦。

• 可见光光谱范围内的标准应用。

复消色差透镜

• 校正了3个波长（红、绿、蓝）并让三者在同一平面上聚焦。

• 可见光光谱范围内最 高 级别的应用。

平面透镜

• 未经平面校正的透镜在整个物体（视场）上显示出不均匀的焦点。

• 建议用于需要观察较大视场的应用。

4. 工作距离会大幅影响显微镜使用性

工作距离是对焦时物镜前透镜和样品顶部之间的距离。一般来说，物镜的工作距离随着放大倍数的增加而减小。工作距离直接影响到体视显微镜的使用性，特别是用于检测和质量控制。

5. 为获得ZJ结果的人体工学设计

一般来说，人的体型和工作习惯相当的重要。因此，对装备用于特定任务并搭配有特种配件和特定工作距离的显微镜，其高度（目镜）不一定适合于所有用户。如果观察高度太低，观察人员在工作时会被迫向前弯曲，导致颈部区域的肌肉紧张[10-12]。为补偿这些高度差，建议使用可变双目镜筒[10]。多亏了产品的模块化设计，CMO设计下的体视显微镜提供了许多可根据用户体型或工作习惯来定制仪器的方法，因此是首  选的解决方案。

6. 正确照明让一切大为不同

对于体视显微镜，选择适合的照明是一大关键要素[13]。最适当的照明将有助于通过ZY化的方式来对感兴趣的样本特征进行观察，同时有可能发现新的信息。对于所使用的显微镜和预期的应用，请务必确保良好的照明效果。

• 反射照明

用于不透光、不透明的样本。根据样本的对比度和感兴趣的细节给出了不同的解决方案和样本的照明要求。参见以下参考文献13 了解体视显微镜入射照明的一些示例。

• 透射照明

用于各种各样的透明样本，从生物样本如生物模型等到聚合物和玻璃。

• 标准透射明场照明

用于所有类型的透明样本，带来较高的对比度和充分的颜色信息。

• 倾斜透射照明

用于几乎透明和无色的样本；可获得更高的对比度和样本的视觉清晰度。

• 暗场照明

用于观察样本平坦区域上的小特征，这些特征在明场中不易看到。如光泽或光亮样本上的裂纹、气孔、细小突起等。它还可以用来观察尺寸低于分辨率极限的样本结构。

• 用于清晰透明标片的对比法

Rottermann或浮雕对比度是一种先进的倾斜照明技术，可以将显示出随着亮度的不同折射率的变化。正面浮雕对比度结构会增强，而反面浮雕对比度结构会降低。正、反浮雕对比可以更容易区分细微结构，方便于从样本中获取最 大量的信息。

了解更多：https://www.leica-microsystems.com.cn/cn/?nlc=20201230-SFDC-011237

         液相色谱仪除了日常维护保养外，使用高纯度溶剂不仅能保护液相系统，也能增加结果的可靠性。HPLC级表示化学试剂的纯度，是可在GX液相色谱中使用的试剂的纯度，制备色谱法、平行分析或梯度分析需要使用到不同的HPLC级试剂。

         样品在注入液相系统前，必须选择一种合适的HPLC溶剂。在反相GX液相色谱中，当样品溶剂与流动相的洗脱强度有差异,尤其是前者的洗脱强度较强时,就会产生峰的变形及柱效的降低。解决该问题最有效的方法是使用流动相作为溶剂溶解样品,这样既可以避免样品溶剂和流动相之间任何强度或粘度的不匹配，也可以减少样品分析时基线的漂移。溶剂在流动相中起着重要的作用，并有助于将进样品通过分离柱后输送到检测器。为了满足不同的分析要求，可以购买不同纯度等级的溶剂来使用，HPLC分析需要使用高纯度的溶剂，但是同时也要考虑成本和实用性等方面。

         HPLC级溶剂的纯度通常超过99.9％，并且瓶身标签上还会标明其他杂质的含量。但是杂质会导致多余的峰，从而干扰色谱图中的主峰，对我们的分析结果产生干扰。杂质产生的原因有很多，可能溶剂纯度不够，可能是瓶身不干净或者软管不干净，还可能是溶剂吸滤头的过滤杂质效果不好。恒谱生不锈钢流动相进样口过滤器能安全有效地保护泵和止回阀，尺寸小，适用于各种品牌的HPLC系统和多种小瓶口的存储池容器。吸滤阻力较小，几乎没有背压和形成空化，兼容多种流动相管路，无需换吸滤头即可配不同规格的吸管，过滤微粒污染物效果好，无气泡，溶剂利用率高。

