人YZ因子1（MPIF-1/CCL23）试剂盒操作说明

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• 人YZ因子1（MPIF-1/CCL23）试剂盒操作说明

  本试剂盒仅供研究使用。检测范围：96T3.5pg/ml-140pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中YZ因子1(MPIF-1/CCL23)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人YZ因子1(MPIF-1/CCL23)水平。用纯化的人YZ因子1(MPIF-1/CCL23)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入YZ因子1(MPIF-1/CCL23)，再与HRP标记的YZ因子1(MPIF-1/CCL23)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的YZ因子1(MPIF-1/CCL23)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人YZ因子1(MPIF-1/CCL23)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（240pg/ml）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1、标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。120pg/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液60pg/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液30pg/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液15pg/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液7.5pg/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2、加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3、温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4、配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6、加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7、温育：操作同3。8、洗涤：操作同5。9、显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.10、终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11、测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。[详细]

  2018-10-03 10:00

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• 人YZ因子1(MPIF-1/CCL23)检测试剂盒

  人YZ因子1(MPIF-1/CCL23)检测试剂盒[详细]

  2015-03-17 00:00

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• 人YZ因子1(MPIF-1/CCL23)ELISA试剂盒

  人YZ因子1(MPIF-1/CCL23)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-28 00:34

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• 人YZ因子1（MPIF-1/CCL23）ELISA试剂盒

  人YZ因子1（MPIF-1/CCL23）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中人YZ因子1（MPIF-1/CCL23）含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人YZ因子1（MPIF-1/CCL23）水平。用纯化的人YZ因子1（MPIF-1/CCL23）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入YZ因子1（MPIF-1/CCL23），再与HRP标记的YZ因子1（MPIF-1/CCL23）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的YZ因子1（MPIF-1/CCL23）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人YZ因子1（MPIF-1/CCL23）浓度。试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。操作步骤：1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项：1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2024-09-29 03:16

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• 人分化YZ因子1（ID-1）ELISA试剂盒

  人分化YZ因子1(ID-1)ELISA试剂盒本试剂盒仅供研究使用。检测范围：96T5g/L-160g/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中分化YZ因子1(ID-1)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人分化YZ因子1(ID-1)水平。用纯化的人分化YZ因子1(ID-1)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入分化YZ因子1(ID-1)，再与HRP标记的分化YZ因子1(ID-1)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的分化YZ因子1(ID-1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人分化YZ因子1(ID-1)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（320g/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。160g/L5号标准品150l的原倍标准品加入150l标准品稀释液80g/L4号标准品150l的5号标准品加入150l标准品稀释液40g/L3号标准品150l的4号标准品加入150l标准品稀释液20g/L2号标准品150l的3号标准品加入150l标准品稀释液10g/L1号标准品150l的2号标准品加入150l标准品稀释液1.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50l，待测样品孔中先加样品稀释液40l，然后再加待测样品10l（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。加酶：每孔加入酶标试剂50l，空白孔除外。温育：操作同3。洗涤：操作同5。显色：每孔先加入显色剂A50l，再加入显色剂B50l，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.终止：每孔加终止液50l，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-11-15 10:03

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• 人基质金属蛋白酶YZ因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒

