气相色谱主要是利用物质的沸点、极性以及吸附性质差异来实现混合物的分离，气相色谱仪由六大系统组成，分别是：载气系统、进样系统、分离系统、温度控制系统、检测系统、数据处理系统。气相分析过程如图所示：

       GC基本工作原理是利用试样中各组份在气相和固定相间的分配系数不同，当样品在气化室气化后被载气带入色谱柱，由于固定相对各组份的吸附或溶解能力不同进行分离，分离后的物质进入检测器后转化为信号，在数据处理系统中以色谱峰的显示体现，根据色谱图对物质进行定性和定量分析。

       在气相色谱分析时，经常会因为很多问题导致谱图出现异常，到底是什么原因呢？

       在此，我们将走过的弯路，积累的经验分享给您，希望对您有所帮助。

1

在溶剂验收时，纯溶剂进样后出现杂峰，就一定是溶剂有杂质？

       如果进空白针后 也存在杂峰，连续进针后，峰面积逐渐减少，优先考虑仪器系统流路问题出现的杂峰。可以从以下几个方面逐一排查：

       1）气源是否有问题；

       2）进样针，洗针瓶，隔垫，衬管，分流平板是否有污染；

       3）色谱柱是否有污染；

       4）检测器是否有污染等。

2

出现前沿峰

       1）样品过载，需稀释样品，减少进样量；

       2）载气流速过高；

       3）柱温太低，升高柱温；

       4）气化室温度太低；

       5）可能存在干扰峰，需要优化色谱条件；

       6）色谱柱选型错误，老化程度不够等。

3

出现拖尾峰

       1）衬管、分流平板或色谱柱被污染，或色谱柱安装不当，存在死体积；

       2）柱温或进样器温度低，升高温度；

       3）载气流量偏低；

       4）进样量大，减少进样量货增大分流比；

       5）进样器或气化室被高沸点杂质或残留污染等。

4

出现鬼峰

       1）色谱柱有残留，未完全老化；

       2）气化室、注射针等被污染或载气纯度不够；

       3）气化温度过高使样品某些组分分解；

       4）样品中有空气或TCD、ECD等密封性差（有漏气）等。

5

操作条件不变，原来可以分离的峰不见了？

       1）色谱柱被污染或者失效；

       2）载气系统被污染（载气纯度低或过滤器失效）；

       3）注射垫或注射针漏气等。

6

进样后不出峰或者峰很小？

      1）检查检测器的信号值，信号值正常时，优先考虑进样口问题；

      2）进样针漏气或者堵塞；

      3）进样温度太低导致样品不能气化或柱温太低，导致样品在柱中冷凝；

      4）如果是FID，需要检查FID火焰是否点燃等。

7

连续进样时，重复性差

       1）进样技术差；

       2）载气泄露或者流速不稳定；

       3）检测器、色谱柱或衬管等被污染；

       4）注射针有泄漏等。

8

基线向上漂移

       1）检测器温度达到设定温度并稳定2h以上，基线不稳定，检测器受污染，需要进行清洗；

       2）色谱柱未完全老化，有残留；

       3）载气流速下降，重新调整载气压力；

       4）色谱柱固定相可能被破坏等。

9

基线向下漂移

       1）进样口隔垫漏气；

       2）气路系统漏气或载气流量波动；

       3）色谱柱未老化完全等。

10

样品分离度下降

       1）色谱柱被样品或其他杂质污染；

       2）色谱柱固定相流失严重导致无法达到所需要的柱效或分离度等。

食用色素，是色素的一种，即能被人适量食用的可使食物在一定程度上改变原有颜色的食品添加剂，又称食用染料和着色剂，分为天然和人工合成两种，合成着色剂因色泽鲜艳，着色力强、稳定性好、价格低廉等特点而被广泛使用。靛蓝是食品生产中常用的合成着色剂之一，关于靛蓝的分析测试，有实验员反馈回收率做不好，时高时低，事实真是这样吗，我们一起来揭秘真相！

