全组织神经元高尔基法染色试剂盒

本文由 上海科学仪器有限公司 整理汇编

2018-11-18 10:00 876阅读次数

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• 全组织神经元高尔基法染色试剂盒

  主要用途全组织神经元高尔基法染色试剂是一种旨在使用亲银还原技术，分析新鲜组织块里神经元（neuron）、锥体细胞（pyramidalcell）、胶质细胞（gliacell）、少突触胶质细胞（oligodendrocyte）和其它突起（process）尤其树突（dendrites）形态学的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良传统方法、成功实验证明的。主要适用于各种新鲜或冰冻脑组织的相关神经细胞检测。广泛用于动物脑神经病理生理解剖学的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，显色清晰。技术背景意大利科学家高尔基（CamilloGolgi）于1873年发明了神经细胞黑色反应的浸银染色技术，从而开辟了神经系统形态结构、演变、单系发生、构建以及疾病等学科研究，并建立了神经学说。脑神经组织经固定，亲银染色后，呈现部分神经细胞完全染色，而其它神经细胞没有任何着色的高度选择性染色。[详细]

  2018-11-18 10:00

  产品样册

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• 全组织神经元高尔基法染色试剂盒产品说明书（中文版）

  全组织神经元高尔基法染色试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2015-03-30 00:00

  标准

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• 冰冻切片神经元高尔基法快速染色试剂盒

  主要用途冰冻切片神经元高尔基法快速染色试剂是一种旨在使用亲银还原技术，分析固定处理的冰冻组织切片中神经元（neuron）、锥体细胞（pyramidalcell）、胶质细胞（gliacell）、少突触胶质细胞（oligodendrocyte）和其它突起（process）尤其树突（dendrites）形态学的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良Golgi-Cox方法、成功实验证明的。主要适用于冰冻脑组织或外周神经组织切片的相关神经细胞检测。广泛用于动物脑神经病理生理解剖学的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，显色清晰。技术背景意大利科学家高尔基（CamilloGolgi）于1873年发明了神经细胞黑色反应的浸银染色技术，从而开辟了神经系统形态结构、演变、单系发生、构建以及疾病等学科研究，并建立了神经学说。脑神经组织经固定，亲银染色后，呈现部分神经细胞完全染色，而其它神经细胞没有任何着色的高度选择性染色。[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 冰冻切片神经元高尔基法快速染色试剂盒产品说明书（中文版）

  冰冻切片神经元高尔基法快速染色试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2015-03-30 00:00

  应用文章

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• 冰冻切片组织碱性磷酸酶活性染色试剂盒产品说明书

  主要用途冰冻切片组织碱性磷酸酶活性染色试剂是一种旨在使用偶联偶氮技术，在底物存在的情况下，分析组织样本中碱性磷酸酶表达，而呈现亮红色沉淀现象的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良、成功实验证明的。主要适用于动物组织冰冻切片，同时也适合原生代或培养细胞的酶活性检测。尤其可用于骨组织病理生理的研究和干细胞分化能力的鉴定。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，灵敏牢固，显色清晰。技术背景碱性磷酸酶（ALKALINEPHOSPHATASE）在碱性环境下催化各种醇和酚的磷酸酯水解，存在于活跃运输的膜上，如毛细血管及毛细血管的动脉部分的内皮，肾近曲小管壁边缘和小肠上皮的纹状缘，胎盘组织，未分化的干细胞等表达含量Z为丰富。它与骨质的形成，维持细胞内磷酸酶的浓度，以及与经膜吸收和转运过程有关。偶联偶氮技术的基本原理为碱性磷酸酶水解底物（磷酸萘酯）释放出萘酚，立即为重氮盐所捕获而成为不溶性有色的偶氮染料。实验Z初（1944）应用β-萘磷酸盐作为底物，释放出的萘酚与重氮α-萘胺偶联，在酶的活动处形成有色沉淀。Burstone（1962）推荐使用替代萘酚，如萘酚AS-MX磷酸盐。重氮盐有很多种，但较适宜的有FastblueRR，FastredTR，FastvioletB，FastblueVRT和FastblackB。偶联偶氮技术孵育时间短；稳定，灵敏；在正常组织中因无萘酚，故不需要对照；反应产物为偶氮染料难以溶解，不易弥散因而图象清晰。[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 石蜡切片组织冯库萨染色试剂盒产品说明书

  主要用途石蜡切片组织冯库萨（VONKOSSA）染色试剂是一种旨在使用标准化的化学分离石蜡方法和银还原技术，分析存档中的石蜡包埋的组织切片中钙沉积现象的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心改良VONKOSSA方法、成功实验证明的。主要适用于石蜡包埋组织切片的钙沉积和钙化结节检测。广泛用于骨细胞或组织病理生理的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，显色清晰。技术背景钙盐变化是骨细胞增殖分化和骨组织成骨潜能的标志之一。通过嗜银染色，钙离子受到强光还原，由金属银沉积取代，呈现黑色。[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 石蜡切片组织冯库萨染色试剂盒产品说明书（中文版）

  石蜡切片组织冯库萨染色试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2015-04-29 00:00

