资料库
昆虫脂肪酸合成酶(FAS)说明书活性
-
本文由 上海瓦兰生物科技有限公司 整理汇编
2018-09-22 10:00 467阅读次数
文档仅可预览首页内容,请下载后查看全文信息!
-
立即下载
www.biokanu.com昆虫脂肪酸合成酶(FAS)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定昆虫血清,血浆及相关液体样本中脂肪酸合成酶(FAS)的活性。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中昆虫脂肪酸合成酶(FAS)水平。用纯化的昆虫脂肪酸合成酶(FAS)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入脂肪酸合成酶(FAS),再与HRP标记的FAS抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的脂肪酸合成酶(FAS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中昆虫脂肪酸合成酶(FAS)浓度。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:72IU/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤:1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为48IU/L,32IU/L,16IU/L,8IU/L,4IU/L)。2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。(此图仅供参考)试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。2.批内与批见应分别小于9%和15%检测范围:2IU/L-50IU/L保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月
登录或新用户注册
请用手机微信扫描下方二维码
快速登录或注册新账号
微信扫码,手机电脑联动
更多资料
-
昆虫脂肪酸合成酶(FAS)说明书活性
- www.biokanu.com昆虫脂肪酸合成酶(FAS)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定昆虫血清,血浆及相关液体样本中脂肪酸合成酶(FAS)的活性。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中昆虫脂肪酸合成酶(FAS)水平。用纯化的昆虫脂肪酸合成酶(FAS)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入脂肪酸合成酶(FAS),再与HRP标记的FAS抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的脂肪酸合成酶(FAS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中昆虫脂肪酸合成酶(FAS)浓度。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:72IU/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤:1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为48IU/L,32IU/L,16IU/L,8IU/L,4IU/L)。2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。(此图仅供参考)试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。2.批内与批见应分别小于9%和15%检测范围:2IU/L-50IU/L保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
-
2018-09-22 10:00
产品样册
-
FAS,BIM大鼠脂肪酸合成酶elisa试剂盒说明书
- l本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中大鼠脂肪酸合成酶(FAS)的含量。l有效期:6个月l保存条件:2-8℃l本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断实验原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠脂肪酸合成酶(FAS)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠脂肪酸合成酶(FAS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。样本处理及要求1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8°C1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。3.组织匀浆:用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶YZ剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。Z后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。4.细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。注:标本溶血会影响Z后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。标本处理1.本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。2.实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。3.若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。4.使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。5.若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。6.某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。7.建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。