提取植物基因组DNA，DNA是绿色的
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我用的是CTAB法提取植物基因组DNA，方法如下：1.称取材料0.2g，加入适量PVP，500µl冰冷CTAB，20µl冰冷RNA酶研磨；2.研磨后加入500µl加热的CTAB，装入1.5ml离心管中... 我用的是CTAB法提取植物基因组DNA，方法如下： 1.称取材料0.2g，加入适量PVP，500µl冰冷CTAB，20µl冰冷RNA酶研磨； 2.研磨后加入500µl加热的CTAB，装入1.5ml离心管中； 3.充分混匀后，65℃水浴1h，期间不时轻缓震荡； 4.12000rpm离心10min，取750µl上清液至另一离心管中； 5.加入等体积的Tris饱和酚：氯仿：异戊醇（25：24：1），摇匀后12000rpm、离心10min； 6.取上层清液650μl，加入等体积氯仿·异戊醇（24:1），摇匀后12000rpm离心10min； 7.取550µl上清液至另一离心管中，加入等体积异丙醇； 10.-20℃放置1h或室温下过夜； 11.12000rpm离心10min，倒弃上清液；70%冰冷乙醇洗涤沉淀2次； 12.倒弃上清液，风干沉淀； 14.加100µlTE溶解DNA，-20℃保存备用。 可是不知道为什么Z后异丙醇沉淀出来的DNA居然是深绿色的，已经接近黑色了。有的时候同样的步骤做出来的又是白色或者黄色的，这到底是怎么回事啊！希望知道的人给我个提示！ 会不会是因为和氯仿-异戊醇反应的时间过长？因为我发现我剩下的那些材料过一段时间后都变得很绿。 展开
全部评论(4条)
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- 要书翠 2010-06-21 00:00:00
- 上清液是什么颜色的？还有提取的是什么植物的什么组织？ 一般是抽提的问题，与氯仿-异戊醇反应的时间过长的可能性极小
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- 杨成功3 2010-06-21 00:00:00
- DNA纯净下不是黄色或白色的吗？
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- 背乡弃爱 2010-06-21 00:00:00
- 我觉得问题应该出在4-6步中。绿色说明色素（具体不知道哦）没有充分的分解，除去。
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- R_Azarias 2010-06-21 00:00:00
- 叶子吗？ 1 可能是叶绿素吧，用70%的酒精多洗几遍； 2 可能是氧化产物，磨样时要快，要加购PVP.
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