  人基质金属蛋白酶YZ因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-20 21:33

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• 现货人基质金属蛋白酶YZ因子-1

  人基质金属蛋白酶YZ因子-1本试剂盒仅供研究使用标本：血清或者血浆二、注意事项1.此试剂为体外检测试剂，效期内使用，试剂应视为传染物，不同总批号的试剂不能混用。使用前应将盒内各试剂取出。室温放置至少30分钟，浓缩洗涤液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟。浓缩样品稀释液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟若24小时内进行实验，标本可存放于2～8℃。不需及时实验，标本-20℃保存，避免反复冻融。在反复清洗微孔板，并扣干微孔中的残余液体，否则将降低极ng确度，造成吸光度偏离的假像。加样完毕后，应注意轻微摇动微孔反应条，以便使孔中的液体充分混匀。试剂盒保存于2～8℃，请勿冷冻，有效期请见盒内标示。人基质金属蛋白酶YZ因子-1三、实验前准备1．使用前应将盒内各试剂取出，室温放置至少30分钟。2．准备各种实验仪器及材料，如微量移液器，吸头，医用蒸馏水等3．浓缩洗液与医用蒸馏水119倍稀释后成为应用洗涤液4．浓缩样品稀释液与医用蒸馏水14倍稀释成应用样品稀释液5．用应用样品稀释液来稀释样品，按照1：100的体积比来稀释样品如10μl的样品加入到1ml的应用样品稀释液中，充分混匀待用。）人基质金属蛋白酶YZ因子-1四、操作步骤1．取出酶标板，设空白孔，依照次序对应分别加入100μl的标准品于空白微孔中（空白孔视为0号标准品，用医用蒸馏水替代）2、分别标记样品编号，加入100μl的稀释样品于空白微孔中（不同的样本采用不同的吸头）。3、将酶标板置于37℃温育30分钟；4、将酶标板板取出，将其中的液体甩去，每个孔中全部加满应用洗涤液后，立即甩去液体;5、每个孔中加满应用洗涤液后，轻微振摇酶标板30秒后将孔中的应用洗涤液甩去，在吸水纸上将酶标板拍干。6、重复第5个步骤5次，在吸水纸上将酶标板拍干。7、在标准品孔和样品孔中加入100μl的酶标偶合溶液。8、将96孔板置于37℃温育30分钟。9、将酶标板取出，将其中的液体甩去，每个孔中全部加满应用洗涤液后，立即甩去液体。10、每个孔中再次加满洗涤应用液后，室温轻微振摇酶标板30秒后将孔中的应用洗涤液甩去，在吸水纸上将酶标板拍干。11、重复第5个步骤5次，在吸水纸上将酶标板拍干。12、在每个孔中加入底物A50μl后立即加入底物B50μl。轻轻振荡混匀。（A液、B液采用不同的吸头加样）13、将酶标板置于37℃避光温育反应15分钟。14、每个微孔中加入50μl的终止液，轻轻振荡混匀。15、在酶标仪上，450nm处测定OD;显色后，15分钟内进行测定。16、根据制备的标准曲线，计算样本含量人基质金属蛋白酶YZ因子-1五、结果判断　1.仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值；　2、检测值范围：0-800pg/ml　3、敏感度：1.0pg/mlAKT2蛋白激酶B20.1mlAKT2蛋白激酶B20.2mlRBC（HumanRBC）mousemonoclonal人红细胞单抗0.1mlRBC（HumanRBC）mousemonoclonal人红细胞单抗0.2mlPR（Progestogeronereceptor）孕激素受体抗体0.2mlpre-Xprotein（NT）[HepatitisBvirusN-Terminus]抗乙肝病毒pre-X蛋白抗体（N端）0.2mlProfilin1前纤维蛋白1抗体0.2mlhumanFibrinogen/FITC荧光素标记人纤维蛋白原0.3mlhumanIgM/FITC荧光素标记人IgM0.3mlhumanIgA/FITC荧光素标记人IgA0.3mlMonkeyIgG/FITC荧光素标记猴IgG0.3mlMonkeyIgM/FITC荧光素标记猴IgM0.3mlMouseIgG/FITC荧光素FITC标记小鼠IgG（细胞流式同型对照）0.3mlpre-Xprotein（CT）[HepatitisBvirusC-Terminus]抗乙肝病毒pre-X蛋白抗体（C端）0.2mlProfilin2前纤维蛋白2抗体0.2mlRecombProteinG抗重组蛋白G抗体0.2mlRecombProteinA抗重组蛋白A抗体0.2mlRAM-11RAM-11抗体0.2mlRAMP-1受体活性修饰蛋白1抗体0.2mlPRMT1（proteinargininemethyltransferase1）蛋白质精氨酸甲基转移酶1抗体0.2ml[详细]

  2018-09-14 10:01

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• 人基质金属蛋白酶组织YZ因子1(TIMP-1)检测试剂盒

  人基质金属蛋白酶组织YZ因子1(TIMP-1)检测试剂盒[详细]

  2015-03-10 00:00

  标准

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• 人基质金属蛋白酶组织YZ因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒

  人基质金属蛋白酶组织YZ因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-23 22:30

  其它

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• 人基质金属蛋白酶组织YZ因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒

  人基质金属蛋白酶组织YZ因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-23 20:09

  选购指南

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• 人纤溶酶原激活物YZ因子1(PAI-1)ELISA试剂盒

  人纤溶酶原激活物YZ因子1(PAI-1)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-06 00:00

  其它

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• 人组织因子通道YZ因子(TFPI)检测试剂盒

  人组织因子通道YZ因子(TFPI)检测试剂盒[详细]

  2024-09-16 18:49

  其它

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• 人组织因子通道YZ因子(TFPI)ELISA试剂盒

  人组织因子通道YZ因子(TFPI)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-14 05:36

  安装说明

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• 人细胞凋亡YZ因子(IAP)ELISA试剂盒

  人细胞凋亡YZ因子(IAP)ELISA试剂盒[详细]

  2014-08-21 00:00

  其它

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• 人细胞凋亡YZ因子(IAP)检测试剂盒

  人细胞凋亡YZ因子(IAP)检测试剂盒[详细]

