PCR的应用

　　罗氏专用PCR板的应用及特点您了解多少?

　　一：罗氏专用PCR板的应用：

　　广泛应用于遗传、生化、免疫、医药等领域，不仅应用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究，还可用于疾病的诊断或任何有DNA，RNA的地方，属于实验室一次性易耗品。

　　二：罗氏专用PCR板的材质：

　　1、其本身材质在当今主要以聚丙烯(PP)为主，能更好适应PCR反应过程中反复高低温设定，并且能够实现高温高压灭菌操作。

　　2、为配合排枪、PCR仪等实现高通量操作，较常使用的为96孔或384孔的PCR板。板型符合SBS国际标准，且为适应不同厂家的PCR仪，根据裙边设计又可分为无裙边、半裙边、升裙边和全裙边四种设计模式。

　　三：罗氏专用PCR板的特点：

　　1、超清洁生产环境下用优质生物聚丙烯生产。

　　2、管壁薄，壁厚均匀，传热效率快，样品加热均匀。

　　3、传热槽配合良好，以更好地促进传热。

　　4、高精度模具制造和精密塑料成型工艺，确保产品质量和批间产品的均匀性/稳定性。

　　5、前面刻有字母、数字和标记线，便于快速识别/区分样品。

　　6、本生生物代理实验室耗材，PCR耗材品种全，可替代仪器原厂耗材，性价比高，质量稳定，对用户可以节省实验成本。

　　总结：专用PCR板的应用及特点，今天天津本生小编就介绍这些了，看完本文您就应该有了基本的认识和了解相信大家都明白了吧!总的来说，希望对大家有所帮助。

数字PCR技术自1999年提出概念，实现了目标核酸拷贝数浓度的JD定量的技术突破，为核酸JZ定量和基因检测提供了全新的思路。

数字PCR技术具备无需标准品、高JZ度、高灵敏度、高分辨力、多通道等技术特点，目前广泛应用于前沿生命科学应用领域，如先进的基因/细胞ZL、干细胞移植、病原微生物定量、肿瘤个体化诊疗/液体活检等多个前沿领域，为生命科学、临床医学、药物开发、计量科学等科学家探索更高灵敏度、更JZ测量，提供了全新的路线和工具。

为更好地让广大学者了解数字PCR技术，快速完成qPCR方法到数字PCR方法的转化，Gene-π数字PCR学堂——核酸JD定量分析及高阶多重数字PCR应用训练营（西湖大学站）将于2021年07月19日在杭州召开。聚焦于数字PCR原理、实验操作、应用进展、结果分析、高阶多重dPCR实验方案、生物医药研究领域中数字PCR技术的方法及应用等核心内容，训练营将携ZS技术专家，为广大学员带来从理论到实战、从入门到精通的饕餮盛宴。

培训时间地点

时间：2021年07月19日

地点：浙江杭州西湖大学-云栖校区--3号楼312会议室

培训日程

参会报名

您在PCR实验操作中是否遇到过问题？如何在实验过程中设置质控要求？在什么浓度范围内检测是准确的？数字PCR的ZD检测限如何评估？数字PCR引物探针设计和qPCR有什么区别及如何评估其质量？在本次训练营中都可以得到答案，心动了吗？心动了就赶紧报名吧！场地有限，报名从速哦。可以通过扫描下方二维码进行报名哦！

敲黑板了！

我们的初衷是--真诚地把先进技术和应用带给大家!