        在整个紫外线可见波长范围内，没有溶剂是100％透明的，常用的HPLC溶剂在一定波长范围内显示出透明性。大多数应用中会使用紫外线检测器，因此所选的溶剂应该尽可能具有低的紫外线截止波长，让大多数的样品组分在高于截止值的波长处显示出可测量的吸收度。除此之外，溶剂的粘度越高，填充柱中固定相的阻力将导致背压越高，因此所选溶剂也应具有低粘度才是比较理想的。

        大多数的溶剂在密封瓶中才能维持它的稳定性，但某些溶剂的保存期限有限。使用时要注意查看使用期，注意在有效期内使用，不要购买过多的溶剂避免ZH用不完产生了浪费行为。

      作为ZH的建议，所有溶剂在使用前通过进样口过滤器过滤并脱气，这样的预防措施将提高HPLC系统的使用寿命，也有助于增加分析结果的可靠性。

       每个实验室的色谱分析工作者都很清楚，HPLC 分析使用液体作为载体，它将注入的样品溶液输送到色谱柱然后输送到检测器。这种载体可以是缓冲液与有机溶剂的水-有机混合物、有机-有机混合物。HPLC 系统的管道和阀门通道非常狭窄，使用未经适当过滤的溶液可能会导致堵塞。通过液相色谱仪运行清洁、无颗粒的 HPLC 级溶剂是一项基本维护方案。

一、对HPLC 系统的影响：

       使用过滤流动相以去除颗粒物质能够防止导致色谱柱堵塞，色谱柱不仅很昂贵而且被颗粒物堵塞会导致背压增加或保留时间发生变化；还能大限度地减少由于 LCMS、UPLC 和 HPLC 等灵敏度高的仪器设备中的精密阀门和管路堵塞而导致的系统停机时间。高级色谱溶剂/超纯水通常通过 0.2 微米过滤器进行预过滤，以满足其在色谱系统中使用的等级。但是，有时您也使用这些溶剂（含或不含化学试剂和添加剂）制备（混合）自己的流动相。当您使用这些试剂级化学品或添加剂制备流动相时，还应该在使用前通过 0.2 微米玻璃或钢过滤器过滤混合物，这可以确保您的流动相储液瓶在使用过程中是没有污垢和灰尘等杂质。

二、溶剂过滤器的重要性：

       过滤和过滤器（又称溶剂吸滤头、流动相吸滤头等）在 LC 系统中是非常重要的，因为流动相流路中如果存在微粒，LC 系统中的许多组件都容易过早失效。例如，从溶剂瓶中抽出的流动相中的灰尘或其他微粒会导致泵止回阀部分失效或完全失效（泵根本不产生流量）。所以在选择流动相溶剂进行任何分析之前检查流动相溶剂的完全混溶性很重要，同样重要的是检查它们在混合时不会相互反应。否则悬浮颗粒物会导致柱内积聚并产生背压，从而影响流速和损坏泵的组件。最坏的情况还可以是接头处可能会出现流动相泄漏并伴随着分析运行停止的情况发生。还有最明显的故障模式涉及进样样品或仪器组件中的微粒积聚在色谱柱入口处，从而导致色谱柱堵塞。

三、选择溶剂过滤器的选择：

       选择合适的过滤器需要了解过滤器/溶剂相容性以及过滤器的化学/物理特性。这些特性包括孔径、孔分布、过滤器厚度、可提取物、疏水/亲水特性、结合特性、热原性、气体和液体流速、爆破强度、高压灭菌性、孔径和标称颗粒保留。选择不正确的过滤器可能会导致可提取材料危及分析结果。对于色谱分析，可萃取材料产生的情况包括样品吸收、共流出和外来峰。在液相色谱的应用中通常选择孔径为 0.45μm的在线过滤器，而对于细菌去除或超高液相色谱应用中则适宜选择 0.2μm 的在线过滤器。

