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猪血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒
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猪血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒
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猪血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒
- 猪血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒[详细]
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2015-05-27 00:00
实验操作
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猪血管内皮生长因子(VEGF)ELISA试剂盒
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com猪血管内皮生长因子(VEGF)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗猪VEGF单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的VEGF与单抗结合,加入生物素化的抗猪VEGF,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,VEGF浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中VEGF浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):40ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成40ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入40ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应VEGF含量。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的VEGF检测浓度小于30pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的猪VEGF。不与猪其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:00
产品样册
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猪血管内皮生长因子(VEGF)ELISA试剂盒说明书
- 猪血管内皮生长因子(VEGF)ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围:20ng/L-800ng/L使用目的:本试剂盒用于测定猪血清、血浆及相关液体样本中血管内皮生长因子(VEGF)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪血管内皮生长因子(VEGF)水平。用纯化的猪血管内皮生长因子(VEGF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入血管内皮生长因子(VEGF),再与HRP标记的血管内皮生长因子(VEGF)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的血管内皮生长因子(VEGF)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中猪血管内皮生长因子(VEGF)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(1600ng/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。800ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液400ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液200ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液100ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液50ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-11-16 10:02
产品样册
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人血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒
- 人血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-05 00:00
其它
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人血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒
- 人血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-25 00:10
选购指南
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大鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒
- 大鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-28 18:08
产品样册
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小鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒
- 小鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-20 03:55
专利
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鸡血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒
- 鸡血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-29 13:46
标准
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猪血管内皮细胞粘附分子-1(sVCAM-1)ELISA试剂盒
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com猪血管内皮细胞粘附分子-1(sVCAM-1)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗猪sVCAM-1单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的sVCAM-1与单抗结合,加入生物素化的抗猪sVCAM-1,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,sVCAM-1浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中sVCAM-1浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清测定前用标本稀释液至少作1:20稀释(取10ul,加标本稀释液190ul,稀释20倍)。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成20ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应sVCAM-1含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的sVCAM-1检测浓度小于15pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的猪sVCAM-1。不与猪其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:00
产品样册
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猪血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒
- 猪血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-12 00:00
期刊论文
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猪血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒
- 猪血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-20 13:38
操作手册
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小鼠血管内皮细胞生长因子elisa代测,VEGF试剂盒
- 在小鼠血管内皮细胞生长因子elisa代测,VEGF试剂盒实验前的我们应该要特别注意的有以下几点:一、请老师看清楚说明书内容。二、厂家发货的盒子都是Z近生产的,但在实验前还是要确定一下生产日期。三、另外要根据试剂盒组成查看小鼠血管内皮细胞生长因子elisa代测,VEGF试剂盒所包含的试剂是否齐全。四、酶标板可以用多少拆卸多少,剩余部分做点处理低温保存。五、实验所用到的酶标仪、洗板机、离心机、培养箱[详细]
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2018-10-23 10:30
产品样册
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人(Human)血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA检测试剂盒
- 人(Human)血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用试验原理:VEGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知VEGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将VEGF和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中VEGF的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制:试剂盒成份96孔配置48孔配置96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)塑料膜板盖1块半块标准品:480ng/ml1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)标准品稀释缓冲液1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)生物素标记的抗VEGF抗体1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)亲和链酶素-HRP1瓶(12ml)1瓶(5ml)洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)自备材料:1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。4.样品收集、处理及保存方法:1、血清……操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。2、血浆……EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液……1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆……将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。5、保存……如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。操作注意事项:●试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。●实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。●不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。●使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。●使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。●底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。●加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。●按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。安全性:1.避免直接接触终止液和底物A、B,一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实难中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。试剂的准备:1.标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:480ng/ml(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul240ng/ml(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液120ng/ml(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液60ng/ml(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液30ng/ml(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液15ng/ml(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0ng/ml(空白对照)原倍浓度不用稀释直接加入50ul2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。试剂盒性能:1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。操作步骤:1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育45分钟。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入100ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育5分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断与分析:1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的VEGF标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的VEGF含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度,再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。3、检测值范围:0-480ng/ml4、敏感度:1.0ng/ml上海恒远生物科技有限公司主营产品:ELISA试剂盒,酶免试剂盒,试剂盒,进口抗体,血清,标准品,培养基,生物试剂、ATCC细胞,实验耗材等。电话:021-60517348QQ:2675483613[详细]
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2018-11-16 10:02
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大鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)检测试剂盒
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2024-09-18 18:09
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- 血管内皮生长因子(VEGF)ELISA试剂盒说明书[详细]
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2016-07-25 00:00
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- 犬血管内皮生长因子(VEGF)ELISA试剂盒 本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。[详细]
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2023-08-18 11:43
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