沪鼎分析：ELISA白板异常怎么办？

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2024-10-01 05:28 1073阅读次数

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• 沪鼎分析：ELISA白板异常怎么办？

  ELISA白板异常怎么办？结果描述：显色步骤结束后酶标板所有孔均无颜色。阳性对照不显色。原因分析：试剂已过有效期，或不同试剂盒组分混用，检查试剂的组分及批号，确认未过期以及所有组分均属对应的试剂盒。对策：不同试剂盒或不同批号的试剂不能混用。整板的黄板现象可能是由于错加其他试剂造成，如同时操作两对半试剂时，测HbsAb板用于测HBsAg等；实验前检查试剂的组分及批号，确认所有组分均属于对应的试剂盒。如盛标本的试管四周常有血痂，易脱落，应远离酶标板。ELISA试剂盒超过有效期的产品可能会产生很弱的信号；试剂盒没有按规定进行留存，受高温影响；实验前检查试剂的组分及批号，确认试剂未过期。孵育温度应控制在37-38℃，孵育时间严格按照说明书操作，保温期内不宜多开门，以免影响保温。花板，一般是由于临床标本的收集、处理和留存方法不当造成，放置时间(自然放置1~2h)及离心转(3000r/min)、离心时间(15min)应引起注意。试剂、样品用前未平衡至室温从低温冰箱中取出的试剂及样品应置室温平衡，20分钟左右。错加、漏加试剂底物、显色剂A或B严格按说明书的步骤操作，加完试剂后可观察一下液面高度是否一致，以减少漏加现象。实验结束后，阴阳性对照正常，质控正常，但临床标本感觉显色较弱，待测标本中可能不含强阳性标本，故结果可能是正常的，如有怀疑，可复检标本加入叠氮钠作为防腐剂，酶免实验中的标本禁用叠氮钠作为防腐剂，可选用proclin、硫柳汞等其他防腐剂，阴阳性对照正常，但质控、参考品或个别弱阳性标本未能检出。不同试剂盒或不同批号的试剂不能混用。酶标对吸头的污染以及对盛放显色剂容器的污染都易造成黄板现象；避免试剂组分间的交叉污染，确保吸头、容器的干净，显色剂在光照条件下放置过久，实验前已变蓝，显色剂A、B未使用前避光留存，孵育温度过高或孵育时间过长；孵育温度应控制在37-38℃，孵育时间严格按照说明书操作。标本在一周内使用的，可存于2-8℃，如需长期留存，应置于-20℃以下留存。不要将ELISA试剂盒长时间置于常温下，按使用规定储藏。出现随机性的花板、跳孔现象样品离心不完全，反应孔内发生凝血或残留细胞成分；充分离心，3000rpm6分钟以上。仪器设定不正确，滤光片不匹配，重新设定酶标仪的参数，特别是检查滤光片是否匹配，灵敏度过高、板底高、高背景终止后，整板结果显现均一的黄色或淡黄色；或阴阳性对照、质控正常，标本阴性标本，OD值过高。特别是洗涤时每孔未注满洗液，易造成花板黄板现象，严格按说明书要求洗板。洗板及加样过程中，酶标受污染失活失去催化显色剂显色的能力，确认盛酶标的容器不含酶YZ剂如叠氮钠等，确认配制洗液的容器已洗干净。加样时交叉污染；加标本时尽量避免交叉污染。[详细]

  2024-10-01 05:28

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• 拉力机位移异常怎么办

  拉力机位移异常怎么办[详细]