只要您提交了报名申请，经主办方审核通过后，收到报名成功确认通知，就可以参加我们的培训班啦！因场地有限，先到先得哦。赶紧报名吧！

联系我们

详情咨询方式：电话：010-57256059，15801106547 邮箱：info@cycloudbio.com

从1985年至今的30多年时间里，PCR分析经历了三代技术的发展。DY代传统PCR技术，采用琼脂糖凝胶电泳的方法对PCR产物进行定性分析。第二代荧光定量PCR技术，通过在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的积累实时监控PCR进程，ZH用Cq值对基因进行定量分析。第三代数字PCR技术，通过将PCR反应液进行有限稀释，实现核酸分子的单分子扩增，ZZ采取终点法检测阳性微滴的荧光信号，有荧光信号的微滴判读为 1；没有荧光信号的微滴判读为 0，因此该技术被称为数字PCR。

PCR技术在不断地蜕变却从未淡出我们的视野，如今已经渗透到分子生物学领域的各种研究层面。尤其在今年大流行疾病中，展现了PCR技术的强大之处。那在科学研究中，我们该如何选择传统PCR 、荧光定量 PCR与数字 PCR呢？

首先我们要清楚，三代PCR技术所有的基础源于PCR反应的基本原理和PCR反应的3个重要阶段，分别是指数期、线性期和平台期。

指数期

指数期内，每个循环PCR产物量大约增加1倍（假定 100%反应效率），该阶段的扩增反应具有高度特异性和精确度。

线性期（高变异性）

随着PCR反应体系成分的消耗，其中的一个或者多种成分限制反应，导致反应开始减缓，并且每个循环的PCR 产物不再加倍。

平台期

反应停止，不再产生更多的产物。因为每个样品具有不同的反应动力学，所以每个反应将在不同的时间点进入平台期，平台期内可以看到这些差异。

传统 PCR

传统PCR通过琼脂糖凝胶电泳对PCR终产物进行分析（图2），它的局限性就在于只能做定性分析。在图3中，3个反应孔含有相同量的 DNA模板，但到达平台期后产生的荧光信号却不同，说明扩增产物的量存在不同（反应动力学变化所致）。这也表明了传统PCR平台期测量时结果存在变异，产出的DNA量不一定能反映最初情况，所以无法进行定量。

荧光定量 PCR

同样在图3中，发现在指数期内，3个反应孔的扩增曲线完全重合，说明指数期内进行检测将更加精确，可实现更加准确的定量。阈值线是扩增产物荧光强度超过背景时的一个荧光强度值，样品达到此荧光强度值所经过的循环数称为Cq值。通过比较未知浓度的样品与一系列标准品的Cq值，可以精确测定未知反应中的模板 DNA数量。

数字 PCR

数字 PCR 是通过将样本DNA随机分布至独立的反应单元中，每个反应单元中包含或者不包含1个或多个拷贝的目标分子，所有独立的反应单元进行平行扩增后，对每个反应单元的阴性或者阳性荧光信号进行检测并进行统计学分析，就可以计算出原始样本的拷贝数，无需参考标准品或内源性对照品，也不需要标准曲线。

传统PCR 、荧光定量 PCR与数字 PCR的选择

深蓝云生物科技为您提供美国Azure Cielo 3/6通道荧光定量PCR系统和

        法国Stilla Naica全自动3色/6色微滴芯片数字PCR系统。

Azure  Cielo™实时荧光定量PCR系统

来自于美国Azure Biosystems公司，为您提供Azure Cielo-3通道和Azure Cielo-6通道，可根据实验需求灵活配置。这款产品采用了高能LED作为光源系统，可保证光源强度高，光源一致性好；高品质的帕尔贴温度模块作为温控系统，升降温速率快，可设置12列跨度30°C的温度梯度；ZY的CMOS拍照+光纤信号传输作为检测系统，CMOS检测灵敏度高，光纤传输速度快，无光损失和干扰。Azure Cielo™实时荧光定量PCR系统可为您的科学研究提供高JZ度、高灵敏度和高可靠性的实验结果。

Naica™微滴芯片式数字PCR系统

法国Stilla Technologies Naica数字PCR平台是实现高灵敏DNA/RNAJD定量的技术工具，只需一步移液操作，即可自动生成单层平铺的微滴，同一反应液进行多基因的单分子模板扩增，通过三色或六色荧光通道检测，自动QC质控，识别多色荧光中有效的阴阳性微滴，从而达到目的DNA/RNA的高JZjuedui定量。同时提供原始数据、单微滴追溯等功能，确保数据真实可靠。

参考文献：

1. Sykes PJ, Neoh SH, Brisco MJ, Hughes E, Condon J, Morley AA. Quantitation of targets for PCR by use of limiting dilution. Biotechniques. 1992;13(3):444-449.

