干细胞研究 相关蛋白

本文由 重庆市华雅干细胞技术有限公司 整理汇编

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• 干细胞研究 相关蛋白

  干细胞研究相关蛋白:胚胎干细胞培养基中Z常用的蛋白FGF-basicTGF-b1ActivinA胚胎干细胞培养基中使用的其它蛋白BAFFIGF-1BDNFGDF-3BMP-4NogginEPOTGF-b3FGF-4VitronectinFollistatinWnt-3aHeregulinb神经干细胞培养基中常用的蛋白BMP-2Galectin-1bNGFGDNFCNTFNeuregulinEGFNT-3FGF-basicWnt-3aFGF-8造血干细胞培养基中常用的蛋白SCFFlt3-LigandIL-3SCGFIL-6ShhGM-CSFTPOG-CSFVEGF用于细胞重编程的蛋白Sox2Sox2-TATOct4*Oct4-TATNanogNanog-TATLin28*Lin28-TATKlf4*Klf4-TATcMyc*cMyc-TAT*备注：*即将推出干细胞研究中常用的细胞因子HumanVitronectin(人玻璃粘连蛋白)VTN,Serum-spreadingfactor,V75Vitronectin为分泌型糖蛋白，在肝脏中合成。其在循环中主要以单体形式存在，但也可通过构象改变生成以二硫键相连的多聚体。多聚体Vitronectin能有效地结合并掺入细胞外基质。在基质中，Vitronectin可通过结合多种整合素和其它蛋白多糖而对细胞粘附起到支持作用。此外，重组的Vitronectin在人胚胎干细胞更新培养基中可作为一种化学成分明确的基质成分。重组人Vitronectin为含459个氨基酸的单链单体蛋白，在还原型SDS-PAGE电泳中呈现表观分子量为75kDa的条带。HumanActivinA(人活化素A)无ActivinA是TGF-β家族的成员之一，具有调节细胞增殖和分化、促进神经元存活等多种生物学活性。在人结直肠肿瘤和罹患乳腺癌的绝经后妇女中均会发现ActivinA水平的。ActivinA的生物学活性可被inhibins(YZ素)和可扩散的TGF-β拮抗剂Follistatin(卵泡抑素)所中和。人ActivinA的分子量为26kDa，是由两条βA链通过二硫键连接形成的同源二聚体，每条链含116个氨基酸残基。HumanNoggin(人Noggin)无Noggin属于可扩散蛋白家族的成员，其可结合TGF-β家族的配体分子，并通过YZ后者与相应信号传导受体的接近而调节配体分子的活性。TGF-β配体与其天然拮抗剂的相互作用在发育过程中具有重要的生物学意义，体现在细胞的应答会因局部信号分子浓度的改变而出现显著的差别。NogginZ初认为是在头部和其它背部结构正确成型中起关键作用的BMP-4的拮抗剂。后来的研究显示，Noggin也调节其它BMPs(骨形态发生蛋白)，如BMP-2,-7,-13和-14的活性。在小鼠中敲除Noggin基因会导致产前死亡和严重的骨骼肌系统畸形等隐型表型的出现。相反，在成熟的成骨细胞中过表达Noggin的转基因小鼠会出现成骨细胞分化受损、骨形成减少和严重的质疏松等症状。重组人Noggin(120-10C)的分子量为46kDa，是由两条含206个氨基酸残基的肽链通过二硫键连接形成的同源二聚体。HumanSox2(人Sox2)无Sox2又名性别决定区Y(SRY)框2，属于一个结构相关的转录因子家族。此家族成员的主要结构中均含有一个79个残基的DNA结合域，即高迁移率族蛋白(HMG)盒。Sox2在维持胚胎干细胞(ESC)的多能性和决定细胞命运中发挥关键作用。基因芯片结果显示，Sox2调节FGF-4、YES1和ZEP206等多种参与胚胎认育的基因的表达。Sox2、Oct3/4和一个位于RAX启动子上游约2kb位置的保守非编码DNA序列(CNS1)共同形成三元复合体后行使转录激活功能。在分离自一名健康研究人员皮肤活检标本的皮肤成纤维细胞中导入Sox2、Oct4、Myc和Klf4基因，足以使成纤维细胞的基因组回复至多能状态。这种重编程的细胞在形态学、基因表达、以及在免疫缺陷小鼠中形成畸胎瘤的能力等方面均与ESC相似。重组人Sox2的分子量为34.3kDa，含317个氨基酸残基。HumanTGF-b1(人转化生长因子-β1)TransformingGrowthFactor-beta1,Differentiationinhibitingfactor,Cartilage-inducingfactor哺乳动物中TGF-β的三个亚型TGF-β1,β2和β3型均通过相同的受体传导信号，并产生相似的生物学反应。这些细胞因子具有调节细胞增殖、生长、分化、运动、以及细胞外基质的合成和沉积等多种功能，而且也参与胚胎发生、组织重塑和伤口愈合等生理过程。TGF-β主要以复合体的形式被细胞分泌，储存在细胞表面和细胞外基质内。从复合体中释放出具生物活性的TGF-β亚型需经蛋白水解和/或Thrombospondin-1(凝血酶敏感蛋白-1)等蛋白诱导引起的构象改变。TGF-β1是几乎所有类型细胞分泌Z多的亚型，Z初因具有诱导成纤维细胞表型转化的能力而被鉴定出来。近来发现，TGF-β1也参与皮肤肿瘤的形成。人TGF-β1的分子量为25.0kDa，每个亚基含112个氨基酸残基，由一个二硫键相连。MurineWnt-3a(小鼠Wnt-3a)Wingless-typeMMTV(mousemammarytumorvirus)integrationsitefamilymember3aWnt-3a属于信号蛋白的Wnt家族，在维持胚胎和成体组织的完整性中发挥着重要的作用。Wnt-3a主要沿跨越神经系统(CNS)重叠区域的背侧中线表达。Wnt-3信号在包括胚胎成型、细胞决定、细胞增殖、CNS发育和细胞骨架形成等多种形态发生过程中不可或缺。与该家族的其它成员相似，Wnt-3a含有一个高度保守的脂类修饰的半胱氨酸富集域，该区域为细胞信号传导所必需。在经典的Wnt途径中，Wnt家族成员结合并激活Frizzled家族的七次跨膜受体，Z终导致β-Catenein降解的终止。细胞内聚积的β-Catenein促使该蛋白转位进入细胞核，继而与TCF/LEF转录因子结合而促进基因的表达。缺乏Wnt信号会丧失对肿瘤YZ基因的转录激活能力，并可引起肿瘤转化、癌症发生和人类退行性疾病。重组小鼠Wnt-3a为单体糖蛋白，含328个氨基酸残基。由于存在糖基化，小鼠Wnt-3a在非还原型SDS-PAGE分析中呈现表观分子量约为38.0-41.0kDa的条带。[详细]