需要而未提供的试剂和器材酶标仪(450nm)高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒温箱蒸馏水或去离子水试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板8孔×12条8孔×6条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无备注:1.标准品浓度依次为:16、8、4、2、1、0nmol/L2.经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过Zda标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。注意事项严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。在储存和温育时避免强光直接照射。平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。不能使用过期产品。如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。试剂准备试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。实验结果计算以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。试剂盒性能1.检测范围:0.5nmol/L16nmol/L。2.灵敏度:Zdi检测浓度小于0.1nmol/L。3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.重复性:板内变异系数小于10%,板间变异系数小于15%。说明1.由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析,本产品可能存在一定的质量技术风险。2.Z终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关,请务必准备充足的标本备份。3.不同批次的同一产品可能会有少许差别,如:检测限、灵敏度以及显色时间等,请依据试剂盒内说明书进行实验操作,网站电子版说明书仅作参考。4.只有全部使用本试剂盒配套试剂才能保证检测效果,不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守本试剂盒的实验说明才会得到**的检测结果。问题解答若实验效果不好,请及时对显色结果拍照,保留所用板条及未使用试剂,并妥善保存,然后联系我公司技术支持为您解决问题。同时您也可以参考以下资料:问题可能原因解决方案标准曲线差吸取及洗涤不充分充分的吸取及洗涤移液不极ng确检查和校正移液器精密度低洗涤不充分按说明书要求充分洗涤和浸泡混匀不充分和吸取试剂不足充分混匀和吸取试剂重复利用吸头、容器和覆膜使用加样器要更换新的吸头、使用新的容器和覆膜加样不极ng确检查和校正移液器O.D值低每孔加的试剂量不极ng确校正移液器,极ng确加入试剂温育时间不正确保证充足的温育时间温育温度不正确试剂要平衡至室温并保证准确的温育温度酶标记物或底物失效通过混合酶标记物和底物,颜色应迅速显现来检查没有加入终止液按照说明书实验操作步骤加入终止液超出读数时间读数在说明书推荐的读数时间内读数样本值不正确的样本储存方式正确储存样本,使用新鲜样本进行实验不正确的样本收集和处理方法采取正确的样本收集和处理方法待测物质在样本中含量低使用新鲜样本,重复实验[详细]
-
2024-09-29 00:35
产品样册
-
鱼脂肪酸合成酶(FAS)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
- 鱼脂肪酸合成酶(FAS)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T0.1nmol/L-8nmol/L使用目的:本试剂盒用于测定鱼血清、血浆及相关液体样本中脂肪酸合成酶(FAS)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鱼脂肪酸合成酶(FAS)水平。用纯化的鱼脂肪酸合成酶(FAS)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入脂肪酸合成酶(FAS),再与HRP标记的脂肪酸合成酶(FAS)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的脂肪酸合成酶(FAS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中鱼脂肪酸合成酶(FAS)浓度。鱼脂肪酸合成酶(FAS)酶联免疫分析试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(12nmol/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。6nmol/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液3nmol/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液1.5nmol/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液0.75nmol/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液0.375nmol/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。鱼脂肪酸合成酶(FAS)酶联免疫分析试剂盒操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。鱼脂肪酸合成酶(FAS)酶联免疫分析试剂盒保存条件及有效期1.试剂盒保存:2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
-
2018-09-14 10:00
产品样册
-
昆虫酶联免疫分析说明书
- 昆虫5羟色胺(5-HT)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定昆虫样本中5羟色胺(5-HT)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中昆虫5羟色胺(5-HT)水平。用纯化的昆虫5羟色胺(5-HT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入5羟色胺(5-HT),再与HRP标记的5羟色胺(5-HT)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的5羟色胺(5-HT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中昆虫5羟色胺(5-HT)浓度。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:90ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为60ng/L,40ng/L,20ng/L,10ng/L,5.0ng/L)。2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。(此图仅供参考)试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围:3.0ng/L-70ng/L保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
