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小鼠白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒
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本文由 上海信裕生物科技有限公司 整理汇编
2013-11-15 00:00 78阅读次数
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小鼠白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒
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小鼠白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒
- 小鼠白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒[详细]
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2013-11-15 00:00
标准
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小鼠白介素2受体(IL-2R)检测试剂盒
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2015-07-31 00:00
安装说明
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大鼠白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒
- 大鼠白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-09 00:00
专利
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人白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒
- 人白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-05 00:00
选购指南
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人白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒
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2024-09-20 13:34
其它
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人白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒
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2024-09-30 08:11
标准
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IL-2R,人白介素2受体ELISA试剂盒技术指导
- IL-2R,人白介素2受体ELISA试剂盒技术指导l本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人白介素2受体(IL-2R)的含量。l有效期:6个月l保存条件:2-8℃l本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断实验原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人白介素2受体(IL-2R)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的人白介素2受体(IL-2R)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。样本处理及要求1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8°C1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。3.组织匀浆:用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶YZ剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。Z后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。4.细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。注:标本溶血会影响Z后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。标本处理1.本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。2.实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。3.若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。4.使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。5.若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。6.某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。7.建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。需要而未提供的试剂和器材酶标仪(450nm)高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒温箱蒸馏水或去离子水注意事项严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。在储存和温育时避免强光直接照射。平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。不能使用过期产品。如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。试剂准备试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。实验结果计算以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。试剂盒性能1.检测范围:25pg/mL800pg/mL。2.灵敏度:Zdi检测浓度小于1.0pg/mL。3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.重复性:板内变异系数小于10%,板间变异系数小于15%。说明1.由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析,本产品可能存在一定的质量技术风险。2.Z终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关,请务必准备充足的标本备份。3.不同批次的同一产品可能会有少许差别,如:检测限、灵敏度以及显色时间等,请依据试剂盒内说明书进行实验操作,网站电子版说明书仅作参考。4.只有全部使用本试剂盒配套试剂才能保证检测效果,不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守本试剂盒的实验说明才会得到**的检测结果。[详细]
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2018-12-06 10:00
产品样册
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人白介素2受体(IL-2R)检测试剂盒
- 人白介素2受体(IL-2R)检测试剂盒[详细]
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2015-03-06 00:00
课件
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人白介素2受体(IL-2R)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒
- 人白介素2受体(IL-2R)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中白介素2受体(IL-2R)的活性。上海乔羽生物科技有限公司ELISA试剂盒说明书关键词:ELISA试剂盒说明书、酶联免疫试剂盒、分析检测试剂盒实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白介素2受体(IL-2R)水平。用纯化的人白介素2受体(IL-2R)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人白介素2受体(IL-2R),再与HRP标记的白介素2受体(IL-2R)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的白介素2受体(IL-2R)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人白介素2受体(IL-2R)浓度。[详细]
