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FH1165-大鼠背根神经节细胞;DRG
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FH1165-大鼠背根神经节细胞;DRG
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FH1165-大鼠背根神经节细胞;DRG
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DRG瘦素ELISA试剂盒
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4DRG瘦素ELISA试剂盒(德国DRG:EIA-2395)1、说明DRG公司的瘦素酶免试剂盒可用于人血清和血浆中瘦素的定量检测。此检测试剂盒仅供体外诊断用。2、实验原理DRG公司的瘦素酶免实验是一种基于夹心法原理的固相酶免吸附实验(ELISA)。反应板上的微检测孔包被有能结合瘦素分子上独特抗原位点的单克隆抗体。一份含有内源性瘦素的病人样本在包被孔中与特异性兔抗瘦素抗体进行孵育,之后就会形成一个夹心复合物。孵育后,用洗涤液洗去未结合的物质,再加入过氧化物酶标记的抗兔抗体以检测结合在包被板上的瘦素的量。加入底物溶液后,显出的颜色强度与病人样品中瘦素的浓度成正比。3、试剂盒成分1)包被板,12×8孔,可拆,微孔中包被了抗瘦素抗体(单克隆)2)标准品(0-5),6支冻干型0.5mL,浓度:0,2,5,25,50,100ng/ml,内含0.3%的Proclin防腐剂3)质控品,2支,200ul,即用,2个浓度(低与高),具体数值与范围请见试剂瓶标签或QC质控单。内含0.3%的Proclin防腐剂。4)实验缓冲液,1支,11ml,即用,内含0.3%的Proclin防腐剂5)抗血清,1支,11ml,即用,单克隆瘦素抗血清,内含0.3%的Proclin防腐剂。6)酶复合物,1支,11ml,即用,辣根过氧酶标记的抗兔复合物,内含0.3%的Proclin防腐剂7)TMB底物液,1支,14ml,即用8)终止液,1支,14ml,即用,内含0.5M的H2SO4,避免接触终止液,以免刺激皮肤或灼烧皮肤。9)洗涤液(40×),1支30ml注:零标准品应视需要而定。4、实验所需器材(但试剂盒不提供)1)酶标仪(450±10nm)(如DRG公司的酶标仪)2)极ng确取样枪3)吸水纸。4)蒸馏水5、贮存条件未开启的试剂在28℃下贮存,在有效期内可以保持活性。不要使用过期试剂。酶联物、底物溶液、标准品和零标准品必须在28℃下贮存。微孔反应板必须在28℃下贮存。一旦包装袋被打开,必须将它小心地严封起来。6、样品采集1)血清:静脉穿刺采集全血,待其凝血,在室温下离心分离血清。未完全凝血前请勿离心,接受了抗凝剂ZL的病人样品可能需要更长的凝血时间。2)血浆:将全血采集到含有抗凝剂的离心管,采集后立即离心分离。3)样品的储存:实验开始前应用盖子将样品密封好,2-8℃下可存放24个小时,如实验之前需将样品贮存更长的时间,应当将样品冻存于-20℃的环境下,并且只能冻存一次,不能反复冻存。解冻的样本在实验之前必须要上下倒置几次。7、样品的稀释:在**次实验中,要是样品的浓度高于Z高标准品,则样品应用按实验步骤所描述用零标准品进行稀释,并重新检测。并且在计算浓度时需乘上此稀释因子。例子:a)按1:10稀释:10μL的血清+90μL的零标准品(充分摇匀)。b)按1:100释稀:10μL按a)稀释的血清+90μL的零标准品(充分摇匀)8、实验步骤所有的标准品、质控品和样品都必须做双份检测以确保所有的检测条件都一样。每一次实验都有一条标准曲线。1)将所需数目的板条置于板架上。。2)用一次性吸嘴将标准品质控品和样品分别15μL加入相应的检测孔中。3)每孔加入100μL的检测缓冲液。4)充分混合10秒,在此步骤中充分混合非常重要。5)室温下温育120分钟。6)快速弃去检测孔中的内含物,每孔用300μL洗涤液洗板三次,在吸水纸上拍干以除去残余液体。注意:洗板步骤是否正确操作会明显影响实验的灵敏度和极ng确度。7)每孔加入100μL抗血清。8)在室温下温育30分钟。9)快速弃去检测孔中的内含物,每孔用300μL的洗涤液洗板三次,在吸水纸上拍干以除去残余液体。10)每孔加入100μL酶联物。11)在室温下温育30分钟。12)快速弃去检测孔中的内含物,每孔用300μL的洗涤液洗板三次,在吸水纸上拍干以除去残余液体。13)每孔加入100μL底物液。14)室温温育15分钟。15)每孔加入50μL终止液以终止酶反应。16)在加终止液后10分钟内于450±10nm处读取OD值。9、结果计算1)计算每个标准品、质控品和病人样本的平均吸光度值。2)用吸光度值作为纵坐标(y),浓度值作为横坐标(x),以每个标准品的吸光度值对其相应的浓度值进行标绘,作一标准曲线。3)用每一样品的平均吸光度值在标准曲线上确定其相应的浓度。4)自动计算方法:在IFU上,它用四参数曲线已自动计算出结果。其它的归纳方法可能会得出稍微不同的结果。5)样品的浓度可直接从标准曲线上读取。样品中HPL浓度高于Z高标准品的必须用进行进一步的稀释。在计算样品浓度时就应当把此稀释因子考虑进去。10、参考值我们强烈建议各个实验市都建立自己的正常值和异常值。以下结果是以一定量正常人群的血液样本为准得出的实验结果:人群ng/ml男性3.84±1.79女性7.36±3.73本译文仅供参考,详情请以原文为准。ZGdu家总代理:深圳市科润达生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10号6层电话:0755-26814430,26680196邮政编码:518067免费电话:800-8306296传真:0755-2681443[详细]
