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毛细管电泳仪通过弹性石英毛细管作为分离通道,通过高压直流电场作为驱动力,以样品中各组分的淌度(单位电场强度下的迁移速度)和分配行为的差异为根据,从而使分离各组分得以实现。下面就让小编带你了解一下毛细管电泳仪的工作流程和注意事项。
工作流程
在毛细管柱充满缓冲液→进样端换上,样品池进样→各组分因淌度和分配差异而使分离实现→紫外或激光诱导荧光检测器→数据记录与处理系统→色谱图
注意事项
对CE 系统进行搭建时,需要仔细考虑以下几个关键部位。
1. 毛细管及其温控系统:
CE 分析实验过程中,焦耳热效应应当使分离效率有所降低并且在一定程度上对分析结果的重复性造成影响。所以需要将一个温度可调的恒温环境设计出来来对焦耳热效应进行降低同时对毛细管分离结果受到外界温度变化的影响加以规避。比较常用的是风冷和液冷两种温控方式。风冷控温的实现方式是对空气对流进行控制,然而没有取得比较好的结果。液冷控温是在恒温液体中放置毛细管,通常介质是用水进行冷却,由专门的制冷系统进行冷却或恒温并经由流路进行循环。有比较良好的效果,所以这种温控方式较为常用。
2. 检测系统:
CE 应用Z为广泛的是紫外检测器。其采用柱上检测方式,有着比较简单的结构,能够非常方便地进行操作,在使用之前,需要在适当位置剥离毛细管外壁涂层的弹性保护层聚酰亚胺膜,使得透明部分对准光路。涂层剥离可以通过灼烧、硫酸腐蚀或者刀片刮除等方式来实现。
3.进样系统:
流体动力学进样和电迁移进样为比较常用的方式。动力和计时控制部件、毛细管和样品瓶及缓冲液瓶的位置变换控制部件等均为该进样系统的组分。
4. 毛细管清洗装置和缓冲液填充系统:
酸碱活化毛细管能够使 CE分离结果得到保证。除此之外,必须的步骤是对缓冲液进行填充。通常采用正压或负压来实现毛细管清洗或缓冲液填灌。要求系统具有一定的密闭性。商品化的仪器压力控制机构一般为毛细管清洗过程与进样过程所共享。然而分钟为计时单位,影响进样精度。
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