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人羟脯氨酸糖蛋白(HRGP)检测试剂盒
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人羟脯氨酸糖蛋白(HRGP)检测试剂盒
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人羟脯氨酸糖蛋白(HRGP)检测试剂盒
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2015-03-17 00:00
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2014-09-29 00:00
期刊论文
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人羟脯氨酸(HYP)ELISA试剂盒说明书
- 人羟脯氨酸(HYP)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人HYP单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的HYP与单抗结合,加入生物素化的抗人HYP,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,HYP浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中HYP浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):200ug/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成200ug/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入200ug/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品20、10、5、2.5、1.25、0.625、0.312、0ug/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应HYP含量。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的HYP检测浓度小于0.2ug/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人HYP。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
产品样册
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人羟脯氨酸Elisa试剂盒操作步骤
- 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。EPI猪肾上腺素规格:48T/96THSP-90猪热休克蛋白90规格:48T/96THSP-70猪热休克蛋白70规格:48T/96THSP-40猪热休克蛋白40规格:48T/96THSP-20猪热休克蛋白20规格:48T/96TNE猪去甲肾上腺素规格:48T/96TGLUT2猪葡萄糖转运蛋白2规格:48T/96TPrednisolone猪泼尼松龙规格:48T/96TCORT猪皮质酮/肾上腺酮规格:48T/96TCortisol猪皮质醇规格:48T/96TBNP猪脑钠素/脑钠尿肽规格:48T/96TSGLT1猪钠-葡萄糖共转运载体1规格:48T/96TeNOS-3猪内皮型一氧化氮合成酶3规格:48T/96TeNOS猪内皮型一氧化氮合成酶规格:48T/96TET-1猪内皮素1规格:48T/96T[详细]
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2018-09-27 10:00
产品样册
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人桥粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)检测试剂盒
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2015-03-10 00:00
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2015-03-11 00:00
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人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)检测试剂盒
- 人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)检测试剂盒[详细]
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2015-03-10 00:00
操作手册
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特价促销人α1-酸性糖蛋白ELISA检测试剂盒
- 本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆试验原理:α1-AGP试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知α1-AGP浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将α1-AGP和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,人α1-酸性糖蛋白ELISA检测试剂盒然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中α1-AGP的浓度呈比例关系。自备材料蒸馏水。加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发,避免长时间打开盖子。人α1-酸性糖蛋白ELISA检测试剂盒底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的α1-AGP标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的α1-AGP含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-4.0g/L4、敏感度:0.01g/LRC081-2ugRecombinantMurineSDF-1beta/CXCL12(rMuCXCL12)2ugRC082-100ug人α1-酸性糖蛋白ELISA检测试剂盒RecombinantHumanParathyroidHormone1-34(rHuPTH1-34)重组激素100ugRC083-100ugRecombinantHumanParathyroidHormone7-34(rHuPTH7-34)重组激素100ugRC084-100ugRecombinantHumanParathyroidHormone1-84(rHuPTH1-84)重组激素100ugRC085-5ugRecombinantMurineGM-CSF重组鼠粒-巨噬细胞集落刺激因子5ugCLS1077-200ml细胞分离液1.077200mlCLS1077-1-200ml细胞分离液1.077(FICOLL配置)200ml[详细]
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2018-09-19 10:00
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人糖蛋白130(gp130)ELISA试剂盒
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2013-12-06 00:00
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人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA试剂盒
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2015-01-13 00:00
产品样册
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人糖蛋白130(gp130)ELISA试剂盒
- 人糖蛋白130(gp130)ELISA试剂盒[详细]
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2015-01-13 00:00
其它
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人2糖蛋白(2-GP)ELISA试剂盒
- 人2糖蛋白(2-GP)ELISA试剂盒[详细]
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人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA试剂盒
- 人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA试剂盒[详细]
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2024-10-04 08:22
实验操作
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人抗髓鞘相关糖蛋白抗体(MAG Ab)检测试剂盒
- 人抗髓鞘相关糖蛋白抗体(MAG Ab)检测试剂盒[详细]
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2015-03-11 00:00
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