  2015-01-26 00:00

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• 沪鼎生物免疫沉淀技术服务流程

  免疫沉淀反应主要用于抗原或者抗体的定性检测。其原理是指可溶性抗原与相应抗体在有电解质存在的情况下，按适当比例所形成的可见沉淀物现象。据此现象设计的沉淀实验主要包括絮状沉淀试验，环状沉淀试验和凝胶内的沉淀试验。凝胶内的沉淀试验依所用的实验方法又可分为免疫扩散实验和免疫电泳技术2类。免疫共沉淀是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其基本原理是:细胞裂解液中加入抗体，与抗原形成特异免疫复合物，经过洗脱，收集免疫复合物，然后进行SDS-PAGE及Westernblotting分析。免疫沉淀操作流程（以ProteinAAgarose方法为例）：一、蛋白样品的准备1.对于10厘米细胞培养皿中的贴壁细胞，吸除细胞培养液，PBS洗涤一次，然后加入500微升至2毫升细胞裂解液裂解细胞。2.对于组织样品参考贴壁细胞使用裂解液的比例进行裂解。3.对于悬浮细胞，离心收集细胞后，PBS洗涤一次，然后参考贴壁细胞的裂解方法进行裂解。二、去除非特异性结合1.取200微升至1毫升蛋白样品，蛋白量约为200微克至1毫克，加入约1微克和免疫沉淀时使用的IgG种属相同的普通IgG和20微升充分重悬的ProteinAAgarose，4℃缓慢摇动30分钟至2小时。2.2500rpm(约1000g)离心5分钟，取上清用于后续的免疫沉淀。三、免疫沉淀1.加入0.2-2微克用于免疫沉淀的一抗，4℃缓慢摇动放置一个晚上。2.再加入20微升充分重悬的ProteinAAgarose，4℃缓慢摇动1-3个小时。3.2500rpm(约1000g)离心5分钟，或瞬时高速离心，小心吸除上清，注意宁可留下少量上清也不能吸掉ProteinAAgarose。4.用准备蛋白样品时的裂解液或PBS洗涤沉淀5次，裂解液或PBS的用量每次为0.5-1毫升。洗涤时离心条件和吸除上清的要求同上面的步骤。5.完成Z后一次洗涤后，去除上清，加入20-40微升1XSDS-PAGE电泳上样缓冲液Vortex重悬沉淀，瞬时高速离心把样品离心至管底。6.100℃或沸水浴处理3-5分钟，取部分或全部样品用于SDS-PAGE电泳，暂时不用的样品可以-20℃保存。免疫共沉淀：参考免疫沉淀的方法进行，但免疫共沉淀(co-IP)通常必须使用未经冻存的新鲜蛋白样品。普通的免疫沉淀虽然可以使用冻存的蛋白样品，但也宜用新鲜的蛋白样品为佳。[详细]

  2024-10-03 09:26

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• 上海沪鼎为您解说配制培养基的基本过程

  上海沪鼎为您解说配制培养基的基本过程1、配制溶液向容器内加入所需水量的一部分,按照培养基的配方,称取各种原料,依次加入使其溶解,Z后补足所需水分.对蛋白胨、肉膏等物质,需加热溶解,加热过程所蒸发的水分,应在全部原料溶解后加水补足。配制固体培养基时,先将上述已配好的液体培养基煮沸,再将称好的琼脂加入,继续加热至完全融化.并不断搅拌,以免琼脂糊底烧焦。2、调节pH值用pH试纸(或pH电位计、氢离子浓度比色计)测试培养基的pH值,如不符合需要,可用10%HCl或10%NaOH进行调节,直到调节到配方要求的pH值为止.3、过滤用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤.用纱布过滤时,**折叠成六层,用滤纸过滤时,可将滤纸折叠成瓦棱形,铺在漏斗上过滤.4、分装已过滤的培养基应进行分装.如果要制作斜面培养基,须将培养基分装于试管中.如果要制作平板培养基或液体、半固体培养基,则须将培养基分装于锥形瓶内.分装时,一手捏松弹簧夹,使培养基流出,另一只手握住几支试管或锥形瓶,依次接取培养基.分装时,注意不要使培养基粘附管口或瓶口,以免浸湿棉塞引起杂菌污染.装入试管的培养基量,视试管和锥形瓶的大小及需要而定.一般制作斜面培养基时,每只15×150毫米的试管,约装3～4毫升(1/4～1/3试管高度),如制作深层培养基,每只20×220毫米的试管约装12～15毫升.每只锥形瓶装入的培养基,一般以其容积的一半为宜.5、加棉塞分装完毕后,需要用棉塞堵住管口或瓶口.堵棉塞的主要目的是过滤空气,避免污染.棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作,不要用脱脂棉,以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用.制作棉塞时,要根据棉塞大小将棉花铺展成适当厚度,揪取手掌心大小一块,铺在左手拇指与食指圈成的圆孔中,用右手食指插入棉花中部,同时左手食指与姆指稍稍紧握,就会形成1个长棒形的棉塞.棉塞作成后,应迅速塞入管口或瓶口中,棉塞应紧贴内壁不留缝隙,以防空气中微生物沿皱折侵入.棉塞不要过紧过松,塞好后,以手提棉塞、管、瓶不下落为合适.棉塞的2/3应在管内或瓶内,上端露出少许棉花便于拔取.塞好棉塞的试管和锥形瓶应盖上厚纸用绳捆札,准备灭菌.6、制作斜面培养基和平板培养基培养基灭菌后,如制作斜面培养基和平板培养基,须趁培养基未凝固时进行.1、制作斜面培养基.在实验台上放1支长0.5～1米左右的木条,厚度为1厘米左右.将试管头部枕在木条上,使管内培养基自然倾斜,凝固后即成斜面培养基.2、制作平板培养基.将刚刚灭过菌的盛有培养基的锥形瓶和培养皿放在实验台上,点燃酒精灯,右手托起锥形瓶瓶底,左手拔下棉塞,将瓶口在酒精灯上稍加灼烧,左手打开培养皿盖,右手迅速将培养基倒入培养皿中,每皿约倒入10毫升,以铺满皿底为度.铺放培养基后放置15分钟左右,待培养基凝固后,再5个培养皿一叠,倒置过来,平放在恒温箱里,24小时后检查,如培养基末长杂菌,即可用来培养微生物.[详细]