  实验操作

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• 人高尔基蛋白73ELISA试剂盒说明

  人高尔基蛋白73ELISA试剂盒说明[详细]

  2015-02-28 00:00

  实验操作

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• 冻切片神经组织金属锌改良蒂姆（Neo-TIMM）染色试剂盒

  主要用途冰冻切片神经组织金属锌改良蒂姆（Neo-TIMM）染色试剂是一种旨在使用新型蒂姆硫化法银染技术，分析存档中的冰冻组织切片里神经系统中含锌神经细胞结构分布的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良蒂姆（Timm）方法、成功实验证明的。主要适用于冰冻脑组织（海马齿状回门区hilusofdentategyrus、安蒙氏角cornuammonis、大脑皮层、丘脑、杏仁核amygdalanuclei或外周神经组织切片，例如海马（hippocampus）中苔藓纤维区（mossyfiberregion）和齿状分子层（dentatemolecularlayer）等含锌神经细胞体，例如锥体细胞（pyramidalcells）、齿状颗粒细胞（dentategranulecells）等检测。广泛用于脑神经病理生理，尤其是退行性神经病变包括癫痫、自闭症、精神分裂症、脑损伤、脑缺血等疾病的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，显色清晰。技术背景蒂姆硫化法银染（Timm’ssulfidesilverstaining）是由蒂姆建立的用于观察脑组织和其它组织中（例如、小肠、睾丸、肾脏等）微量金属元素锌，以及其它重金属元素，例如铜、镍、钴和铁等的染色技术。主要用于观察神经系统中含锌神经元，以及新轴突分枝（sproutedaxon）和轴突终端（axonterminal）等结构，分析大脑灰质内部的海马中轴突终端（突触泡囊synapticvesicle）、苔藓终端（齿状颗粒细胞dentategranulecells）中的反应性锌的分布，与突触活性和膜去极化的关系，研究神经退行性和癫痫病理性变化机制。其原理在于使用硫化物，与组织中的游离金属元素反应成为不溶性复合物沉积，进而在还原剂的作用下，金属硫化物催化还原离子银为可见金属银沉积，呈现黑色，此为金属自显影术（autometallography，AMG）。新型蒂姆硫化法银染技术（neo-TIMM）具有显示（visualization）改善的优点。[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 人高尔基蛋白-73（GP73）试剂盒使用方法

  检测范围：96T2.5ng/mL-80ng/mL使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中高尔基蛋白-73（GP73）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人高尔基蛋白-73（GP73）水平。用纯化的人高尔基蛋白-73（GP73）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入高尔基蛋白-73（GP73），再与HRP标记的高尔基蛋白-73（GP73）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的高尔基蛋白-73（GP73）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人高尔基蛋白-73（GP73）浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（160ng/mL）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个[详细]

  2024-09-30 08:18

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• 免疫组化染色试剂盒说明书

  免疫组化染色试剂盒说明书[详细]

  2014-06-23 00:00

  课件

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• 细胞三磷酸腺苷酶活性碱性法染色试剂盒

  主要用途细胞三磷酸腺苷酶（ATP酶）活性碱性法染色试剂是一种旨在使用钙激活技术，在碱性条件下，由三磷酸腺苷酶催化水解产生的磷酸与钙离子结合，经过氯化钴的替换，Z后在硫化铵存在的情况下，呈现细胞样本中酶活性部位的棕黑色沉淀现象的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良、成功实验证明的。主要适用于各种动物和人体细胞ATP酶的活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，灵敏牢固，显色清晰。技术背景三磷酸腺苷酶或ATP酶（adenosinetriphosphatase；ATPase）可催化ATP水解生成ADP及无机磷的反应，这一反应放出大量能量，用于运送离子进出细胞，同时供给生物体进行需能生命过程。它存在于生物细胞的多个部位，比如细胞质膜上和叶绿体类囊体膜上等，对整个生命的维持有着重要的作用。膜结合ATP酶存在多种形式：钠钾ATP酶、胞膜钙泵ATP酶（plasmamembranecalciumATPase；PMCA）或肌质网/内质网钙泵ATP酶（sarcoplasmicorendoplasmicreticulumcalciumATPases；SERCA）、氢钾ATP酶（hydrogen/potassiumATPase）或胃质子泵（gastricprotonpump）等。[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 猪高尔基蛋白73(GP-73)ELISA检测试剂盒

  猪高尔基蛋白73(GP-73)ELISA检测试剂盒[详细]

