如何判断革兰氏染色的正确性

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  TA神BHDYF 2016-03-23 00:00:00

  革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是: 1、 取载玻片用纱布擦干，载玻片的一面用marker笔画一个小圈(用来大致确定菌液滴的位置)。涂菌的部位在火焰上烤一下，除去油脂。 2、 涂片: 液体培养基:左手持菌液试管，在酒精灯火焰附近5cm左右打开管盖;右手持接种环在火焰中烧灼灭菌，等冷却后从试管中沾取菌液一环，在洁净无脂的载玻片上涂直径2mm左右的涂膜，Z后将接种环在火焰上烧灼灭菌。 固体培养基:先在载玻片上滴一滴无菌水，再用接种环取少量菌体，涂在载玻片上，使其薄而均匀。 3、 晾干:让涂片在空气中自然干燥。 4、 固定:让菌膜朝上，通过火焰2-3次固定(以不烫手为宜)。 5、 染色:将固定过的涂片放报纸上，滴加草酸铵结晶紫液，染1min。 6、 水洗:用水缓慢冲洗涂片上的染色液，用吸水纸吸干。简单染色结束可观察细胞形态。 7、 媒染:滴加1滴碘液，染1min，水洗。 8、 脱色:吸去残留水，连续滴加95%乙醇脱色20-30s至流出液无紫色，立即水洗。 9、 复染:滴加蕃红复染3-5min，水洗。至此，革兰氏染色结束

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