  2024-10-03 08:24

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• ELISA试剂盒有问题怎么办

  ELISA试剂盒买回去如果有问题怎么办？客服：我司ELISA试剂盒用事实说话，免疫测定技术的基础在于抗原抗体之间的特异结合反应，所以任何优质的诊断试剂离不开优质的原料，如抗原抗体，酶等。我们对学校科研单位支持货到付款（部分订制产品需预交至少50%订金），规定期限内发现产品质量问题，支持无条件退换货，所以您可放心购买。ELISA试剂盒的优势：1，严格的质控体系：所有试剂盒从原料到成品经过严格的质控，确保试剂盒质量及稳定性。2，产品经过不断优化，具有很好的灵敏度；3，综合指标特性，研发便捷操作的试剂盒；4，检测验证样本多样；5，专业的研发团队为客户提供个性化的定制服务；6，提供食品安全药物残留ELISA试剂盒，以及代测服务；7，多年实践经验的技术老师，保证劲马生物ELISA试剂盒完善专业的售后服务；8，专业的代测服务：WB实验代测，ELISA试剂盒实验代测，IHC实验代测，染色实验代测（上海市客户可上门取样）。公司承诺：我们精心挑选进口的抗体对,标准品,显色剂和酶标板全部为产品实现**性能。采用先进ZL技术,严格按照标准生产方案组装生产。[详细]

  2018-09-27 10:00

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• 上海沪鼎特别为您分享：餐饮具大肠菌群快速测定方法

  大肠菌群是需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。我们所用的餐饮具可直接影响到我们的健康，今天上海沪鼎特别为您分享：餐饮具大肠菌群快速测定方法。1、采样方法随机抽取消毒后准备使用的各类食具(碗、盘、杯等)，取样量可根据大、中、小不同饮食行业每次采样6～10件，每件贴纸片两张，每张纸片面积25cm2(5cm5cm)用无菌生理盐水湿润大肠菌群检测用纸片后，立即贴于食具内侧表面，30s后取下，置于无菌塑料袋内。筷子以5只为一件样品，用毛细吸管吸取无菌生理盐水湿润纸片后，立即将筷子进口端约5cm)抹试纸片，每件样品抹拭两张，放入无菌塑料袋内。2、检验方法将已采样的纸片置37℃培养16～18h，若纸片保持紫蓝色不变或有红色斑点但斑点周围无黄晕为大肠菌群阴性，在红色斑点周围有黄晕或纸片变黄并在黄色背景上呈现红色斑点或片状红晕为阳性。3、卫生指标：在50cm2的纸片上，不得有大肠菌群阳性结果出现。[详细]