  2015-08-28 00:00

  实验操作

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• 细胞基质金属蛋白酶原位明胶酶谱法荧光染色试剂盒

  主要用途细胞基质金属蛋白酶（MMP）原位明胶酶谱法（insituzymography）荧光染色试剂是一种旨在通过异硫氰酸荧光素标记的明胶作为底物，针对未固定处理的细胞样品予以染色处理，基质金属蛋白酶切离底物产生高度绿色荧光，来定位细胞中的基质金属蛋白酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种动物细胞基质金属蛋白酶-2和9的分析。产品即到即用，性能稳定，操作便捷，敏感度高，荧光清晰，重复性好。技术背景基质金属蛋白酶（Matrixmetalloproteinases；MMPs）是一类结构高度同源的分泌型或膜相关性锌内肽酶的总称，因含有金属（锌、钙）离子而得名。迄今为止发现的MMPs至少有28种，几乎能降解除多糖以外的全部细胞外基质（extracellularmatrix）成分，同时参与胚胎发育、形态形成、胚泡植入（blastocyst）、血管形成、组织再吸收（tissueresorption）、疾病发生，例如关节炎、癌细胞浸入转移等。根据降解的底物不同可将MMPs分为4大类：（1）胶原酶：MMP1、MMP8、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型胶原和蛋白多糖；（2）明胶酶（Ⅳ型胶原酶）：MMP2、MMP9，又称明胶酶A、B，主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型胶原和弹性纤维；（3）基质溶解素：MMP3、MMP7、MMP16、MMP11，主要作用于纤维粘连蛋白、层粘连蛋白、弹力纤维、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ胶原及MMP1、MMP8、MMP9；（4）膜型金属蛋白酶：MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP，主要作用于明胶、Ⅳ型胶原、MMP2。体内绝大多数细胞并不储备MMPs，当需要MMPs的信号传递到细胞后才临时合成，合成的MMPs以无活性的酶原（proenzyme）形式分泌到细胞外，随后被多种蛋白酶和非蛋白酶水解以及热处理激活，一种激活的MMPs可激活另一种MMPs，形成瀑布效应。原位明胶酶谱法荧光染色（in-situfluorescencezymography）技术在于提高基质金属蛋白酶检测的敏感性，使用异硫氰酸荧光素（FITC）标记的明胶作为底物，经过基质金属蛋白酶水解后产生荧光多肽，据此在荧光显微镜下检测酶的活性和位置。[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 酸性磷酸酶染色液（硝酸铅法）操作步骤

  酸性磷酸酶染色液（硝酸铅法）操作步骤[详细]

  2024-09-20 14:06

  报价单

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• DAB染色试剂盒使用说明书

  DAB染色试剂盒使用说明书[详细]

  2015-04-21 00:00

  其它

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• 革兰氏染色液试剂盒使用说明

  革兰氏染色液试剂盒使用说明[详细]

  2024-10-03 05:37

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• 特价销售人高尔基蛋白73ELISA检测试剂盒说明书

  本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆试验原理：GP-73试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知GP-73浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将GP-73和生物素标记的抗体同时温育。人高尔基蛋白73ELISA检测试剂盒洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中GP-73的浓度呈比例关系。自备材料1．蒸馏水。2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3．振荡器及磁力搅拌器等。安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。3．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。人高尔基蛋白73ELISA检测试剂盒使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。9．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。2．洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。操作步骤1．使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。2．根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。3．加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。4．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。5．每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。6．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。8．取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。9．在450nm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性：不与其它细胞因子反应。3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），人高尔基蛋白73ELISA检测试剂盒相应的GP-73标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的GP-73含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-400nmol/L4、敏感度：1.0nmol/LRC082-100ugRecombinantHumanParathyroidHormone1-34(rHuPTH1-34)重组激素100ugRC083-100ugRecombinantHumanParathyroidHormone7-34(rHuPTH7-34)重组激素100ugRC084-100ugRecombinantHumanParathyroidHormone1-84(rHuPTH1-84)重组激素100ugRC085-5ugRecombinantMurineGM-CSF重组鼠粒-巨噬细胞集落刺激因子5ugCLS1077-200ml细胞分离液1.077200mlCLS1077-1-200ml细胞分离液1.077(FICOLL配置)200mlCLS1083-200ml细胞分离液1.083200ml[详细]

  2018-09-27 10:00

  产品样册

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• 人高尔基蛋白-73（GP73）酶联免疫分析试剂盒使用方法

  检测范围：96T2.5ng/mL-80ng/mL使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中高尔基蛋白-73（GP73）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人高尔基蛋白-73（GP73）水平。用纯化的人高尔基蛋白-73（GP73）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入高尔基蛋白-73（GP73），再与HRP标记的高尔基蛋白-73（GP73）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的高尔基蛋白-73（GP73）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人高尔基蛋白-73（GP73）浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（160ng/mL）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。80ng/mL5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液40ng/mL4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液20ng/mL3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液10ng/mL2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液5ng/mL1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。温育：操作同3。洗涤：操作同5。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-10-08 10:01

  产品样册

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• 人高尔基蛋白73（GP-73）ELISA试剂盒使用说明书

  本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中人高尔基蛋白73(GP-73)的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人高尔基蛋白73(GP-73)水平。用纯化的人高尔基蛋白73(GP-73)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入高尔基蛋白73(GP-73)，再与HRP标记的高尔基蛋白73(GP-73)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的高尔基蛋白73(GP-73)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人高尔基蛋白73(GP-73)含量。试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：1800ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为1200ng/L，800ng/L，400ng/L，200ng/L，100ng/L）。加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。温育：操作同3。洗涤：操作同5。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项：试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。（此图仅供参考）试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。2.批内与批间应分别小于9%和11%检测范围：50ng/L-1500ng/L保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-11-07 14:16

  产品样册

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