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细胞抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性染色试剂

本文由 上海科学仪器有限公司 整理汇编

2018-11-18 10:00 735阅读次数

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主要用途细胞抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性染色试剂是一种旨在使用偶联偶氮技术,在酸性环境和酒石酸存在的情况下,呈现出紫红色沉淀现象,来分析细胞样本中酸性磷酸酶表达的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心改良、成功实验证明的。主要适用于动物原生代或培养细胞尤其是细胞和破骨细胞的酶活性检测。可用于骨质细胞病理生理的研究的鉴定。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,灵敏牢固,显色清晰。技术背景抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrateresistantacidphosphatase;TRAP)是一种在哺乳动物内表达的糖化单体金属蛋白酶,970多碱基,320多氨基酸,分子量为35kD。作为破骨细胞的标志,抗酒石酸酸性磷酸酶与破骨细胞调节的骨resorption活性和骨生成代谢有关。抗酒石酸酸性磷酸酶是以酶原形式合成,通过蛋白酶裂解和还原后活化。在酸性环境下,催化磷酸酯键的水解,产生醇和释放磷酸。其特征性为酒石酸抗性而与其它酸性磷酸酶区别。抗酒石酸酸性磷酸酶在破骨细胞(osteoclast)、活化的巨噬细胞、神经细胞以及怀孕期的猪内皮层子宫内膜(endometrium)高度表达。在网状内皮组织增殖(leukaemicreticuloendotheliosis)或毛细胞性白血病(hairycellleukaemia)、戈谢病(Gaucher’sdisease)、爱兹性脑病(HIV-inducedencephalopathy)、骨巨细胞瘤(osteoclastoma)、骨质疏松症(osteoporosis)和代谢性骨病等病人体内抗酒石酸酸性磷酸酶显著。基于底物萘酚AS-MX磷酸盐(naphtholAS-MXphosphate),在酸性环境和酒石酸(tartrate)存在的条件下,酸性磷酸酶催化其水解,释放出萘酚(naphthol-AS),进而与重氮盐耐晒红紫(Fastredviolet)偶联,于是在酶的活动处形成不溶性紫红色沉淀的偶氮染料,由此证明抗酒石酸酸性磷酸酶活性。其反应体系为:

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