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- 大鼠ELISA试剂盒细胞形态特征淋巴母细胞样细胞生长特性小鼠杂交瘤细胞ER细胞半贴壁生长细胞特种特性该杂交瘤细胞由公司制备并提交,细胞注射小鼠腹腔可产生高滴度的单抗,可用于基础研究和临床检验。培养基血清细胞传代方法1:3传代,2-3天传一代细胞传代情况C10细胞冻存条件基础培养基+5%DMSO+20%FBS支原体检测阴性A52825ETBR/EndothelinBReceptor内皮素B受体抗体0.2mlA52826ETFB电子转移黄素蛋白β肽/黄素蛋白抗体0.2mlA52827ET-3小鼠杂交瘤细胞ER细胞内皮素3抗体0.2mlA52828Ets1/ETS-1Ets转录因子家族ets1抗体0.1mlA52829ETK/BMX非受体性蛋白酪氨酸激酶ETK抗体0.1mlA52830Phospho-BMX/ETK(Tyr40)磷酸化非受体性蛋白酪氨酸激酶ETK抗体0.1mlA52831Phospho-BMX/ETK(Tyr556)磷酸化非受体性蛋白酪氨酸激酶ETK抗体0.1mlA52832EMAP2内皮单核细胞激活肽2抗体0.2mlA52833Eukaryoticaspartylprotease天冬氨酸蛋白酶家族蛋白抗体1mlA52834EV71polyproteinVP4肠道病毒71型/手足口病病毒抗体0.2mlA52835DeltaD/DLDDeltaD抗体0.2mlA52836EV71polyprotein3D肠道病毒71型/手足口病病毒抗体0.2mlA52837EXPB-2植物延展素-β1mlA52838DHHDHH蛋白抗体0.2mlA52839ATEXPA10植物延长蛋白(拟南芥)1mlA52840Ezrin埃兹蛋白抗体0.1ml大鼠ELISA试剂盒A52841Phospho-Ezrin(Tyr353)磷酸化埃兹蛋白抗体0.1mlA52842Phospho-Ezrin(Thr567)磷酸化埃兹蛋白抗体0.1mlA52843F1operonpositiveregulatoryprotein(NT)肺鼠疫耶尔森氏菌F1荚膜蛋白抗体(N端)0.2mlA52844F1operonpositiveregulatoryprotein肺鼠疫耶尔森氏菌F1荚膜蛋白抗体(C端)0.2mlA52845FAAH1脂肪酸酰胺水解酶1抗体0.2ml[详细]
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- 大鼠白细胞介素8(IL-8)酶联免疫分析试剂盒使用说明书实验原理大鼠细胞介素ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠白细胞介素8(IL-8)水平。用纯化的大鼠白细胞介素8(IL-8)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素8(IL-8),再与HRP标记的白细胞介素8(IL-8)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素8(IL-8)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠白细胞介素8(IL-8)浓度。试剂盒组成120倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液3ml×1瓶2酶标试剂3ml×1瓶8标准品(960ng/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×4条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液3ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液3ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液3ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。480ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液240ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液120ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液60ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液30ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算大鼠细胞介素ELISA试剂盒以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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