       今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

         1、光电传感器的尺寸要符合本身生产环境，需要测量好之后再进行选择。

　　2、选择适合本环境下面的传感模式，适当选择。

　　3、要根据自身产品的生产环境来进行传感范围的选择，不论范围是大还是小，要结合自己本身的特点。

　　4、在安装方式上面，如果有技术人员的话，可以全权交给技术人员来安装，在没有技术人员的基础下，要借鉴别人的先进经验。

　　5、至于其他方面的工作模式，工作电压的选择，以及光源，连接方式，包装材料等方面，要根据光电传感器的说明是来进行选择性的安装，多多借鉴别人的多年的经验，避免因为操作失误造成其他损失。

选择实验室超声波清洗机时，以下几个因素需要考虑：

1.清洗需求：确定您需要的清洗容量和清洗物品的尺寸。根据清洗样品的尺寸选择适当的清洗机尺寸和清洗槽的深度。

2.清洗频率：确定您的清洗频率和时间要求。根据需要选择适当的清洗机型号，考虑其清洗效率和运行时间。

3.功能特点：考虑清洗机的功能特点，例如是否具备加热功能、超声波功率控制、定时器等功能。根据实验需求选择合适的功能配置。

4.清洗剂选择：了解清洗剂的种类和使用要求，并确认清洗机是否适用于您选择的清洗剂。某些清洗机可能只适用于特定的清洗剂。

5.品牌和质量：选择可靠的品牌和有良好口碑的供应商。通过查阅产品评价、参考用户反馈和咨询其他实验室人员，了解供应商的信誉和产品质量。梵英超声(fanyingsonic)是专业超声波设备制造商，推荐使用。

6.价格和售后服务：根据预算选择适当的价格范围，并了解售后服务政策，包括保修期限、维修服务等。

7.安全和符合规范：确保所选清洗机符合相关安全标准和规范，例如CE认证等。

随着工业领域对高质量检测设备的需求不断增加，吸附管老化仪作为环境检测和材料老化分析中的重要工具，已经得到了广泛应用。吸附管老化仪的核心功能是模拟老化过程，以测试材料或设备在长期使用中的性能变化。市面上吸附管老化仪品牌众多，质量参差不齐，如何选择一款性能优越、稳定性高的吸附管老化仪，成为了业内人士和采购决策者需要考虑的问题。

吸附管老化仪的工作原理与应用

吸附管老化仪通过模拟材料在长期使用中的老化过程，进行气体吸附、分解等实验。仪器通过控制温湿度、气体流速等参数，模拟真实的环境条件，从而测试材料的老化速度和性能退化情况。该设备广泛应用于化工、环境监测、空气质量分析等行业，尤其对于汽车、建筑材料、家电产品等的性能验证和寿命预测具有重要意义。

吸附管老化仪的关键选择因素

在选购吸附管老化仪时，需要综合考虑多个因素，以确保所购设备能够满足使用需求，并提供准确可靠的数据输出。以下是几个重要的选购标准：

精度与稳定性 精度是衡量吸附管老化仪质量的核心指标之一。高精度的设备能够更好地模拟不同老化环境，提供更加的测试结果。

温湿度控制范围

吸附管老化仪通常需要模拟多种环境条件，温湿度的精确控制至关重要。设备应具有较宽的温湿度调节范围，并且能在较长时间内保持稳定。购买时，应详细了解设备在高温、高湿和低温环境下的稳定性表现，避免在极端条件下出现测量误差。

自动化程度与操作简便性

随着技术的发展，现代吸附管老化仪趋向于自动化设计。自动化程度高的设备能够减少人工干预，提高测试效率并降低操作错误的风险。设备界面是否友好、操作是否简单直观也是选购时的重要考虑因素之一。

数据分析与报告功能

吸附管老化仪的测试数据往往需要进行复杂的数据处理与分析。优质设备通常配备强大的数据分析软件，能够提供实时数据监测、图表生成以及详细的分析报告功能。测试结束后，系统能够自动生成详尽的报告，便于用户进行结果评估与存档。

品牌信誉与售后服务

在选择吸附管老化仪时，品牌的信誉和厂家提供的售后服务同样不可忽视。一个知名品牌的设备通常意味着更高的产品质量和技术支持。

推荐品牌与产品分析

目前市场上有多款表现优异的吸附管老化仪，知名品牌如德国的Testo、美国的Horiba、日本的Shimadzu等都推出了高性能的老化仪产品。这些品牌的设备在精度、稳定性、自动化程度以及数据分析功能方面都表现突出，能够满足不同工业领域的需求。