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ELISA试剂盒质量平衡及试验规范
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本文由 上海盈公生物技术有限公司 整理汇编
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在ELISA试剂盒中通常有3次加样步聚,即加标本,加酶联络物,加底物。加样时应将所加物加在ELISA试剂盒板孔的底部,避免加在孔壁上部,并留心不可溅起,不可发生气泡。加标本通常用微量加样器,按规矩的量参与板孔中。每次加标本应更换吸嘴,避免发生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加样。有此测定(如间接法ELISA)需用稀释的血清,可在试管中按规矩的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中参与稀释液,再在其间参与血清标本,然后在微型轰动器上轰动1分钟以确保混和。加酶联络物使用液和底物使用液时可用定量多道加液器,使加液进程灵敏结束。在ELISA试剂盒中通常有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶联络物后。抗原抗体反应的结束需要有一定的温度和时间,这一保温进程称为温育(incubation),有人称之为孵育,在ELISA查看试剂盒中似不恰当。ELISA试剂盒属固相免疫测定,抗原、抗体的联络只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例,参与板孔中的标本,其间的抗原并不是都有对等的和固相抗联络的机遇,只需Z靠近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐,因此需经分散才能到达反应的结束。在这以后参与的酶符号抗体与固相抗原的联络也相同如此。这便是为何ELISA查看试剂盒反应老是需要一定时间的温育。温育常选用的温度有43℃、37℃、室温文4℃(冰箱温度)等。37℃是试验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体联络的适合温度。在树立ELISA方法作反应动力学研究时,试验标明,两次抗原抗体反应通常在37℃经1-2小时,产物的生成可达顶峰。为加速反应,可提高反应的温度,有些试验在43℃进行,但不宜选用更高的温度。抗原抗体反应4℃更为彻底,在放射免疫测定中多使反应在冰箱中,以形成Z多的堆积。但因所需时间太长,在ELISA试剂盒中通常不予选用。ELISA试剂盒的质量凹凸要素取决于这两个方面1.选材目标。2.选材进程。胎牛血清用于选材的胎牛应健康无病并且在指定的出生天数以内,选材进程应严峻按照操作规程实行,制备出的血清要经过严峻的质量判定。分外恳求有:a.要经过滤膜过滤CJ,确保无菌;b.证明所用血清中不含对所出产疫苗病毒的按捺物;c.无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染,有些国家恳求无细菌噬菌体污染;d.对细胞有出色的支持繁衍作用;e.有必要来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具有恰当的监测系统。
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ELISA试剂盒质量平衡及试验规范
- 在ELISA试剂盒中通常有3次加样步聚,即加标本,加酶联络物,加底物。加样时应将所加物加在ELISA试剂盒板孔的底部,避免加在孔壁上部,并留心不可溅起,不可发生气泡。加标本通常用微量加样器,按规矩的量参与板孔中。每次加标本应更换吸嘴,避免发生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加样。有此测定(如间接法ELISA)需用稀释的血清,可在试管中按规矩的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中参与稀释液,再在其间参与血清标本,然后在微型轰动器上轰动1分钟以确保混和。加酶联络物使用液和底物使用液时可用定量多道加液器,使加液进程灵敏结束。在ELISA试剂盒中通常有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶联络物后。抗原抗体反应的结束需要有一定的温度和时间,这一保温进程称为温育(incubation),有人称之为孵育,在ELISA查看试剂盒中似不恰当。