  2024-09-28 17:58

  选购指南

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• 人细胞凋亡YZ因子(IAP)ELISA试剂盒

  人细胞凋亡YZ因子(IAP)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-14 22:39

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• 人纤溶酶原激活物YZ因子1（PAI-1）试剂盒实验原理

  人纤溶酶原激活物YZ因子1（PAI-1）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒仅供研究使用，用于测定人血清，血浆及相关液体样本中纤溶酶原激活物YZ因子1（PAI-1）的含量，应用双抗体夹心法测定标本中人纤溶酶原激活物YZ物-1（PAI-1）水平。用纯化的人纤溶酶原激活物YZ物-1抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入PAI-1，再与HRP标记的PAI-1抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的纤溶酶原激活物YZ物-1呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人纤溶酶原激活物YZ物-1（PAI-1）浓度。试剂盒保存：；2-8℃。有效期：6个月注：信息仅供参考，具体产品信息以随货说明书为准上海华壹生物科技有限公司ShanghaiHuaYiBioTechnologyCo.,Ltd咨询电话：021-24209195,13661674336[详细]

  2018-11-15 10:00

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• 人纤溶酶原激活物YZ因子1(PAI-1)elisa试剂盒说明书

  人纤溶酶原激活物YZ因子1(PAI-1)elisa试剂盒说明书[详细]

  2024-10-08 05:28

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• 犬金属蛋白酶组织YZ因子-1（TIMP-1）试剂盒ELISA试剂盒

  本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。犬金属蛋白酶组织YZ因子-1（TIMP-1）定量检测试剂盒（ELISA）使用说明书【试剂盒名称】犬金属蛋白酶组织YZ因子-1（TIMP-1）定量检测试剂盒（ELISA）【试剂盒用途】定量检测犬血清、血浆及相关液体样本中金属蛋白酶组织YZ因子-1（TIMP-1）的含量。【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将标准品、待测样本加入到预先包被犬金属蛋白酶组织YZ因子-1（TIMP-1）单克隆抗体透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根过氧化物酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中犬金属蛋白酶组织YZ因子-1（TIMP-1）浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中犬金属蛋白酶组织YZ因子-1（TIMP-1）含量。【试剂盒组成】1酶标包被板12孔×8条7显色剂A液6mL2标准品0.3mL×6管8显色剂B液6mL320倍浓缩洗涤液25mL9终止液6mL4样本稀释液6mL10说明书1份5特殊稀释液6mL11封板膜2张6酶标试剂6mL12密封袋1个备注：标准品（1号→6号）浓度依次为：80、40、20、10、5、2.5μg/L.【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【操作步骤】1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、2待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先加入待测样本10μL，再加样本稀释液40μL（即样本稀释5倍）；空白对照孔不加。4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4次（也可用洗板机按说明书操作洗板）。6、加酶标工作液：每孔加入酶标工作液50μL，空白对照孔不加。7、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。8、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4次（也可用洗板机按说明书操作洗板）。9、显色：每孔先加入显色剂A液50μL，再加入显色剂B液50μL，平板混匀器混匀30s（或用手轻轻震荡混匀30s），37℃避光显色15min。10、终止：取出酶标板，每孔加终止液50μL，终止反应（颜色由蓝色立转黄色）。11、测定：以空白孔调零，在终止后15分钟内，用450nm波长测量各孔的吸光值（OD值）。12、计算：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。Z终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。【样本要求】1、样本不能含叠氮钠（NaN3），因为叠氮钠（NaN3）是辣根过氧化物酶（HRP）的YZ剂。2、标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能立即试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。【注意事项】1、实验严格按照说明书的操作进行，实验结果判定必须以酶标仪读数为准。2、酶标包被板开封后如未用完，应立即装入密封袋中加干燥剂保存。3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。4、牢记样本已经稀释5倍，计算结果乘以5才是样本实际浓度。5、本试剂盒定量范围为2.5-80μg/L，超过此范围，为标准曲线延伸计算所得，不做为准确定量结果，请用特殊稀释液稀释后测定准确结果（2.5-80μg/L范围内），乘以总稀释倍数即为样本Z终浓度。6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。7、为避免交叉污染，标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头；酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分，要悬臂加样，不得碰到微孔；不得重复使用封板膜。8、试剂盒保质期内使用，不同批号的试剂不得混用。9、底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。3【操作程序总结】准备试剂，样品和标准品加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟洗板4次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟洗板4次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟加入终止液15分钟之内读OD值计算【检测范围】2.5μg/L80μg/L【规格】96人份/盒【贮藏】2-8℃，避光防潮保存。【有效期】6个月[详细]

  2018-09-03 10:00

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• 大鼠基质金属蛋白酶YZ因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒

  大鼠基质金属蛋白酶YZ因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-11 00:00

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