  2024-10-01 04:05

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• 人异常凝血酶原（APT）ELISA试剂盒说明书

  人异常凝血酶原(APT)ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，细胞上清及相关液体样本中人异常凝血酶原(APT)的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人异常凝血酶原(APT)水平。用纯化的人异常凝血酶原(APT)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入异常凝血酶原(APT)，再与HRP标记的异常凝血酶原(APT)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的异常凝血酶原(APT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人异常凝血酶原(APT)含量。试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：36ng/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为24ng/ml，16ng/ml，8ng/ml，4ng/ml，2ng/ml）。加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。温育：操作同3。洗涤：操作同5。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项：试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。（此图仅供参考）试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围：1ng/ml-30ng/ml保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2024-10-01 16:24

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• 氮吹仪漏气怎么办？

  氮吹仪漏气怎么办？[详细]

  2014-11-22 00:00

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• 锂离子电池常见的异常分析和原理

  锂离子电池常见的异常分析和原理电池不良项目及成因：1.容量低产生原因：a.附料量偏少；b.极片两面附料量相差较大；c.极片断裂；d.电解液少；e.电解液电导率低；f.正极与负极配片未配好；g.隔膜孔隙率小；h.胶粘剂老化→附料脱落；i.卷芯超厚（未烘干或电解液未渗透）j.分容时未充满电；k.正负极材料比容量小。2.内阻高产生原因：a.负极片与极耳虚焊；b.正极片与极耳虚焊；c.正极耳与盖帽虚焊；d.负极耳与壳虚焊;e.铆钉与压板接触内阻大；f.正极未加导电剂；g.电解液没有锂盐；h.电池曾经发生短路；i.隔膜纸孔隙率小。3.电压低产生原因：a.副反应（电解液分解；正极有杂质；有水）；b.未化成好（SEI膜未形成安全）；c.客户的线路板漏电（指客户加工后送回的电芯）；d.客户未按要求点焊（客户加工后的电芯）；e.毛刺；f.微短路；g.负极产生枝晶。4.超厚产生超厚的原因有以下几点:a.焊缝漏气;b.电解液分解;c.未烘干水分;d.盖帽密封性差;e.壳壁太厚;f.壳太厚;g.卷芯太厚（附料太多；极片未压实；隔膜太厚）。5.成因有以下几点a.未化成好（SEI膜不完整、致密）；b.烘烤温度过高→粘合剂老化→脱料；c.负极比容量低；d.正极附料多而负极附料少；e.盖帽漏气，焊缝漏气；f.电解液分解，电导率降低。6.爆炸a.分容柜有故障（造成过充）；b.隔膜闭合效应差;c.内部短路环宇检测仪器有限公司公司专业生产：电池冲击试验机满足标准：SJ/T11169-1998或UL1642-2007SJ/T11170-1998或UL2054MH/T1020-2007或UN38.3、GB/T18287-2000GB/T18287-200XYD1268-2003QB/T2502-2000SJ/TXXXX-200XIEC62281-2004电池挤压试验机满足标准：GB8897.4-2002IEC60086-4:2000UL2054UL1642电池针刺试验机满足标准：GB/T2900.11-1988IEC60086-4：2000UL2054UL1642[详细]

  2018-09-13 10:00

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• 人异常凝血酶原（APT）ELISA试剂盒操作说明书

  我司ELISA试剂盒现货供应，质量保证，价格优惠，试剂盒森贝伽。本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，细胞上清及相关液体样本中人异常凝血酶原(APT)的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人异常凝血酶原(APT)水平。用纯化的人异常凝血酶原(APT)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入异常凝血酶原(APT)，再与HRP标记的异常凝血酶原(APT)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的异常凝血酶原(APT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人异常凝血酶原(APT)含量。试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：36ng/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为24ng/ml，16ng/ml，8ng/ml，4ng/ml，2ng/ml）。加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。温育：操作同3。洗涤：操作同5。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项：试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。（此图仅供参考）试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围：1ng/ml-30ng/ml保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-11-07 14:16