本文所指的靛蓝，CAS：860-22-0。因许多着色剂中文俗称一样，在选择标准品的时候容易弄错，比如CAS：860-22-0与CAS：482-89-3的着色剂，生活中习惯均称之为靛蓝，但两者结构式是不一样的，CAS：860-22-0的靛蓝可以溶于水，而CAS：482-89-3的靛蓝不溶于水。

CAS：860-22-0

CAS：482-89-3

实验部分

SPE

小柱：聚酰胺小柱500mg/6mL

活化：5mL甲醇

平衡：5mL 水

上样：5mL 1ppm靛蓝标准品，溶剂柠檬酸溶液（pH 3.0~4.0）

淋洗：5mL 甲醇：甲酸：去离子水（4：2：4）（V/V/V），淋洗后抽干小柱中的溶液。

洗脱：3mL*2 10%氨水甲醇

收集洗脱液，并于50℃氮吹至干，用甲醇：0.02M乙酸铵溶液（1:1）定容至1mL，充分溶解后，上机分析。

仪器条件

色谱柱： C18-Wp（4.6mm*250mm，5um）

流动相：A:甲醇  B：乙酸铵(0.02mol/L)

梯度洗脱：0min 15%A，5min 35% A，12~22min 95%A，22.5~30min 15 %A

流速：1.0mL/min

柱温：25℃

波长：254nm

进样量：10uL

实验结果

靛蓝的加标回收率在60~100%，不同实验时间、不同实验员测试的结果不尽相同。

原因分析

那么到底是什么原因导致靛蓝回收率不稳定呢，我们从以下方面进行了分析。

1 SPE方法

分布收集SPE上样、淋洗溶液均未检测到靛蓝，对洗脱后的聚酰胺小柱做第二次洗脱，也未检测到目标物；

降低SPE小柱上样溶液的浓度至原来的1/5,并重复分布收集过程，洗脱液中靛蓝的回收率依然不稳定，忽高忽低；

换用不同材质的容器，塑料容器和玻璃容器收集过柱溶液，排查盛放过柱溶液的容器是否吸附靛蓝，结果并无差异。

经过对SPE方法的分析，回收率有时候可以达到90%以上，可见SPE方法没有问题。

2 标准品存放条件

配置500ppm/水的靛蓝标准储备溶液，室温存放一段时间，肉眼观察其变化情况。可见刚配置好溶液为蓝色，然后颜色不断变化，放置三周后溶液变成黄色并一直保持这个颜色，可见靛蓝水溶液在室温存放稳定性不好，分析导致其变质的原因可能有温度、时间、光照、氧气等因素。

图1  500ppm靛蓝水溶液

将500ppm/水的靛蓝标准储备溶液配置后4℃保存，在不同的时间取样，加水溶解稀释成5ppm的溶液后，立即上机测试，并与新红、柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、亮蓝、赤藓红B其他7种着色剂做对照，7种着色剂的处理方法与靛蓝相同。8种着色剂峰面积测试结果见表1。由此可见，除了靛蓝之外，其他7种着色剂在相同的保存条件下含量均无变化，而靛蓝储备溶液4℃保存时，随着保存时间的延长，会不断降解，一个月后有效成分只有最初的66%。即使是同时配置的靛蓝溶液，光照4h后，有效成分也只有最初的83%，光照11h后，有效成分只有最初的63%。

实验方法改进

每次实验均取固体靛蓝标品，现用现配，在整个实验过程中避光操作，实验前处理时间控制在1天之内，样品处理完后，立即上机测试，结果靛蓝的回收率可以达到90~95%，RSD<5%。

小编建议

靛蓝（CAS:860-22-0）性质很不稳定，不耐光和热，实验中靛蓝回收率忽高忽低不稳定的原因主要是靛蓝标准品发生了降解或者样品中的靛蓝在前处理过程中降解，为了避免靛蓝的损失，每次实验需要用固体的靛蓝标品，现用现配，实验用到的标品包括上机的和加标的，需要同时配置好并在相同的条件下保存，在整个实验过程中避光操作，合理安排前处理时间，尽可能快的完成前处理，样品处理完后，立即上机测试。