  2018-08-24 10:00

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• 干细胞研究相关因子

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  2024-09-30 17:28

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• 干细胞研究的全面解决方案

  干细胞作为再生医学的重要手段与研究核心，涵盖了基础与临床医学多个方面。在基础研究方面，干细胞成为生命科学的重要模型，有助于我们更进一步探索人体内各种生理及反应的分子机制。在临床应用方面，干细胞可以应用到人类面临的诸多医学难题中。岛津公司，支持干细胞研究的各个阶段，从分离培养到研究分析，不论是科研实验耗材，还是鉴定检测设备，岛津均能提供**的解决方案。[详细]

  2018-08-26 10:00

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• 人干细胞因子酶联免疫分析仅供研究使用

  目的：本试剂盒用于测定人血清，细胞上清及相关液体样本中干细胞因子-α（SCF-α）的含量。人干细胞因子酶联免疫分析实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人干细胞因子-α（SCF-α）水平。用纯化的人干细胞因子-α（SCF-α）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入干细胞因子-α（SCF-α），再与HRP标记的SCF-α抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的干细胞生长因子-α（SCF-α）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人干细胞因子-α（SCF-α）含量。样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。人干细胞因子酶联免疫分析操作步骤标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为90pg/ml，60pg/ml，40pg/ml，20pg/ml，10pg/ml）。加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。温育：操作同3。洗涤：操作同5。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。人干细胞因子酶联免疫分析注意事项：试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围：3pg/ml-120pg/ml保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-09-19 10:00