-
2018-10-23 10:31
产品样册
-
人FAS配体(Fas L)检测试剂盒
- 人FAS配体(Fas L)检测试剂盒[详细]
-
2024-09-29 08:01
安装说明
-
真菌/酵母细胞β1,3- D-葡聚糖合成酶活性定量检测试剂盒产品说明书(中文版)
- 真菌/酵母细胞β1,3- D-葡聚糖合成酶活性定量检测试剂盒产品说明书(中文版)[详细]
-
2015-04-16 00:00
其它
-
植物查尔酮合成酶(chalcone synthase)活性比色法试剂盒
- 植物查尔酮合成酶(chalconesynthase)活性比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)[详细]
-
2018-11-08 10:00
产品样册
-
大鼠一氧化氮合成酶(NOS)说明书
- [详细]
-
2018-11-16 10:02
产品样册
-
MDA,昆虫丙二醛elisa试剂盒检测说明书
- l本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中昆虫丙二醛(MDA)的含量。l有效期:6个月l保存条件:2-8℃l本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断实验原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被昆虫丙二醛(MDA)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的昆虫丙二醛(MDA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。样本处理及要求1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8°C1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。3.组织匀浆:用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶YZ剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。Z后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。4.细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。注:标本溶血会影响Z后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。标本处理1.本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。2.实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。3.若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。4.使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。5.若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。6.某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。7.建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。需要而未提供的试剂和器材酶标仪(450nm)高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒温箱蒸馏水或去离子水注意事项严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。在储存和温育时避免强光直接照射。平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。不能使用过期产品。如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。试剂准备试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。实验结果计算以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。试剂盒性能1.检测范围:0.25nmol/mL8nmol/mL。2.灵敏度:Zdi检测浓度小于0.1nmol/mL。3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.重复性:板内变异系数小于10%,板间变异系数小于15%。说明1.由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析,本产品可能存在一定的质量技术风险。2.Z终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关,请务必准备充足的标本备份。3.不同批次的同一产品可能会有少许差别,如:检测限、灵敏度以及显色时间等,请依据试剂盒内说明书进行实验操作,网站电子版说明书仅作参考。4.只有全部使用本试剂盒配套试剂才能保证检测效果,不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守本试剂盒的实验说明才会得到**的检测结果。[详细]
-
2018-11-18 10:00
产品样册
-
昆虫蜕皮激素(Ecdysone)elisa试剂盒产品说明书