ELISA试剂盒属固相免疫测定,抗原、抗体的联络只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例,参与板孔中的标本,其间的抗原并不是都有对等的和固相抗联络的机遇,只需Z靠近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐,因此需经分散才能到达反应的结束。在这以后参与的酶符号抗体与固相抗原的联络也相同如此。这便是为何ELISA查看试剂盒反应老是需要一定时间的温育。温育常选用的温度有43℃、37℃、室温文4℃(冰箱温度)等。37℃是试验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体联络的适合温度。在树立ELISA方法作反应动力学研究时,试验标明,两次抗原抗体反应通常在37℃经1-2小时,产物的生成可达顶峰。为加速反应,可提高反应的温度,有些试验在43℃进行,但不宜选用更高的温度。抗原抗体反应4℃更为彻底,在放射免疫测定中多使反应在冰箱中,以形成Z多的堆积。但因所需时间太长,在ELISA试剂盒中通常不予选用。ELISA试剂盒的质量凹凸要素取决于这两个方面1.选材目标。2.选材进程。胎牛血清用于选材的胎牛应健康无病并且在指定的出生天数以内,选材进程应严峻按照操作规程实行,制备出的血清要经过严峻的质量判定。分外恳求有:a.要经过滤膜过滤CJ,确保无菌;b.证明所用血清中不含对所出产疫苗病毒的按捺物;c.无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染,有些国家恳求无细菌噬菌体污染;d.对细胞有出色的支持繁衍作用;e.有必要来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具有恰当的监测系统。[详细]
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首先,准备工作很重要。检查测试仪器是否处于正常工作状态,并确认所有所需的测试装置和线缆连接正确无误。在进行任何测试前,请参考设备使用手册并熟悉设备规格和特性。
其次,准备测试样品。根据测试要求选择与样品相应的试验夹具,并将待测试的设备放置在夹具上,使其与测试仪器的电极良好接触。
第三,设置试验仪器的参数。根据测试要求,确定所需的电流强度和测试时间,并确保设备能够承受该电流强度。此外,还需要根据测试标准和要求,设置测试电压和测试电流的范围。
在所有参数设置完成后,开始测试。启动测试仪器并逐步增加测试电压,直到达到规定的测试电压水平。测试过程中需要严格按照测试时间和电流强度进行记录,在测试结束时停止测试并将测试结果记录在测试报告中。
进行完一次测试后,需要清洗实验室和测试设备。在清理测试设备时,要特别注意防止接触点和电子元件受到损坏或污染。[详细]
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- YPS药品强光稳定性验箱采用Zxin的结构设计,选用原装进口优质部件,适合长期连续运行,性能稳定可靠,适合GMP认证的用户。1、采用Zxin的结构设计,箱体内不同位置的温度和照度均匀性好; 2、变频控制,照度可调;3、YPS药品强光稳定性验箱带照度计,可检测;4、带压缩机制冷系统;5、带近紫外控制系统;6、TPS带数据记录系统.YPS药品强光稳定性验箱技术参数:名称药品强光稳定性试验箱(GMP2015)药品强光稳定性试验箱(GMP2015,ICHQ1B) 型号YP-150PSYP-250PSYP-150TPSYP-250TPS 控温范围15~35℃15~35℃15~60℃15~60℃ 控温波动±1.0℃±1.0℃±1.0℃±1.0℃ 温度偏差±2.0℃±2.0℃±2.0℃±2.0℃ 光照范围0~8000LUX0~8000LUX0~10000LUX0~10000LUX 光源种类可见光和近紫外320~400nm 光源控制双变频独立控制可见光和近紫外 照度测量选配照度检测装置标配照度检测装置 数据记录N/AN/A打印日期,温度,光照度,紫外辐照度 温控制方式平衡调温方式平衡调温方式平衡调温方式平衡调温方式 制冷系统进口全封闭压缩机进口全封闭压缩机进口全封闭压缩机进口全封闭压缩机 控制器专用控制器专用控制器专用控制器专用控制器 二重保护N/AN/A独立超温保护系统独立超温保护系统 工作环境温度+5~35℃ 内胆材质镜面不锈钢304 外壳材质钢板喷塑 电源AC220V±10%50HZ 安全装置超温保护、压缩机超压过载保护 Zda功率(kW)0.51.00.51.0 内部尺寸(mm) W×D×H650×500×500600×500×830650×500×500600×500×830 外形尺寸(mm) W×D×H670×700×800760×870×1650670×700×800760×870×1650 搁板(标配)1212 备注双层光照系统,独立控制系统双层光照系统,独立控制系统和独立记录系统[详细]
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