2. Vogelstein B , Kinzler K W . Digital PCR[J]. Proceedings of the National Academy of ences of the United States of America, 1999, 96(16):9236-9241.

3. Heyries KA, Tropini C, Vaninsberghe M, et al. Megapixel digital PCR. Nat Methods. 2011;8(8):649-651.

4. Dingle TC, Sedlak RH, Cook L, Jerome KR. Tolerance of droplet-digital PCR vs real-time quantitative PCR to inhibitory substances. Clin Chem. 2013;59(11):1670-1672.

5. Whale AS, Huggett JF, Cowen S, et al. Comparison of microfluidic digital PCR and conventional quantitative PCR for measuring copy number variation. Nucleic Acids Res. 2012;40(11):e82.

数字PCR技术的诞生和发展为核酸定量与基因检测提供了全新的思路，在肿瘤个体化诊疗、肿瘤标志物、基因ZL/免疫ZL、液体活检、疫苗等生物制品研究、病毒等病原微生物检测、标准物质定值、基因编辑的检测等前沿生命科学研究、临床医学检验、诊疗方案、药物研发等多个领域实现突破性应用和发展。

数字PCR通过泊松分布校正得到目标基因的JD拷贝数，可以提供比qPCR更jingzhun的核酸定量，无需标准品，并具有灵敏度好、精确度高、耐受YZ剂能力强等优点。该技术是目前最适合用于体液样品（如血液、尿液、粪便、痰液、胸腹水、脑脊液等）中痕量核酸标记物检测的方法。多荧光通道的特异性检测且快速获得检测结果，实现了生物样本量有限的情况下获得更多信息的同时，显著提高检测能力和工作效率。

为更好地让广大学者了解数字PCR技术，Gene-π数字PCR学堂——核酸JD定量分析及应用（苏州站）将于2020年08月06日在江苏苏州召开。本期训练营由艾普拜生物科技（苏州）有限公司、北京深蓝云生物科技有限公司主办，苏州百拓生物技术服务有限公司协办。

聚焦于数字PCR原理、实验操作、结果分析、质量控制以及在生物制品、液体活检、标准品定量应用案例分析等核心内容，训练营将携ZS技术专家，为广大学员带来从理论到实战、从入门到精通的饕餮盛宴。

嘉宾介绍

胡凤麟博士（上海交通大学生物医学工程分子与纳米医学创新转化ZX运营总监）

胡凤麟博士毕业于上海交通大学生物医学工程学院，博士期间从事于纳米颗粒的合成和表面修饰以及其在生物医药领域的应用。共发表SCI论文10篇，合作申请发明ZL5项。

博士后期组建团队，从事将科研成果进行转化的工作。个人先后获得2016年全国“创青春”大学生创业大赛金奖、2017年“创青春”生物医药与大健康上海赛区diyi名，入选2017年上海市创业英才计划等荣誉。2018年，由于创业经验丰富，并在分子与纳米领域具有一定理解，协助组建、建设和管理上海交通大学生物医学工程（分子与纳米医学）创新转化ZX，目前担任转化ZX运营总监一职，主要从事高校创新科研成果临床应用和转化工作。

宗伟英经理（中科院营养ZX湖州申科生物技术有限公司生物制品管理专家）

宗伟英经理毕业于华东理工大学，湖州市1112人才工程培养人选。现任中科院营养ZX湖州申科生物技术有限公司技术部经理，主要从事生物制品质量控制研究、检测验证服务及技术培训工作，在生物制品宿主细胞DNA、蛋白质、RNA残留检测技术方面取得了突破性进展，累计申请发明ZL十余项，其中7项发明ZL已获授权，部分ZL实现产业化并上市销售。