气相色谱质谱联用仪跑出的质谱图该怎样分析呢？

之前我们曾探讨过亮蓝分析有杂峰干扰的原因和靛蓝分析回收率不稳定的原因，亮蓝分析有杂峰干扰是因为亮蓝存在3个同分异构体，靛蓝回收率不稳定是因为温度、光照、时间等因素会影响靛蓝溶液的稳定性。

关于合成着色剂的分析我们有一系列的小知识想和大家分享，今天为大家带来的是关于赤藓红分析时回收率不稳定的原因。

本文所指的赤藓红，CAS是16423-68-0，我们称之为赤藓红是参考《GB 5009.35-2016 食品安全国家标准 食品中合成着色剂的测定》，在某些文献资料中大家可能会看到将CAS是16423-68-0的物质称之为赤藓红B，主要由于俗称的问题。网上搜索赤藓红，你一定会搜索到两个不同CAS的化合物，还有一个CAS号是568-63-8，通过比较化学式，可以看出这两个化合物互为同分异构体。CAS号是化合物的身份证，是化合物的WY标示，在合成着色剂分析时受俗称的影响，很容易选错分析对象，建议大家在选购合成着色剂的时候，一定要将CAS号作为WY标识。

CAS：16423-68-0 

CAS：568-63-8

在GB 5009.35中有一种合成着色剂的提取方法：聚酰胺吸附法。在操作的时候很不方便，目前已经有商品化的聚酰胺固相萃取小柱代替，比如安谱实验的CNW Poly-sery PA 聚酰胺小柱，因其操作方便、节省时间、节省试剂、对多种合成着色剂处理后结果准确且回收率高，因而备受广大消费者的青睐，将其用于8种合成着色剂的前处理实验过程和结果如下文所示。

SPE

小柱：CNW Poly-sery PA 聚酰胺小柱  （500mg/6mL）

活化：5mL甲醇

平衡：5mL 水

上样：5mL 1ppm 8种合成着色剂标准品，溶剂柠檬酸溶液（pH 3.0~4.0）

淋洗：5mL 甲醇：甲酸：去离子水（4：2：4）（V/V/V），淋洗后抽干小柱中的溶液

洗脱：3mL*2 10%氨水甲醇

收集洗脱液，并于50℃氮吹至干，用甲醇：0.02M乙酸铵溶液（1:1）定容至1mL，充分溶解后，上机分析。

仪器条件

色谱柱： C18-Wp（4.6mm*250mm，5um）

流动相：A:甲醇B：0.02M乙酸铵

梯度洗脱：0min 15%A，5min 35% A，12~22min 95%A，22.5~30min 15 %A

流速：1.0mL/min

柱温：25℃

波长：254nm

进样量：10ul

实验结果

表1 8种合成着色剂实验结果

结果表明，除赤藓红之外，其他7种合成着色剂的回收率均大于90%，RSD小于5%，唯独赤藓红回收率较低，且多次实验发现其回收率在70%~90%之间，回收率不稳定。

原因分析

那么到底是什么原因导致赤藓红回收率不稳定呢。仔细阅读国标，可以发现对于含赤藓红的样品，其提取方法采用的是液液——分配法，而非聚酰胺吸附法，但是国标并没有对赤藓红为何不能采用聚酰胺吸附法做解释说明。结合赤藓红的化学结构和GB 5009.35我们来分析一下原因。

液-液分配法原理，加盐酸使赤藓红结构上的Na反应后变为H，赤藓红分子上的酚羟基与三正辛胺分子中的氮原子形成氢键，生成不溶于水的化合物，被萃取到正丁醇中，加饱和硫酸钠去除有机相中残留的水分，正己烷去除油脂类杂质，用氨水做反萃溶剂，加入氨水，使化合物的氢键断裂，赤藓红进入水相，乙酸调pH至中性，浓缩后待测。