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• 干细胞资料

  干细胞即为起源细胞。简单来讲，它是一种具有多向分化潜能和自我复制能力的原始未分化细胞，是形成哺乳类各组织器官的祖宗细胞。干细胞的形态上具有共性，通常呈圆形或椭圆形，细胞体积小，核相对较大，细胞核多为常染色质，并具有较高的端粒酶活性。干细胞可分为胚胎干细胞和成体干细胞。在胚胎的发SF育中，单个受精卵可以分裂发育为多细胞的组织或器官。在成年动物中，正常的生理代谢或病理损伤也会引起组织或器官的修复再生。胚胎的分化形成和成体组织的再生是干细胞进一步分化的结果。胚胎干细胞是全能的，具有分化为几乎全部组织和器官的能力。而成体组织或器官内的干细胞一般认为具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织。　　胚胎干细胞(Embrtibucstemcell)的发育等级较高，是全能干细胞(Pluripotentstemcell)而成体干细胞的发育等级较低，是多能干细胞或单能干细胞。据走在生物医学美容Z前沿的由SINOMOS/A35文献报导干细胞是一类具有自我更新和分化潜能并保持未分化状态的细胞。它包括胚胎干细胞和成体干细胞。干细胞的发育受多种内在机制和微环境因素的影响。目前人类胚胎干细胞已可成功地在体外培养。Zxin研究发现，成体干细胞可以横向分化为其他类型的细胞和组织，为干细胞的广泛应用提供了　　Zxin的研究表明，组织特异性干细胞同样具有分化成其他细胞或组织的潜能，这为干细胞的应用开创了更广泛的空间。　　干细胞具有自我更新能力(Self-renewing)，能够产生高度分化的功能细胞。华雅干细胞整理上传[详细]

  2024-10-03 05:41

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• 人细胞毒素相关蛋白A(CagA)检测试剂盒

  人细胞毒素相关蛋白A(CagA)检测试剂盒[详细]

  2015-03-11 00:00

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• 大鼠生长相关蛋白43试剂盒说明书

  大鼠生长相关蛋白43试剂盒说明书[详细]

  2015-05-15 00:00

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• 微管相关蛋白2(MAP-2)ELISA试剂盒

  微管相关蛋白2(MAP-2)ELISA试剂盒[详细]

  2015-03-02 00:00

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• 酪氨酸酶相关蛋白2 TRP2单抗

  应用酪氨酸酶相关蛋白2TRP2单抗实验：试验验证过适用于Westernblotting实验、免疫组化实验（Immunohistochemistry）、ELISA实验。TRP2单抗说明书，请打电话询要。乳腺癌相关抗原包装规格：0.1ml、0.2mlAnti-TRP2：鼠源单抗、兔源多抗重要提示：酪氨酸酶相关蛋白2TRP2单抗避免重复冻融，专为科研实验使用。欢迎打电话咨询详情！9001-18-7心肌黄酶人SH2携带蛋白elisa代测,SHC/SLP-76试剂盒人膀胱癌抗原elisa代测,UBC试剂盒51312-42-6磷钨酸钠十八水合物人抗精子抗体elisa代测,AsAb试剂盒小鼠绒毛膜促性腺激素elisa代测,CG试剂盒人样生长因子结合蛋白2elisa代测,IGFBP2试剂盒18264盐酸胍73049-39-5脱氧核糖核酸（小牛胸腺）大鼠血管内皮细胞生长因子受体2elisa代测,VEGFR-2试剂盒人转铁蛋白受体elisa代测,TFR/CD71试剂盒150-90-3丁二酸钠人结核菌杆抗体IgGelisa代测,TB-AbIgG试剂盒[详细]

  2018-11-05 10:00

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• 鲫鱼Agouti相关蛋白（AGRP）试剂盒使用方法

  鲫鱼Agouti相关蛋白（AGRP）试剂盒使用方法本试剂盒仅供研究使用。检测范围：96T2.0ng/L-50ng/L使用目的：本试剂盒用于测定鲫鱼血清、血浆及相关液体样本中Agouti相关蛋白（AGRP）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鲫鱼Agouti相关蛋白（AGRP）水平。用纯化的鲫鱼Agouti相关蛋白（AGRP）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入Agouti相关蛋白（AGRP），再与HRP标记的Agouti相关蛋白（AGRP）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的Agouti相关蛋白（AGRP）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鲫鱼Agouti相关蛋白（AGRP）浓度。[详细]

  2018-12-30 10:00

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• 蛋白聚集体的分子量研究

  蛋白聚集体的分子量研究[详细]

  2016-04-08 00:00

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• 大鼠Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒

  大鼠Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-09 00:00

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• 兔Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒

  兔Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-13 00:00

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• 人脂肪分化相关蛋白(ADRP)ELISA试剂盒

  人脂肪分化相关蛋白(ADRP)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-06 00:00

  课件

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• 人Bcl-2相关X蛋白(BAX)检测试剂盒

  人Bcl-2相关X蛋白(BAX)检测试剂盒[详细]

  2015-03-10 00:00

  应用文章

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• 人甲状旁腺激素相关蛋白ELISA 检测试剂盒

  人甲状旁腺激素相关蛋白ELISA 检测试剂盒[详细]

  2016-01-20 00:00

  期刊论文

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• 人妊娠相关蛋白A（PAPP-A）ELISA试剂盒说明书

  电话：021-6533363955229872网址：http://www.westang.com人妊娠相关蛋白A（PAPP-A）ELISA试剂盒（用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内）原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人PAPP-A单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的PAPP-A与单抗结合，加入生物素化的抗人PAPP-A，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，Z后加终止液硫酸，在450nm处测OD值，PAPP-A浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中PAPP-A浓度。试剂盒组成（2-8℃保存）酶标板（CoatedWells）96孔酶标抗体工作液（EnzymeConjugate）12ml10×标本稀释液（SampleBuffer）12ml20×浓缩洗涤液（WashBuffer）50ml标准品（Standards）：200mIU/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗体工作液（BiotinylatedAntibody）12ml终止液（StopSolution）12ml准备试剂与收集血样1.收集标本：血清、血浆（EDTA、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，避免反复冻融。2.标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，配成200mIU/ml的溶液。设标准管8管，每管加入标本稀释液300ul。在**管中加入200mIU/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出300ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）检测程序1.加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板：同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品100、50、25、12.5、6.25、3.12、1.56、0mIU/ml为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应PAPP-A含量即可。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的PAPP-A检测浓度小于0.8mIU/ml。2.特异性：可同时检测重组或天然的人PAPP-A。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性：板内、板见变异系数均小于9.7％。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！[详细]

  2018-09-13 10:01

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• 大鼠Agouti相关蛋白（AGRP）ELISA检测试剂盒

  www.biokanu.com本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断大鼠Agouti相关蛋白（AGRP）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被大鼠Agouti相关蛋白（AGRP）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠Agouti相关蛋白（AGRP）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品酶标仪（450nm）高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒温箱操作注意事项试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。预处理后的样本无需稀释，直接取10μL加样即可。严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品（32ng/mL）0.6mL0.6mL按说明书进行稀释标准品稀释液6mL3mL无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品用标准品稀释液依次稀释为：32、16、8、4、2、1ng/mL.试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。操作步骤从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。设置标准品孔、样本孔和空白孔，空白孔什么都不加；标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；待测样本孔先加样本稀释液40μL，再加待测样本10μL；随后标准品孔和样本孔中（空白孔不加）加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。所有孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。所有孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。试剂盒性能1.准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。2.灵敏度：Zdi检测浓度小于0.1ng/mL。3.特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.重复性：板内、板间变异系数均小于15%。5.贮藏：2-8℃，避光防潮保存。6.有效期：6个月免责声明1.试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。2.严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。[详细]

  2018-09-22 10:00

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• 人Bcl-2相关X蛋白（BAX） 试剂盒使用方法

  检测范围：48T0.75μg/L-24μg/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中Bcl-2相关X蛋白(BAX)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人Bcl-2相关X蛋白(BAX)水平。用纯化的人Bcl-2相关X蛋白(BAX)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入Bcl-2相关X蛋白(BAX)，再与HRP标记的Bcl-2相关X蛋白(BAX)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的Bcl-2相关X蛋白(BAX)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人Bcl-2相关X蛋白(BAX)浓度。[详细]

  2018-10-01 10:00

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• 大鼠Bcl-2相关X蛋白（BAX）酶联免疫分析

  大鼠Bcl-2相关X蛋白（BAX）酶联免疫分析试剂盒使用方法检测范围：1μg/L-40μg/L使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中Bcl-2相关X蛋白（BAX）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠Bcl-2相关X蛋白（BAX）水平。用纯化的大鼠Bcl-2相关X蛋白（BAX）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入Bcl-2相关X蛋白（BAX），再与HRP标记的Bcl-2相关X蛋白（BAX）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的Bcl-2相关X蛋白（BAX）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠Bcl-2相关X蛋白（BAX）浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（64μg/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。32μg/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液16μg/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液8μg/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液4μg/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液2μg/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-10-03 10:00

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