- 昆虫蜕皮激素(Ecdysone)elisa试剂盒产品说明书本试剂盒仅供研究使用。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中昆虫蜕皮激素(Ecdysone)水平。用纯化的昆虫蜕皮激素(Ecdysone)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入蜕皮激素(Ecdysone),再与HRP标记的蜕皮激素(Ecdysone)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的蜕皮激素(Ecdysone)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中昆虫蜕皮激素(Ecdysone)浓度。昆虫蜕皮激素(Ecdysone)elisa试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(60ng/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。昆虫蜕皮激素(Ecdysone)elisa试剂盒操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。30ng/L5号标准品150l的原倍标准品加入150l标准品稀释液15ng/L4号标准品150l的5号标准品加入150l标准品稀释液7.5ng/L3号标准品150l的4号标准品加入150l标准品稀释液3.75ng/L2号标准品150l的3号标准品加入150l标准品稀释液1.875ng/L1号标准品150l的2号标准品加入150l标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50l,待测样品孔中先加样品稀释液40l,然后再加待测样品10l(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50l,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50l,再加入显色剂B50l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。昆虫蜕皮激素(Ecdysone)elisa试剂盒注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照昆虫蜕皮激素(Ecdysone)elisa试剂盒说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
-
2018-11-22 10:00
产品样册
-
昆虫谷胱甘肽(GSH)酶联免疫分析试剂盒说明书
- 昆虫谷胱甘肽(GSH)酶联免疫分析试剂盒说明书本试剂盒仅供研究使用。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中昆虫谷胱甘肽(GSH)水平。用纯化的昆虫谷胱甘肽(GSH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入谷胱甘肽(GSH),再与HRP标记的谷胱甘肽(GSH)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的谷胱甘肽(GSH)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中昆虫谷胱甘肽(GSH)浓度。昆虫谷胱甘肽(GSH)酶联免疫分析试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(960ng/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。昆虫谷胱甘肽(GSH)酶联免疫分析试剂盒操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。480ng/L5号标准品150l的原倍标准品加入150l标准品稀释液240ng/L4号标准品150l的5号标准品加入150l标准品稀释液120ng/L3号标准品150l的4号标准品加入150l标准品稀释液60ng/L2号标准品150l的3号标准品加入150l标准品稀释液30ng/L1号标准品150l的2号标准品加入150l标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50l,待测样品孔中先加样品稀释液40l,然后再加待测样品10l(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50l,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50l,再加入显色剂B50l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。昆虫谷胱甘肽(GSH)酶联免疫分析试剂盒注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照昆虫谷胱甘肽(GSH)酶联免疫分析试剂盒说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
-
2018-11-23 10:00
产品样册
-
真菌酵母β1,3 D葡聚糖合成酶活性比色法定量检测试剂盒
- 真菌/酵母细胞β1,3-D-葡聚糖合成酶活性定量检测试剂盒产品说明书(中文版)主要用途真菌/酵母细胞β1,3-D-葡聚糖合成酶活性定量检测试剂是一种旨在通过β1,3-D-葡聚糖合成酶反应系统中尿嘧啶核苷-5’-二磷酸葡萄糖底物聚合成葡聚糖,与荧光染料结合产生荧光峰值的变化,来测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种真菌或酵母细胞株裂解悬液中β1,3-D-葡聚糖合成酶的活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,具有高通量特点。技术背景真菌/酵母细胞壁结构具有丰富的糖蛋白外层和碳水化合物内层,包括(1,3)-β-D,(1,6)-β-D和(1,3)-α-D-葡聚糖(glucan)。其中(1,3)-β-D为主要元素。1,3-β-D-葡聚糖合成酶(1,3-β-D-glucansynthase;GS;EC.2.4.1.34),又称为尿嘧啶核苷-5’-二磷酸葡萄糖:1,3-β-葡萄糖基转移酶(UDP-glucose:1,3-β-glucosyltransferase),催化以尿嘧啶核苷-5’-二磷酸葡萄糖(UDP-glucose)为底物,通过1,3-β链接聚合为葡聚糖的反应,构成真菌/酵母细胞壁结构中主要碳水化合物成分1,3-β-D-葡聚糖,为细胞生长所必需。1,3-β-D-葡聚糖合成酶具有两种结构体:1个调节亚体,GTPaseRho1p和4个催化亚体,Bgs1p-4p或Fksp。(1,3)-β-D-葡聚糖合成酶成为抗真菌药物,例如卡泊芬净(caspofungi)等的靶标。基于底物UDP-glucose在葡聚糖合成酶的催化下,聚合成(1,3)-β-D-葡聚糖产物,与苯胺蓝(Anilineblue;4,4-(carbonyl-bis(benzene-4,1-diyl)-bis-(imino)-bis-benzenesulfonicacid)反应产生复合物,呈现荧光峰值的变化(激发波长400nm,散发波长460nm),由此定量测定β1,3-D-葡聚糖合成酶的活性。产品内容裂解液(ReagentA)毫升强化液(ReagentB)毫升缓冲液(ReagentC)毫升底物液(ReagentD)微升终止液(ReagentE)微升反应液(ReagentF)毫升稀释液(ReagentG)微升标准液(ReagentH)微升产品说明书1份保存方式保存在-20℃冰箱里;反应液(ReagentF)避免光照;终止液(ReagentE)具有腐蚀性,注意操作安全;有效保证6月1[详细]