聚酰胺吸附法的原理，聚酰胺是由酰胺键聚合形成的高分子化合物，其酰胺基可与羟基酚类、酸类、醌类、硝基等化合物以氢键形式结合而被吸附。其他7种合成着色剂均含有较多的磺酸钠基团，在酸性条件下转变成磺酸根，与聚酰胺的结合很紧密，甲醇-甲酸溶液并不能使其分离，可以作为淋洗溶剂，淋洗掉一些杂质，加水也不能将其分离，同时可以洗去一些水溶性杂质，加入乙醇-氨水-水，将合成着色剂解析出来，乙酸调pH至中性，浓缩后待测。SPE的方法也是利用了此原理，酸性条件上样，使目标物与聚酰胺结合，再用一定比例的甲醇：甲酸：去离子水淋洗去除杂质，然后用氨水甲醇洗脱掉目标物，浓缩复溶待测。所以这7种合成着色剂用聚酰胺粉和聚酰胺小柱均能得到较好的结果。而赤藓红在酸性条件下Na反应后变为H，酚羟基也能与聚酰胺结合而被吸附，但是在甲醇有机相存在的条件下，和聚酰胺的结合并不紧密，容易溶解在甲醇中随着淋洗液流出，导致洗脱回收率低且不稳定。通过设计淋洗和不淋洗步骤进行结果比较，发现不淋洗时赤藓红的回收率大约93%，明显高于淋洗时赤藓红的回收率80%左右。因聚酰胺在用于合成着色剂测定时淋洗可以除掉一些干扰分析的杂质成分，故淋洗步骤很有必要，如果赤藓红和其它合成着色剂同时用聚酰胺小柱分析时，需要关注淋洗溶液和基质的复杂程度，决定是否需要在淋洗液中加入甲醇有机试剂。

除了用聚酰胺小柱测定赤藓红时淋洗溶液不能用甲酸-甲醇溶液外，要使赤藓红的实验结果准确、回收率高还需要注意另外两个方面的问题：

（1）上机之前过滤所用的滤膜不得使用尼龙滤膜，因为尼龙的化学成分就是聚酰胺，会吸附合成着色剂；

（2）建议赤藓红上机溶液的溶剂中加入一定比例的甲醇，如甲醇：水（1：1）或甲醇：0.02M乙酸铵（1：1），而非用纯水做溶剂。因为我们多次实验发现经过氮吹浓缩后，纯水复溶，管壁上会残留很多肉眼可见的赤藓红（红色），经过长时间的超声、涡旋都很难溶解掉，上机分析回收率大约才20%左右，但加入一定比例的甲醇后很容易将赤藓红溶解下来，且甲醇本来也是流动相的一部分，用流动相做溶剂合情合理。

食用色素，是色素的一种，即能被人适量食用的可使食物在一定程度上改变原有颜色的食品添加剂，又称食用染料和着色剂，分为天然和人工合成两种，合成着色剂因色泽鲜艳，着色力强、稳定性好、价格低廉等特点而被广泛使用。

最常用的食品添加有新红、柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、亮蓝 、赤藓红等，《GB 5009.35-2016 食品安全国家标准 食品中合成着色剂的测定》中规定了这7种合成着色剂的液相分析方法，7种合成着色剂中其中一种着色剂是亮蓝，关于亮蓝的测定经常听实验员反馈亮蓝旁边总是有杂质峰，事实真是这样吗？

我们一起来揭秘真相！

上机标品

准备亮蓝标品， 用水配置成10ppm。

仪器条件

色谱柱： C18-Wp（4.6mm*250mm，5um）

流动相：A:甲醇B：0.02M乙酸铵

梯度洗脱：0min 20%A，5min 35% A，12~18min 98%A，20~27min 20%A

柱温：25℃

波长：254nm

进样量：20ul

流速：1.0ml/min

实验谱图

图1亮蓝色谱图（色谱条件1）

图4 亮蓝色谱图（色谱条件2）

图5 亮蓝色谱图（色谱条件3）

结果分析

扣除溶剂空白后得到的亮蓝谱图见图1，果然不是对称的色谱峰，而且非但不对称，看着还像3个峰。那么到底是什么原因呢，我们从以下方面进行了分析。

（1）标准品问题。若标准品纯度不高，可能会带来杂质干扰，查看亮蓝标准品的证书标识的纯度是87.6%，纯度不是特别高，但是是某进口知名品牌D公司生产的，无法确定3个峰里面是否含有杂质峰。