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• 人异常凝血酶原（APT）ELISA试剂盒使用说明书

  人异常凝血酶原(APT)ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，细胞上清及相关液体样本中异常凝血酶原(APT)的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人异常凝血酶原(APT)水平。用纯化的人异常凝血酶原(APT)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入异常凝血酶原(APT)，再与HRP标记的异常凝血酶原(APT)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的异常凝血酶原(APT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人异常凝血酶原(APT)含量。试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：36ng/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为24ng/ml，16ng/ml，8ng/ml，4ng/ml，2ng/ml）。加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。温育：操作同3。洗涤：操作同5。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项：试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。（此图仅供参考）试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围：1ng/ml-30ng/ml保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-11-07 14:16

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• 常见异常处理

  常见异常处理[详细]

  2024-09-28 17:16

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• PH电极过期怎么办

  PH电极过期怎么办[详细]

  2013-11-25 00:00

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• BALLUFF巴鲁夫压力传感器电路板输出异常分析

  BALLUFF巴鲁夫压力传感器电路板输出异常分析其实我司代理的BALLUFF压力传感器广泛应用于汽车，机械，航空，工业自动化等领域.德国巴鲁夫压力传感器分为电压输出型与电流输出型，不同的巴鲁夫传感器应用环境与输出精度不一样,基本的结构组成部分为压力敏感模块，温度补偿及信号转换模块,信号输出模块。BALLUFF压力传感器绝缘测试的参数是(500V,>100MΩ,8S),设备产生的高强度电磁场在邻近元件中感应产生静电荷,芯片LT1491对静电非常敏感,由于静电放电导致芯片内部击穿的可能性非常大。如果有条件的话，巴鲁夫压力传感器可以采用较为先进的探测设备或解剖芯片在高倍显微镜下观察以便进一步的验证推断。巴鲁夫压力传感器电路板输出异常分析BALLUFF压力传感器解决方案在生产过程中，员工佩带防静电的手套操作预防ESD，对由于绝缘测试高压产生的ESD则可以从绝缘测试的参数设置或是电路板布线更改方面进行改善PTX产线有一传感器在进行Z后的功能测试时，发生零满输出一致的问题,即零压力与满压力下的电信号电信号读数一致。巴鲁夫压力传感器现从功能测试失效这一工序用PDT(ProblemDefinitionTree)展开，逐步探究问题的根源。德国BALLUFF压力传感器BSP适合对气态及液态介质进行压力测量。它们在工厂自动化设备中用途广泛。使用这种巴鲁夫传感器后，不论标准用途还是要求严苛的应用条件都能轻松满足。此外，它们还以的用户界面友好度及zhuo越的性价比而。针对高端用途的巴鲁夫压力传感器专为更高温度范围要求严苛的应用环境而设计。因此，BALLUFF高端压力传感器即使在极其恶劣的环境中也能自如使用。其紧凑式壳体完全由坚固的不锈钢制成。参数设置符合VDMA标准，十分简捷。BALLUFF压力传感器测量系统分析：零满一致的测试不良品输出38MA与正常品4MA/20MA，存在着显著差异,所以判断测试系统是正常的。制程分析巴鲁夫压力传感器将38MA输出的传感器车床还原成Z初的三部分,对照原理图，测量每一部分的输入与输出，与理论值做比较。其中在V-I模块测量时发现了异常。取两38MA异常输出的PCB测量关键点的电压数据与原理图理论值对比如下。当电路的正负电源接入相对同一参考点等值的电压后,集成运放中的每一点的对地电压都是相等的,也即模块中任意两点之间的压差为零。整个内部电路模块类似于一个“等势体"。巴鲁夫压力传感器从电气连接图以及绝缘测试原理可以推知,并不能测出电路模块内部的连接是否短路等。巴鲁夫压力传感器电路板输出异常分析[详细]

  2018-09-07 10:00

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• TMA数据异常检查

  TMA数据异常检查[详细]

  2014-11-18 00:00

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• 高低温试验箱制冷剂泄漏怎么办

  高低温试验箱制冷剂泄漏怎么办[详细]

  2014-10-30 00:00

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• Rexroth电磁阀不动作怎么办?