主办单位

艾普拜生物科技（苏州）有限公司

北京深蓝云生物科技有限公司

协办单位

苏州百拓生物技术服务有限公司

培训时间地点

时间：2020年08月06日

地点：苏州工业园区星湖街218号（BioBAY） A1楼 圆形报告厅

培训日程

您在PCR实验操作中是否遇到过问题？如何在实验过程中设置质控要求？在本次训练营中都可以得到答案，心动了吗？心动了就赶紧报名吧！场地有限，报名从速哦。可以通过扫描下方二维码或者点击文末“阅读原文”进行报名哦！

敲黑板了！

我们的初衷是--真诚的把先进的科研技术带给大家!

所以本次培训活动完全免费!!!不收取任何费用! 只要您提交了报名申请，经主办方审核通过后，您会收到报名成功确认通知，就可以参加我们的培训班啦！因场地有限，只有50个参加名额，先到先得哦。赶紧报名吧！

下期预告：

2020 Gene-π数字PCR学堂——将陆续进入北京、广州等城市，敬请期待！！！

详情咨询方式：

电话：0512-86860010，15801106547

邮箱：info@cycloudbio.com

往期回顾：

• Gene-π数字PCR学堂：核酸JD定量分析及应用（上海张江站）圆满落幕！

• Gene-π数字PCR学堂：数字PCR量化医学先进ZL的质控体系（成都站）圆满落幕！

数字PCR技术的诞生和发展为核酸jingzhun定量与基因检测提供了全新的思路，在肿瘤个体化诊疗、肿瘤标志物、基因ZL/免疫ZL、液体活检、疫苗等生物制品研究、病毒等病原微生物检测、标准物质定值、基因编辑的检测等前沿生命科学研究、临床医学检验、诊疗方案、药物研发等多个领域实现突破性应用和发展。

数字PCR通过泊松分布校正得到目标基因的juedui拷贝数，可以提供比qPCR更jingzhun的核酸定量，无需标准品，并具有灵敏度好、jingque度高、耐受YZ剂能力强等优点。该技术是目前最适合用于体液样品（如血液、尿液、粪便、痰液、胸腹水、脑脊液等）中痕量核酸标记物检测的方法。多荧光通道的特异性检测且快速获得检测结果，实现了生物样本量有限的情况下获得更多信息的同时，显著提高检测能力和工作效率。

为更好地让广大学者了解数字PCR技术，Gene-π数字PCR学堂——核酸juedui定量分析及应用（北京站）将于2020年08月20日在北京召开。聚焦于数字PCR原理、实验操作、结果分析、质量控制以及在生物制品、液体活检、标准品定量应用案例分析等核心内容，训练营将携ZS技术专家，为广大学员带来从理论到实战、从入门到jingtong的饕餮盛宴。

您在PCR实验操作中是否遇到过问题？如何在实验过程中设置质控要求？在本次训练营中都可以得到答案，心动了吗？心动了就赶紧报名吧！场地有限，报名从速哦。可以通过扫描下方二维码进行报名哦！

敲黑板了！

我们的初衷是--真诚的把xianjin的科研技术带给大家!

所以本次培训活动完全免费!!!不收取任何费用! 只要您提交了报名申请，经主办方审核通过后，您会收到报名成功确认通知，就可以参加我们的培训班啦！因场地有限，只有50个参加名额，先到先得哦。赶紧报名吧！

详情咨询方式：

电话：010-57256059，15801106547

邮箱：info@cycloudbio.com

英国进口PCR耗材,PCR八联管 实验室耗材本生生物公司供应：分光光度计，荧光定量PCR耗材，移液器吸嘴，微量离心管，进口冻存管，细胞培养皿，培养板，培养瓶，吸头，仪器及手套，色谱耗材，针头过滤器。