（2）光谱特征。紫外-可见吸收光谱是化合物固有的性质，一般不同的化合物其吸收特征是不一样的，因此可以通过光谱特征对化合物进行定性分析。那么这3个峰到低是什么物质呢，使用DAD检测器对其进行200-800nm范围内的扫描，得到的光谱见图2，由此可见3个化合物的紫外吸收特征非常相似，在HPLC-UV分析中这种情况一般都是同分异构体。

图2 亮蓝光谱扫描图

（3）结构特征。那么亮蓝真的有同分异构体吗，亮蓝的结构式见图3，为非偶氮类酸性染料，主要有3个同分异构体，自然界中常以 3 种同分异构体的混合物(间位磺化物:对位磺化物:邻位磺化物＝75～85: 15～20:0～8)形式存在，因而液相分析的时候常常得不到单一对称的色谱峰。

图3 亮蓝结构式

（4）定量分析。那么如何对亮蓝的含量进行定量分析是实验员比较关心的问题，液相色谱定量分析的前提是先分离，尝试对流动相比例进行调节，以减缓洗脱能力，我们发现这3个峰是可以实现基线分离的，比如图4，图5，不同色谱条件、不同浓度时各色谱峰面积结果以信息见表1。

表1 亮蓝色谱峰面积

由此可以看出，不同的色谱条件，相同浓度的亮蓝3个色谱峰基线分离和未分离时峰面积存在一定的差异，但是相同的色谱条件下，在2-100ppm的浓度范围，各个亮蓝的同分异构体峰面积-浓度的线性关系较好，可能在不同的色谱条件下，亮蓝的响应情况会有稍微的差异，而在特定的色谱条件下，亮蓝各个组分的同分异构体并不会发生很大的转变。

实验结论

（1）亮蓝分析时出现的疑似杂质峰其实是亮蓝的同分异构体，亮蓝有3种同分异构体。

（2）实际应用中可以根据自己的实验目的，决定是否要使3个同分异构体完全分离，如果测试的是总的亮蓝含量，把3个目标峰合并在一起计算，如果是计算各个异构体的含量就要通过调节色谱条件使其完全分离后再定量计算。

在色谱分析检测中（GC&HPLC），我们经常要使用到衍生化技术手段来达到对目标物质的定性定量分析，按照衍生化发生在色谱分析前后，分为柱前衍生和柱后衍生，今天我们就和小编一起学习衍生化目的、原理、分类和应用等。