-
2018-11-08 10:00
产品样册
-
真菌/酵母细胞β1,3- D-葡聚糖合成酶活性定量检测试剂盒
- 主要用途真菌/酵母细胞β1,3-D-葡聚糖合成酶活性定量检测试剂是一种旨在通过β1,3-D-葡聚糖合成酶反应系统中尿嘧啶核苷-5’-二磷酸葡萄糖底物聚合成葡聚糖,与荧光染料结合产生荧光峰值的变化,来测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种真菌或酵母细胞株裂解悬液中β1,3-D-葡聚糖合成酶的活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,具有高通量特点。技术背景真菌/酵母细胞壁结构具有丰富的糖蛋白外层和碳水化合物内层,包括(1,3)-β-D,(1,6)-β-D和(1,3)-α-D-葡聚糖(glucan)。其中(1,3)-β-D为主要元素。1,3-β-D-葡聚糖合成酶(1,3-β-D-glucansynthase;GS;EC.2.4.1.34),又称为尿嘧啶核苷-5’-二磷酸葡萄糖:1,3-β-葡萄糖基转移酶(UDP-glucose:1,3-β-glucosyltransferase),催化以尿嘧啶核苷-5’-二磷酸葡萄糖(UDP-glucose)为底物,通过1,3-β链接聚合为葡聚糖的反应,构成真菌/酵母细胞壁结构中主要碳水化合物成分1,3-β-D-葡聚糖,为细胞生长所必需。1,3-β-D-葡聚糖合成酶具有两种结构体:1个调节亚体,GTPaseRho1p和4个催化亚体,Bgs1p-4p或Fksp。(1,3)-β-D-葡聚糖合成酶成为抗真菌药物,例如卡泊芬净(caspofungi)等的靶标。基于底物UDP-glucose在葡聚糖合成酶的催化下,聚合成(1,3)-β-D-葡聚糖产物,与苯胺蓝(Anilineblue;4,4-(carbonyl-bis(benzene-4,1-diyl)-bis-(imino)-bis-benzenesulfonicacid)反应产生复合物,呈现荧光峰值的变化(激发波长400nm,散发波长460nm),由此定量测定β1,3-D-葡聚糖合成酶的活性。[详细]
-
2018-11-18 10:00
产品样册
-
昆虫针选购指南
- 昆虫针选购指南[详细]
-
2015-04-25 00:00
标准
-
昆虫的采集
- 昆虫的采集[详细]
-
2014-04-02 00:00
其它
-
昆虫蛋白提取试剂盒
- 昆虫蛋白提取试剂盒产品组成:产品组成HL-3126-1HL-3126-2规格50T100T昆虫蛋白提取液25ml50ml蛋白稳定剂200ul400ul蛋白酶YZ剂混合物100ul200ul注:1、蛋白提取液:含多种有效成分,可以充分蛋白,又可结合释出的蛋白防止沉淀。提取液中已含磷酸酶YZ剂混合物。2、蛋白酶YZ剂混合物:包含7种独立的蛋白酶YZ剂,AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、PepstatinA、Bestatin、E-64、EDTA。注意:1、蛋白酶YZ剂混合物避免反复冻融。2、如果试剂盒不能短时间内用完,蛋白酶YZ剂混合物不可以一次全部加入提取液。储存条件:蛋白酶YZ剂-20℃保存;蛋白稳定剂、蛋白提取液室温保存。有效期:一年。注意事项:1、本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或ZL。2、螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。3、禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。4、**使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。5、避免皮肤或粘膜与试剂接触。产品简介:昆虫组织蛋白提取试剂盒适用于从各种昆虫类细胞、组织中提取总蛋白。提取过程简单方便,可在1小时内完成。该试剂盒含有的蛋白酶YZ剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高纯度的蛋白提供了保证。提取的蛋白可用于WesternBlotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。产品特点:1、使用方便,从昆虫类细胞,组织中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。2、将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。3、含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。4、紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。5、蛋白酶YZ剂YZ了蛋白的降解,蛋白酶YZ剂配方优化。蛋白酶YZ剂混合物包含7种独立的蛋白酶YZ剂;每一种YZ剂可特异性YZ某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以YZ几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。试剂盒以外自备试剂和仪器1、移液器、吸头2、离心机及离心管3、涡旋振荡器4、冰箱,冰盒使用方法:使用注意事项:旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。蛋白酶YZ剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶YZ剂单品。Western实验内参可以选用beta-actin、GAPDH、Tubulin。更多蛋白提取常见问题分析等资料可以联系本公司索取。提取液制备:每500ul冷的昆虫蛋白提取液中加入2ul蛋白酶YZ剂混合物,4ul蛋白稳定剂,混匀后置冰上备用。取100mg昆虫组织样本剪碎①,加入昆虫蛋白提取液。混匀后,在4℃条件下振荡15-20分钟。在4℃,14000rpm条件下离心15分钟。快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到昆虫总蛋白。将上述蛋白提取物定量②后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。注:①用液氮研磨的方法更佳,具体方法可以联系本公司索取详细资料。②建议用BCA法进行蛋白定量。③蛋白样品-80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉,不要被细菌污染。[详细]
-
2018-11-19 10:00
产品样册
-
昆虫的饲养
- 昆虫的饲养[详细]