  力士乐Rexroth电磁阀它由阀体、阀罩、电磁组件、弹簧及密封结构等部件组成，动铁芯底部的密封块借助弹簧的压力将阀体进气口关闭。通电后，电磁铁吸合，动铁芯上部带弹簧的密封块把排气口关闭，气流从进气口进入膜头，起到控制作用。当失电时，电磁力消失，动铁芯在弹簧力作用下离开固定铁芯，向下移动，将排气口打开，堵住进气口，膜头气流经排气口排出，膜片恢复原来位置。在我们的制氧设备中，在透平膨胀机进口薄膜调节阀的紧急切断等处有应用。Rexroth四通Rexroth电磁阀在我们的生产中应用也很多，其工作原理如下：当有电流通过线圈时，产生励磁作用，固定铁芯吸合动铁芯，动铁芯带动滑阀芯并压缩弹簧，改变了滑阀芯的位置，从而改变了流体的方向。当线圈失电时，依靠弹簧的弹力推动滑阀芯，顶回动铁芯，使流体按原来的方向流动。在我们制氧生产中，分子筛切换系统强制阀的开关就是通过二位四通Rexroth电磁阀来控制的，气流分别供至强制阀的活塞两端。从而来控制强制阀的启闭。德国Rexroth电磁阀的故障将直接影响到切换阀和调节阀的动作，常见的故障有Rexroth电磁阀不动作，应从以下几方面排查：（1）Rexroth电磁阀接线头松动或线头脱落，Rexroth电磁阀不得电，可紧固线头。（2）Rexroth电磁阀线圈烧坏，可拆下Rexroth电磁阀的接线，用万用表测量，如果开路，则Rexroth电磁阀线圈烧坏。原因有线圈受潮，引起绝缘不好而漏磁，造成线圈内电流过大而烧毁，因此要防止雨水进入Rexroth电磁阀。此外，弹簧过硬，反作用力过大，线圈匝数太少，吸力不够也可使得线圈烧毁。紧急处理时，可将线圈上的手动按钮正常工作时的“0”位打到“1”位，使得阀打开。（3）Rexroth电磁阀卡住。Rexroth电磁阀的滑阀套与阀芯的配合间隙很小（小于0.008mm），一般都是单件装配，当有机械杂质带入或润滑油太少时，很容易卡住。处理方法可用钢丝从头部小孔捅入，使其弹回。根本的解决方法是要将Rexroth电磁阀拆下，取出阀芯及阀芯套，用CCI4清洗，使得阀芯在阀套内动作灵活。拆卸时应注意各部件的装配顺序及外部接线位置，以便重新装配及接线正确，还要检查油雾器喷油孔是否堵塞，润滑油是否足够。（4）漏气。漏气会造成空气压力不足，使得强制阀的启闭困难，原因是密封垫片损坏或滑阀磨损而造成几个空腔窜气。在处理切换系统的Rexroth电磁阀故障时，应选择适当的时机，等该Rexroth电磁阀处于失电时进行处理，若在一个切换间隙内处理不完，可将切换系统暂停，从容处理。希望以上的几点分析能对您在实际使用力士乐Rexroth电磁阀过程中会有所帮助。[详细]

  2018-10-16 10:01

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• 数显扭力测试仪死机怎么办

  数显扭力测试仪死机怎么办，估计很多扭力测试仪用户刚开始以为没电了呢，到底是什么原因造成数显扭力测试仪死机呢，其实数显扭力测试仪死机的原因有很多种，必须要通过数显扭力测试仪内部组成各部分通电检查。想了解更多数显扭力测试仪死机怎么办的用户，请点击。数显扭力测试仪图片[详细]

  2018-10-23 10:31

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• 微波沪使用10忌

  微波沪使用10忌[详细]

  2024-09-26 20:48

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