英国进口PCR耗材,PCR八联管

0.1ml PCR八联管pp材质，薄壁设计，适用于使用100ul反应体系模块的荧光定量PCR仪及普通/梯度PCR仪。

产品介绍：  
>以高品质生物级聚丙烯为原料，超洁净生产环境生产。
>管壁薄而且壁厚均匀，保证了快速的传热效率和样品的受热均匀。  
>管盖专业级超亮光学平面区域，保证了检测光的通过率。
>与PCR仪导热槽配合设计，与导热槽配合性能好，更加利于热传导。
>独特设计，与荧光定量PCR光学平盖配合适中，有效防止样品蒸发。
>高精度模具制造及精密注塑工艺，保证了产品的品质及批次间产品均一性和稳定性。  
>正面模刻字母标识，方便样品识别区分。
适用仪器：
适用于ABI7500fast、stepone/plus；BIO-RADCFX96、MJ；Roche480等100ul反映体系的荧光定量PCR仪及普通PCR仪

英国进口PCR耗材,PCR八联管 0.2ml PCR八联管

产品介绍：
适用于常规PCR温度循环系统和定量PCR系统，包括8联PCR管和96/384孔PCR板。 纯度高达99.9%的聚丙烯、超薄设计、壁厚*均匀的工艺使得热传导精确、控温准确、减少实验循环时间。通过严格的质控和认证确保产品无DNase 、无RNase 、无蛋白酶，内毒素含量控制在安全标准内。独有的长法兰管盖设计，减少样品蒸发；PCR板裙边上已标记编号，可以方便加样。

进口PCR耗材,PCR八联管

　　产品标题

　　碱性蛋白豚水(AP ) Alkaline Peptone Water

　　农药残留快速检测仪(干式法)

　　微量离心管

　　尿沉渣管(螺旋盖) 12ML

　　量筒

　　发泡式带盖冰桶/冰盒

　　迷你型匀浆机

　　冻存盒Freezer Storage Box

　　1.8ml冻存管，自立，内旋盖，带O型圈，印刷刻度区

　　PCR板硅胶片，适用于384孔PCR板，“+”开口，圆形孔，化学耐受型

　　细菌培养皿，100x15mm,灭菌，加厚

　　24孔带盖细胞培养板，贴壁，平底，透明，单个灭菌包装

　　12孔带盖细胞培养板，贴壁，平底，透明，单个灭菌包装

　　6孔带盖细胞培养板，贴壁，平底， 透明，单个灭菌包装

　　T-175, 650ml细胞培养瓶，斜口，密封盖

　　15-425 螺纹口顶空瓶

　　24-400 EPA/VOA螺纹口样品瓶及配套瓶盖和隔垫

　　棕色/透明 微量储存瓶

　　圆底螺纹样品管

　　Qubit试剂耗材

　　50ml离心管锥底,绿色盖,绿色印刷标记区

　　封板膜 100张/10盒/箱

　　进口Western 孵育盒 Half mini-gel size,75 x 52 x 35mm

　　Tip 0.5-10ul, 短吸嘴 ,无色, 盒装

　　5.0ml冻存管

　　蠕动泵

　　100*20mm细胞培养皿，贴壁培养，标准

　　100*20mm细胞培养皿，贴壁培养，标准，灭菌

　　60*15mm细胞培养皿，悬浮培养，灭菌

　　10ml离心管，PP(聚柄烯)圆底

　　2ml 卡口透明带书写处样品瓶

产品优势：
1、可替代罗氏、伯乐、ABI、安捷伦、耶拿、艾本德、TaKaRa、力康、天隆、博日、达安、宏石、福生等各荧光定量PCR仪用的单管、八联管、96孔板、384孔板。
2、PCR耗材品种全，可替代仪器原厂耗材，性价比高，质量稳定，对用户可以节省实验成本，对公司每月都有订单，现货库存，顺丰快递配送，下单3个工作日即可到达用户手中。
适应客户：医院检验科PCR实验室，实验室；第三方检测机构，科研院所，大专院校，制药厂，试剂生产厂家，疾控中心，检验检疫。