-
2024-09-28 01:25
其它
-
大鼠胆固醇合成酶(HMG-COA)说明书定性
- www.biokanu.com大鼠胆固醇合成酶(HMG-COA)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血液,血清及相关液体样本中胆固醇合成酶(HMG-COA)水平。实验原理:本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)测定标本中大鼠胆固醇合成酶(HMG-COA)。用纯化的大鼠胆固醇合成酶(HMG-COA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中胆固醇合成酶(HMG-COA)相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的胆固醇合成酶(HMG-COA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中大鼠胆固醇合成酶(HMG-COA)存在与否。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存阴性对照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存阳性对照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤:1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。结果判定:试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00;阴性对照平均值≤0.10临界值(CUTOFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15阴性判定:样品OD值<临界值(CUTOFF)者为胆固醇合成酶(HMG-COA)阴性阳性判定:样品OD值≥临界值(CUTOFF)者为胆固醇合成酶(HMG-COA)阳性注意事项1.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。5.底物请避光保存。6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为630nm7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸,使用时必须注意安全。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
-
2018-09-22 10:00
产品样册
-
昆虫羧酸酯酶(CES)ELISA试剂盒说明书
- 昆虫羧酸酯酶(CES)ELISA试剂盒说明书本试剂盒仅供研究使用。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中昆虫羧酸酯酶(CES)水平。用纯化的昆虫羧酸酯酶(CES)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入羧酸酯酶(CES),再与HRP标记的羧酸酯酶(CES)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的羧酸酯酶(CES)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中昆虫羧酸酯酶(CES)活性浓度。昆虫羧酸酯酶(CES)ELISA试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(200U/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。昆虫羧酸酯酶(CES)ELISA试剂盒操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。100U/L5号标准品150l的原倍标准品加入150l标准品稀释液50U/L4号标准品150l的5号标准品加入150l标准品稀释液25U/L3号标准品150l的4号标准品加入150l标准品稀释液12.5U/L2号标准品150l的3号标准品加入150l标准品稀释液6.25U/L1号标准品150l的2号标准品加入150l标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50l,待测样品孔中先加样品稀释液40l,然后再加待测样品10l(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50l,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50l,再加入显色剂B50l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.10.终止:每孔加终止液50l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。昆虫羧酸酯酶(CES)ELISA试剂盒注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照昆虫羧酸酯酶(CES)ELISA试剂盒说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1.试剂盒保存:2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
-
2018-11-22 10:00
产品样册
-
细胞长链脂酰辅酶A合成酶活性酶连续循环光度法定量检测试剂盒产品说明书
- 细胞长链脂酰辅酶A合成酶活性酶连续循环光度法定量检测试剂盒产品说明书主要用途细胞长链脂酰辅酶A合成酶(LONG-CHAINACYLCOASYNTHETASE;LACS)活性酶连续循环光度法定量检测试剂是一种旨在通过肌激酶、丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶的酶连续反应系统中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后峰值的降低,即采用光度法来测定细胞裂解样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞裂解悬液样品(动物、人体等)长链脂酰辅酶A合成酶的活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。技术背景脂肪酸β氧化过程(β-oxidation)在动物组织的线粒体发生的脂肪酸代谢通路,可概括为活化、转移、β氧化及Z后经三羧酸循环被彻底氧化生成CO2和H2O,并释放能量等四个阶段。