一、衍生化的目的

衍生化包括分析物与衍生化试剂之间发生的化学反应，其目的是改变该分析物的理化性质，主要有以下几个目的：

➤提高检测性能

➤改变分析物的分子结构或极性以获得更出色的色谱分离

➤增加挥发性

➤改变基质性质以实现更好的分离

➤稳定分析物

二、常用的衍生化试剂

1.硅烷化试剂

•硅烷基指三甲基硅烷Si(CH₃)₃或称TMS；

•硅烷化作用是指将硅烷基引入到分子中，一般是取代活性氢；

•活性氢被硅烷基取代后降低了化合物的极性，增强了挥发性和稳定性；

•对于不挥发或者200-300℃的稳定性，可以使用硅烷化试剂衍生；

•硅烷化试剂容易吸潮失效，因此在使用过程中需要对样品和试剂脱水。

2.酰基化衍生试剂

•酰基化能降低羟基、氨基、巯基的极性，减小色谱峰拖尾，增强挥发性；

•能增强某些容易氧化的化合物（如：儿茶酚胺）的稳定性；

•引入含有卤离子的酰基，可以提高电子捕获检测器（ECD）的灵敏度。

3.紫外衍生试剂

紫外衍生化试剂主要是给一些没有紫外吸收或者紫外吸收很弱的化合物分子引入强紫外吸收的基团，使得目标物能被紫外检测器检测。

4.荧光衍生化试剂

液相色谱检测中荧光检测器的灵敏度要比紫外检测的灵敏度高出几个数量级，但是大多数化合物没有荧光，通过荧光衍生化试剂将目标物上接上能发出荧光的生色基团，以达到荧光检测的目的，由于荧光衍生物的激发波长与发射波长与衍生化试剂不同，即使衍生化试剂过量或者有副反应，也不干扰荧光衍生物的检测。

5.电化学衍生化试剂

电化学检测器（ECD）是根据电化学原理和物质的电化学性质进行检测的，在液相色谱中常用来检测无紫外和无荧光的，但是有电活性的化合物，其检测灵敏度高，选择性强，对于没有电活性的化合物，与电化学衍生试剂反应，生成具有电化学活性的衍生物就可以使用ECD检测，由于硝基具有电化学活性，因此常用来作为电化学衍生试剂，常见电化学衍生试剂化如下：

三、衍生化在HPLC及GC中的应用案例分享

HPLC中的应用案例-氨基甲酸酯农药检测（GB23200.112-2018）

甲奈威和克百威属于氨基甲酸酯一类的广谱杀虫剂，常用于水稻和玉米作物，其本身无荧光，通过高温碱性条件下，将其水解为甲基胺，再与邻苯二甲醛(OPA) 和2-巯基乙醇(RSH) 反应，生成具有强荧光性的异吲哚衍生物，可用于荧光检测，检测级别可到达ppt级别。

GB23200.112-2018中9种氨基甲酸酯类农药及其代谢物的柱后衍生谱图

GC中的应用案例-氯丙醇及其脂肪酸脂的检测（GB5009.191-2016）：

酰基化能降低羟基、氨基、巯基的极性，改善这些化合物的色谱性能（减少峰拖尾），并能提高这些化合物的挥发性，也能增强某些容易氧化的化合物的稳定性，当酰基化时引入了含有卤素离子的酰基时，还能提高使用ECD检测的灵敏度。

GBGB5009.191-2016中，采用七氟丁酰咪唑作为衍生化试剂，在温和的条件下将羟基钝化反应生成具较好稳定性、良好挥发性和强电负性的衍生物，并使用GCMS检测。

       在色谱分析检测中（GC&HPLC），我们经常要使用到衍生化技术手段来达到对目标物质的定性定量分析，按照衍生化发生在色谱分析前后，分为柱前衍生和柱后衍生，今天我们就和小编一起学习衍生化目的、原理、分类和应用等。

