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质粒提取实验中,RNA酶一般处理多久啊??

伍佰你第一 2010-12-17 01:52:48 654  浏览
  • 我想请教一下我现在要提取高浓度高纯度的质粒,用的是酚氯仿抽提的方法,为了出去蛋白质和RNA的影响我加完溶液1、2、3以后离心取上清,直接加了RNA酶,再用酚氯仿抽提,而且去了两次蛋... 我想请教一下 我现在要提取高浓度高纯度的质粒,用的是酚氯仿抽提的方法,为了出去蛋白质和RNA的影响 我加完溶液1、2、3以后离心取上清,直接加了RNA酶,再用酚氯仿抽提,而且去了两次蛋白,Z后SDS凝胶电泳还是很淡- - 而且下面的RNA带很亮很亮 希望有好心人帮帮我~~~谢谢各位~~~~~ PS:有什么好一点的生物论坛可以推荐一下么??? 展开

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全部评论(3条)

  • ouyangting8829 2010-12-18 00:00:00
    RNase A?加进去后室温放10分钟差不多了,溶液1里面有EDTA,不用太担心DNA酶切断gDNA。我用的质粒提取试剂盒是把RNase A加在溶液1里面的,正常耗时做下来RNA条带几乎看不到。 你为什么用SDS凝胶跑质粒?

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  • lqqqianqi 2010-12-18 00:00:00
    我们是沉淀溶于 TER(TE含RNase A 20 μg/ml),37℃水浴30min。

    赞(6)

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  • jmbmbmbmbm 2010-12-27 00:00:00
    我们也是用TE,效果很好。不过加RNA酶也应该没有问题 你的条带极有可能是污染了,你跑电泳是否把电泳槽清洗过

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质粒提取实验中,RNA酶一般处理多久啊??
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