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2018-11-09 10:00
产品样册
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人白介素2受体(IL-2R)elisa实验操作说明
- 人白介素2受体(IL-2R)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆、组织等样本中白介素2受体(IL-2R)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白介素2受体(IL-2R)水平。用纯化的人白介素2受体(IL-2R)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人白介素2受体(IL-2R),再与HRP标记的人白介素2受体(IL-2R)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的人白介素2受体(IL-2R)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人白介素2受体(IL-2R)含量。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片2片密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品0.3ml×6管0.3ml×6管2-8℃保存酶标试剂5ml×1瓶10ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存20×浓缩洗涤液15ml×1瓶25ml×1瓶2-8℃保存注:标准品浓度依次为:800、400、200、100、50、0ng/L.样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;。加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。(此图仅供参考)试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围:25ng/L-800ng/L保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月HumanInterleukin-2receptorFORRESEARCHUSEONLYDrugNamesGenericName:HumanInterleukin-2receptor(IL-2R)ELISAKit.PurposeThiskitallowsforthedeterminationofIL-2RconcentrationsinHumanserum,bloodplasma,andotherbiologicalfluids.PrincipleoftheassayThekitassayHumanIL-2Rlevelinthesample,usePurifiedHumanIL-2Rantibodytocoatmicrotiterplatewells,makesolid-phaseantibody,thenaddIL-2Rtowells,CombinedIL-2RantibodywhichWithHRPlabeled,becomeantibody-antigen-enzyme-antibodycomplex,afterwashingCompletely,AddTMBsubstratesolution,TMBsubstratebecomesbluecolorAtHRPenzyme-catalyzed,reactionisterminatedbytheadditionofasulphuricacidsolutionandthecolorchangeismeasuredspectrophotometricallyatawavelengthof450nm.TheconcentrationofIL-2RinthesamplesisthendeterminedbycomparingtheO.D.ofthesamplestothestandardcurve.MaterialsprovidedwiththekitMaterialsprovidedwiththekit48determinations96determinationsStorageUsermanual11Closureplatemembrane22Sealedbags11Microelisastripplate112-8℃Standard0.3ml×6bottle0.3ml×6bottle2-8℃HRP-Conjugatereagent5ml×1bottle10ml×1bottle2-8℃Samplediluent3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃ChromogenSolutionA3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃ChromogenSolutionB3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃StopSolution3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃20×Washsolution15ml×1bottle25ml×1bottle2-8℃Note:Standardconcentrationwasfollowedby:800、400、200、100、50、0ng/L.Specimenrequirementsserum-coagulationatroomtemperature10-20mins,centrifugation20-minatthespeedof2000-3000r.p.m.removesupernatant,Ifprecipitationappeared,Centrifugalagain.plasma-usesuitedEDTAorcitrateplasmaasananticoagulant,mix10-20mins,centrifugation20-minatthespeedof2000-3000r.p.m.removesupernatant,Ifprecipitationappeared,Centrifugalagain.Urine-collectsueasterilecontainer,centrifugation20-minatthespeedof2000-3000r.p.m.removesupernatant,Ifprecipitationappeared,Centrifugalagain.TheOperationofHydrothoraxandcerebrospinalfluidReferencetoit.cellculturesupernatant-detectsecretorycomponents,collectsueasterilecontainer,centrifugation20-minatthespeedof2000-3000r.p.m.removesupernatant,detectthecompositionofcells,DilutcellsuspensionwithPBS(PH7.2-7.4),Cellconcentrationreached1million/ml,repeatedfreeze-thawcycles,damagecellsandreleaseofintracellularcomponents,centrifugation20-minatthespeedof2000-3000r.p.m.removesupernatant,Ifprecipitationappeared,Centrifugalagain.Tissuesamples-Aftercuttingsamples,checktheweight,addPBS(PH7.2-7.4),Rapidlyfrozenwithliquidnitrogen,maintainsamplesat2-8℃aftermelting,addPBS(PH7.4),HomogenizedbyhandorGrinders,centrifugation20-minatthespeedof2000-3000r.p.m.removesupernatant.extractassoonaspossibleafterSpecimencollection,andaccordingtotherelevantliterature,and首ldbeexperimentassoonaspossibleaftertheextraction.Ifitcan’t,specimencanbekeptin-20℃topreserve,Avoidrepeatedfreeze-thawcycles.Can’tdetectthesamplewhichcontainNaN3,becauseNaN3inhibitsHRPactive.Assayprocedure1.Addstandard:SetStandardwells,testingsamplewells.Addstandard50μltostandardwell.2.addsample:Setblankwellsseparately(blankcomparisonwellsdon’taddsampleandHRP-Conjugatereagent,othereachstepoperationissame