一、衍生化的目的

       衍生化包括分析物与衍生化试剂之间发生的化学反应，其目的是改变该分析物的理化性质，主要有以下几个目的：

       ➤提高检测性能

       ➤改变分析物的分子结构或极性以获得更出色的色谱分离

       ➤增加挥发性

       ➤改变基质性质以实现更好的分离

       ➤稳定分析物

二、常用的衍生化试剂


1.硅烷化试剂

•硅烷基指三甲基硅烷Si(CH3)3或称TMS；

•硅烷化作用是指将硅烷基引入到分子中，一般是取代活性氢；

•活性氢被硅烷基取代后降低了化合物的极性，增强了挥发性和稳定性；

•对于不挥发或者200-300℃的稳定性，可以使用硅烷化试剂衍生；

•硅烷化试剂容易吸潮失效，因此在使用过程中需要对样品和试剂脱水。

2.酰基化衍生试剂

•酰基化能降低羟基、氨基、巯基的极性，减小色谱峰拖尾，增强挥发性；

•能增强某些容易氧化的化合物（如：儿茶酚胺）的稳定性；

•引入含有卤离子的酰基，可以提高电子捕获检测器（ECD）的灵敏度。

3.紫外衍生试剂

       紫外衍生化试剂主要是给一些没有紫外吸收或者紫外吸收很弱的化合物分子引入强紫外吸收的基团，使得目标物能被紫外检测器检测。

4.荧光衍生化试剂

       液相色谱检测中荧光检测器的灵敏度要比紫外检测的灵敏度高出几个数量级，但是大多数化合物没有荧光，通过荧光衍生化试剂将目标物上接上能发出荧光的生色基团，以达到荧光检测的目的，由于荧光衍生物的激发波长与发射波长与衍生化试剂不同，即使衍生化试剂过量或者有副反应，也不干扰荧光衍生物的检测。

5.电化学衍生化试剂

       电化学检测器（ECD）是根据电化学原理和物质的电化学性质进行检测的，在液相色谱中常用来检测无紫外和无荧光的，但是有电活性的化合物，其检测灵敏度高，选择性强，对于没有电活性的化合物，与电化学衍生试剂反应，生成具有电化学活性的衍生物就可以使用ECD检测，由于硝基具有电化学活性，因此常用来作为电化学衍生试剂，常见电化学衍生试剂化如下：

三、衍生化在HPLC及GC中的应用案例分享

HPLC中的应用案例-氨基甲酸酯农药检测（GB23200.112-2018）

       甲奈威和克百威属于氨基甲酸酯一类的广谱杀虫剂，常用于水稻和玉米作物，其本身无荧光，通过高温碱性条件下，将其水解为甲基胺，再与邻苯二甲醛(OPA) 和2-巯基乙醇(RSH) 反应，生成具有强荧光性的异吲哚衍生物，可用于荧光检测，检测级别可到达ppt级别。

GB23200.112-2018中9种氨基甲酸酯类农药及其代谢物的柱后衍生谱图

       GC中的应用案例-氯丙醇及其脂肪酸脂的检测（GB5009.191-2016）：

       酰基化能降低羟基、氨基、巯基的极性，改善这些化合物的色谱性能（减少峰拖尾），并能提高这些化合物的挥发性，也能增强某些容易氧化的化合物的稳定性，当酰基化时引入了含有卤素离子的酰基时，还能提高使用ECD检测的灵敏度。

       GBGB5009.191-2016中，采用七氟丁酰咪唑作为衍生化试剂，在温和的条件下将羟基钝化反应生成具较好稳定性、良好挥发性和强电负性的衍生物，并使用GCMS检测。