脂酰辅酶A合成酶(acylcoAsynthetase;EC.6.2.1.3),又称为脂肪酸硫激酶(fattyacidthiokinase)或脂酰辅酶A连接酶(acylcoAligase),是脂肪酸进入β-氧化前的活化所必需:在ATP、CoA-SH、Mg2+存在下,催化饱和或不饱和直链脂肪酸分子(C4)连接辅酶A合成相应的脂酰辅酶A。其为一高能化合物,水溶性增强,提高代谢活性。当脂肪酸进入细胞后,在内质网及线粒体外膜上先被活化,形成脂酰辅酶A衍生物,然后再进入线粒体内氧化。脂酰辅酶A合成酶分成三种底物特异性的种类:小于4个碳(C4)的短链脂酰辅酶A合成酶(acetyl-CoAsynthetase),介于4至12个碳(C4-C12)的中链脂酰辅酶A合成酶(butyryl-CoAsynthetase),和大于12个碳(C12)的长链脂酰辅酶A合成酶(palmitoylCoAsynthetase)。基于长链脂肪酸棕榈酸(palmitate)和辅酶A在长链脂酰辅酶A合成酶的作用下,产生棕榈酰辅酶A(palmitoyl-CoA)后,通过肌激酶(myokinase)、丙酮酸激酶(pyruvatekinase)和乳酸脱氢酶(lacticdehydrogenase)系统,测定还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizednicotinamideadeninedinucleotide;NAD)的变化(340nm波长),来定量分析长链脂酰辅酶A合成酶的活性。长链脂酰辅酶A合成酶连续循环反应系统为:Long-chainacylcoAsynthetasepalmitate+CoA+ATP→palmitoyl-CoA+AMP+PPimyokinaseAMP+ATP→2ADPpyruvatekinase2ADP+2phosphoenolpyruvate→2ATP+2pyruvatelacticdehydrogenase2pyruvate+2β-NADH→2lactate+2β-NAD+产品内容清理液(ReagentA)120毫升裂解液(ReagentB)10毫升缓冲液(ReagentC)5毫升反应液(ReagentD)500微升酶促液(ReagentE)250微升底色液(ReagentF)250微升阴性液(ReagentG)250微升产品说明书1份保存方式保存反应液(ReagentD)、酶促液(ReagentE)和底色液(ReagentF)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里;反应液(ReagentD)和底色液(ReagentF)避免光照;有效保证6月用户自备15毫升锥形离心管:用于样品制备的容器1.5毫升离心管:用于样品保存的容器细胞刮脱棒:用于脱离贴壁细胞(微型)台式离心机:用于样品制备200微升1厘米光径比色皿或96孔板:用于光度分析的容器分光光度仪或酶标仪:用于光度分析实验步骤样品准备准备好25cm2细胞培养瓶或60mm细胞培养皿的待测培养细胞(1至5X106细胞)小心加入3毫升清理液(ReagentA),覆盖生长表面小心抽去清理液使用细胞刮脱棒轻柔刮脱细胞(注意:可以使用胰酶消化)加入3毫升清理液(ReagentA),混匀细胞移入到预冷的15毫升锥形离心管(注意:悬浮细胞从这一步骤开始)放进4℃台式离心机离心5分钟,速度为300g小心抽去上清液加入500微升裂解液(ReagentB),充分混匀转移到预冷的1.5毫升离心管QL涡旋震荡15秒置于冰槽里孵育30分钟放进4℃微型台式离心机离心5分钟,速度为16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心移取500微升上清液到新的预冷的1.5毫升离心管移取10微升进行蛋白定量检测(注意:建议使用Bradford蛋白质浓度定量试剂盒-HL30030.1)即刻放进-70℃保存或置于冰槽里继续后续操作测定准备开启并设定好分光光度仪(温度为25℃):波长340nm,间隔5分钟,读数3次(共15分钟),并置零从-20℃冰箱里取出试剂,置于冰槽里融化;反应液(ReagentD)和底色液(ReagentF)避免光照缓冲液(ReagentC)室温下均衡温度背景对照测定移取195微升缓冲液(ReagentC)到新的比色皿加入25微升反应液(ReagentD)加入12.5微升酶促液(ReagentE)加入12.5微升底色液(ReagentF)上下倾倒数次,混匀在25℃温度下孵育3分钟加入5微升阴性液(ReagentG)上下倾倒数次,混匀(限定在3秒之内)即刻放进分光光度仪检测,此为背景空对照(0分钟读数-15分钟读数)样品测定移取195微升缓冲液(ReagentC)到新的比色皿加入25微升反应液(ReagentD)加入12.5微升酶促液(ReagentE)加入12.5微升底色液(ReagentF)上下倾倒数次,混匀在25℃温度下孵育3分钟加入5微升待测样品(20微克蛋白)(注意:样品须清澈)上下倾倒数次,混匀(限定在3秒之内)即刻放进分光光度仪检测,此为样品读数(0分钟读数-15分钟读数)五、计算样品活性[(样品读数-背景读数)X0.25(体系容量;毫升)X样品稀释倍数]÷[0.005(样品容量;毫升)X6.22(毫摩尔吸光系数)X15(反应时间;分钟)X2]=单位/毫升÷(样品蛋白浓度)毫克/毫升=单位/毫克单位=微摩尔棕榈酰辅酶A/分钟酶标仪测定在96孔板上做好相应标记:背景对照和样品分别移取195微升缓冲液(ReagentC)到96孔板里分别加入25微升反应液(ReagentD)分别加入12.5微升酶促液(ReagentE)分别加入12.5微升底色液(ReagentF)轻轻摇动96孔板在25℃温度下孵育3分钟分别加入5微升阴性液(ReagentG)或待测样品(20微克蛋白)到相应孔里(注意:样品须清澈)轻轻摇动96孔板即刻放进酶标仪检测:0分钟读数和15分钟读数活性计算:[(样品读数-背景读数)X样品稀释倍数X0.25(体系容量;毫升)]÷[0.005(样品容量;毫升)X6.22(毫摩尔吸光系数)X0.6(光径距离;厘米)X15(反应时间;分钟)X2]=单位/毫升÷(样品蛋白浓度)毫克/毫升=单位/毫克单位=微摩尔棕榈酰辅酶A/分钟注意事项本产品为20次操作,包括背景对照操作时,须戴手套系统操作过程中,背景测定只需1次建议使用比色皿测定样品须澄清,至关重要加样后3秒内光度测定测定值由高到低变化;测定可持续15分钟光度测定后,比色皿须清洗彻底样本测定0分钟读数高于15分钟读数表明具有酶活性建议待测样本蛋白浓度为20微克/5微升(本公司提供Bradford蛋白质浓度定量试剂盒-HL30030.1)如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度长链脂酰辅酶A合成酶单位活性定义为:在25℃,pH8.1条件下,每分钟内能够合成1微摩尔棕榈酰辅酶A所需的酶量作为一个活性单位本公司提供系列脂肪酸代谢检测试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定检测敏感[详细]
-
2018-11-19 10:00
产品样册
Copyright 2004-2026 yiqi.com All Rights Reserved , 未经书面授权 , 页面内容不得以任何形式进行复制
参与评论
登录后参与评论