).testingsamplewell.addSampledilution40μltotestingsamplewell,thenaddtestingsample10μl(samplefinaldilutionis5-fold),addsampletowells,don’ttouchthewellwallasfaraspossible,andGentlymix.3.Incubate:AfterclosingplatewithClosureplatemembrane,incubatefor30minat37℃.4.Configurateliquid:30-fold(or20-fold)washsolutiondiluted30-fold(or20-fold)withdistilledwaterandreserve.5.washing:UncoverClosureplatemembrane,discardLiquid,drybyswing,addwashingbuffertoeverywell,stillfor30sthendrain,repeat5times,drybypat.6.addenzyme:AddHRP-Conjugatereagent50μltoeachwell,exceptblankwell.7.incubate:Operationwith3.8.washing:Operationwith5.9.color:AddChromogenSolutionA50ulandChromogenSolutionBtoeachwell,evadethelightpreservationfor15minat37℃10.Stopthereaction:AddStopSolution50μltoeachwell,Stopthereaction(thebluecolorchangetoyellowcolor).11.assay:takeblankwellaszero,Readabsorbanceat450nmafterAddingStopSolutionandwithin15min.ImportantnotesThekittakesoutfromtherefrigerationenvironment首ldbebalanced15-30minutesintheroomtemperature,ELISAplatescoatedifhasnotuseupafteropened,theplate首ldbestoredinSealedbag.washingbufferwillCrystallizationseparation,itcanbeheatedthewaterhelpsdissolvewhendilute.Washingdoesnotaffecttheresult.addSamplewithsamplerEachstep,Andproofreaditsaccuracyfrequently,avoidstheexperimentalerror.addsamplewithin5mins,ifthenumberofsampleismuch,recommendtouseVolley.ifthetestingmaterialcontentisexcessivelyhigher(ThesampleODisbiggerthanthefirststandardwell),pleasediluteSample(n-fold),Pleasediluenteandmultipliedbythedilutionfactor.(×n×5).Closureplatemembraneonlylimitsthedisposableuse,toavoidcross-contamination.Thesubstrateevadethelightpreservation.Pleaseaccordingtouseinstructionstrictly,Thetestresultdeterminationmusttakethemicrotiterplatereaderasastandard.Allsamples,washingbufferandeachkindofreject首ldaccordingtoinfectivematerialprocess.Donotmixreagentswiththosefromotherlots.Takethestandarddensityasthehorizontal,theODvalueforthevertical,drawthestandardcurveongraphpaper,FindoutthecorrespondingdensityaccordingtothesampleODvaluebytheSamplecurve,multipliedbythedilutionmultiple,orcalculatethestraightlineregressionequationofthestandardcurvewiththestandarddensityandtheODvalue,withthesampleODvalueintheequation,calculatethesampledensity,multipliedbythedilutionfactor,theresultisthesampleactualdensity.CalculateThischartisforreferenceonlyAssayrange25ng/L-800ng/LStorageandvalidity1.Storage:2-8℃.2.validity:sixmonths.[详细]
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2018-11-16 10:02
产品样册
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小鼠白介素2(IL-2)ELISA试剂盒
- 小鼠白介素2(IL-2)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-08 00:00
其它
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小鼠白介素2(IL-2)ELISA试剂盒
- 小鼠白介素2(IL-2)ELISA试剂盒[详细]
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2013-11-15 00:00
操作手册
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小鼠白细胞介素-2受体(IL-2R)酶联免疫分析试剂盒
- 小鼠白细胞介素-2受体(IL-2R)酶联免疫分析试剂盒[详细]
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2015-09-29 00:00
安装说明
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大鼠白介素2可溶性受体(IL-2sR)ELISA试剂盒
- 大鼠白介素2可溶性受体(IL-2sR)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-20 22:44
安装说明
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人白介素2可溶性受体链(IL-2sR )ELISA试剂盒
- 人白介素2可溶性受体链(IL-2sR )ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-28 00:04
产品样册
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大鼠白介素2可溶性受体链(IL-2sR)ELISA试剂盒
- 大鼠白介素2可溶性受体链(IL-2sR)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-30 01:24
期刊论文
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人白细胞介素2受体(IL-2R)(ELISA) 试剂盒使用说明书
- 人白细胞介素2受体(IL-2R)(ELISA) 试剂盒使用说明书[详细]
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2015-05-12 00:00
课件
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人白介素2可溶性受体链(IL-2sR/CD25)ELISA试剂盒
- 人白介素2可溶性受体链(IL-2sR/CD25)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-05 00:00
产品样册
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大鼠白介素2可溶性受体链(IL-2sR/CD25)ELISA试剂盒
- 大鼠白介素2可溶性受体链(IL-2sR/CD25)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-28 14:56
实验操作
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小鼠胰岛素受体(ISR-)ELISA试剂盒
- 小鼠胰岛素受体(ISR-)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-09 00:00
标准
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