       标准滴定溶液：已知准确浓度的、经过均匀性和稳定性研究的、有不间断溯源链的用于滴定分析的溶液。滴定溶液制备方法有两种：

一、直接配制法

       具体操作步骤：准确称取一定量的纯物质，溶解并稀释到准确体积，根据计算求出该溶液的准确浓度。

       例如：重铬酸钾标准滴定溶液、氯化钠标准滴定溶液制备等。

直接配制法配制标准溶液的物质必须具备：

       1.必须有足够的纯度，含量≥99.9%，其杂质含量应少于容量分析所允许的误差程度。

       例如：制备重铬酸钾标准滴定溶液使用的基准物质是国家二级标准物质重铬酸钾，其含量为99.99%。

       2.物质组成与化学分子式应完全相符。若含结晶水，其含量也应与化学分子式相符。

       3. 物理性质或化学性质稳定。

二、间接配制法

       具体操作步骤：粗略称取一定量物质或量取一定体积溶液，配制成接近于所需要浓度的溶液，再用基准物质或已知浓度的标准溶液来确定其标准浓度。

       例如：高锰酸钾标准滴定溶液、盐酸标准滴定溶液、氢氧化钠标准滴定溶液、硝酸银标准滴定溶液等。

间接法制备需要的基准物质的选择要求：

1.摩尔质量大

       摩尔质量大的基准物质可以减小天平的精度原因造成的称重误差，Z终减小标定滴定溶液的误差。

       例如：标定氢氧化钠标准滴定溶液选择邻苯二甲酸氢钾作为基准物质，而不选用草酸。

2.性质稳定

       基准物质需要稳定性高、不吸湿、不风化的性质。

       例如：标定盐酸标准滴定溶液选择稳定性更高的无水碳酸钠作为基准物质，而不选用硼砂。

3.易溶解

       标准滴定溶液的标定一般都在溶液间进行，液体状态反应比较快速。容易溶解的物质能够保证标定过程的正常进行，减少反应过慢、环境等因素的影响。

4.反应终点易判断

       标准滴定溶液标定一般采用指示剂法或电位滴定法，使用的基准物质要方便反应终点的判断，基准物质的颜色不能影响反应终点的判断。

5.能产生准确的当量反应

       与标准滴定溶液之间发生化学反应的关系越简单，就越容易对参与反应的物质进行定量，通过计算得到的标准溶液的浓度数值越准确。

在色谱分析样品时，是否遇到过数据平行性不好、数据分析有杂峰？遇到这种情况时，很多小伙伴首先会分析一下实验过程、实验方法是否正确，但其实DY步应该先看看进样瓶瓶盖是否拧正确了。因为不正确的拧盖或者压盖（针对钳口瓶）也会对色谱分析产生干扰。看到这里，相信大家一定是一脸的问号。不要不相信，因为实验测试结果表明进样瓶盖拧过紧会提高产生杂峰的风险（下有测试谱图）。

下面让我们一起来看看拧盖/压盖不正确时存在的风险，以及如何判断盖子正确拧紧/压紧的状态吧！（仅以9mm的螺纹口2mL样品瓶、PP盖及PTFE/硅胶垫片举例，对于钳口瓶盖垫也是同样适用。）

一、错误的情况

1. 盖子过紧

当盖子拧得过紧时，隔垫很有可能会有明显向内凹情况。拧得越紧，隔垫内凹的情况将会越严重。此时，隔垫处在一种非常紧绷的状态。这种紧绷的状态将可能导致：在色谱扎针进样时，增加隔垫碎屑的概率，从而导致色谱分析不准确、样品的平行性不好等问题。

下图是隔垫扎针之后的GS-MS的测试谱图比较，样品瓶中溶剂为甲醇。黑色曲线为甲醇溶剂空白谱图，蓝色曲线是盖子正确拧紧的谱图，玫红色曲线是盖子拧过紧的谱图。可以明显的看出，盖子拧过紧的样品会有更多的硅氧烷峰（注意：不是100%的概率），硅氧烷峰更多则说明有隔垫碎屑掉入瓶中。实际肉眼观察样品瓶中并没有看到有隔垫碎屑，说明隔垫碎屑是非常微小的。

2. 盖子过松

当盖子拧得不够紧时，此时隔垫并没有很好的固定在盖子与瓶口之间，这将会导致：

1）样品瓶密封性不够，样品瓶中的样品更容易挥发损失，造成样品浓度不准确等问题；

2）色谱进样时，隔垫更容易被扎落。

二、正确的情况

盖子正确拧紧时，隔垫呈现的状态是平整至略微下凹的状态。通过观察隔垫的状态就可以判断盖子是否正确拧紧了，以此来调整盖子的松紧程度。对于手劲比较大的小伙伴，可能轻轻一拧，盖子就是过紧的状态了，所以需要特别注意一下。

对于钳口瓶，如果要正确的压盖，就需要调节好压盖器。以下是调整压盖器的方法：

首先，调节定位螺丝：先将锁紧螺母旋松，然后根据所需的松紧确定定位螺丝的高度（若实际压盖松了，则将螺丝高度调低；若实际压得太紧，则将螺丝高度调高），ZH将锁紧螺母旋到底部锁定位置。

其次，在仅依靠定位螺丝也不能调节好压盖器情况下，就需要用内六角扳手调整压盖器中间的螺丝。如压得太松，内六角扳手逆时针方向旋转，如压得太紧则顺时针方向旋转。