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ELISA试剂盒操作步骤
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2015-06-27 00:00 322阅读次数
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ELISA试剂盒操作步骤
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ELISA试剂盒操作步骤
- ELISA试剂盒操作步骤[详细]
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2015-06-27 00:00
期刊论文
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人羟脯氨酸Elisa试剂盒操作步骤
- 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。EPI猪肾上腺素规格:48T/96THSP-90猪热休克蛋白90规格:48T/96THSP-70猪热休克蛋白70规格:48T/96THSP-40猪热休克蛋白40规格:48T/96THSP-20猪热休克蛋白20规格:48T/96TNE猪去甲肾上腺素规格:48T/96TGLUT2猪葡萄糖转运蛋白2规格:48T/96TPrednisolone猪泼尼松龙规格:48T/96TCORT猪皮质酮/肾上腺酮规格:48T/96TCortisol猪皮质醇规格:48T/96TBNP猪脑钠素/脑钠尿肽规格:48T/96TSGLT1猪钠-葡萄糖共转运载体1规格:48T/96TeNOS-3猪内皮型一氧化氮合成酶3规格:48T/96TeNOS猪内皮型一氧化氮合成酶规格:48T/96TET-1猪内皮素1规格:48T/96T[详细]
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2018-09-27 10:00
产品样册
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鸡γ干扰素ELISA试剂盒操作步骤
- 操作步骤标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。120pg/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液60pg/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液30pg/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液15pg/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液7.5pg/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。[详细]
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2018-10-01 10:00
产品样册
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牛血红蛋白ELISA试剂盒操作步骤
- 牛血红蛋白(Hb)ELISA试剂盒使用说明书仅供科学研究使用实验目的:本试剂盒用于测定牛血清,血浆及相关液体样本中血红蛋白(Hb)含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛血红蛋白(Hb)水平。用纯化的牛血红蛋白(Hb)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入血红蛋白(Hb),再与HRP标记的血红蛋白(Hb)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的血红蛋白(Hb)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中牛血红蛋白(Hb)浓度。试剂盒组成:请下载产品说明书。样本处理及要求:请下载产品说明书。1.试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。2.批内与批见应分别小于9%和15%检测范围:5ug/ml-100ug/ml保存条件及有效期:1.试剂盒保存:2-8℃2.有效期:6个月[详细]
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2018-11-15 10:00
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人一氧化氮(NO)ELISA试剂盒操作步骤
- 使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中一氧化氮(NO)含量。标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。200μmol/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液100μmol/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液50μmol/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液25μmol/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液12.5μmol/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.[详细]
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2018-12-30 10:00
产品样册
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植物凝集素ELISA 检测试剂盒操作步骤
- 植物凝集素ELISA检测试剂盒PHA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验.已知PHA浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将PHA和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中PHA的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制:植物凝集素ELISA检测试剂盒试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:40nmol/L1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀植物凝集素ELISA检测试剂盒自备材料蒸馏水。加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。植物凝集素ELISA检测试剂盒安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项:植物凝集素ELISA检测试剂盒试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法:植物凝集素ELISA检测试剂盒血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备:植物凝集素ELISA检测试剂盒标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:0nmol/L(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤:植物凝集素ELISA检测试剂盒使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,植物凝集素ELISA检测试剂盒振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案:植物凝集素ELISA检测试剂盒标准品浓度(nmol/L)A4040样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析:植物凝集素ELISA检测试剂盒1、仪器值:植物凝集素ELISA检测试剂盒于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的PHA标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的PHA含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-40nmol/L4、敏感度:0.1nmol/L[详细]
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2018-09-27 10:00
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大鼠钙调神经磷酸酶(CaN)Elisa试剂盒操作步骤
- 使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中钙调神经磷酸酶(CaN)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠钙调神经磷酸酶(CaN)水平。用纯化的大鼠钙调神经磷酸酶(CaN)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入钙调神经磷酸酶(CaN),再与HRP标记的钙调神经磷酸酶(CaN)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的钙调神经磷酸酶(CaN)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠钙调神经磷酸酶(CaN)浓度。标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。[详细]
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2018-10-01 10:00
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猪传染性胃肠炎ELISA试剂盒操作步骤
- 使用目的:本试剂盒用于测定猪血清、血浆及相关液体样本中传染性胃肠炎(TGEV)含量。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(480U/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个[详细]
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2018-10-01 10:00
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猴免疫球蛋白G elisa试剂盒操作步骤
- 操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。120μg/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液60μg/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液30μg/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液15μg/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液7.5μg/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。[详细]
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2018-10-08 10:01
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小鼠甲状腺素(T4)elisa试剂盒操作步骤
- 使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中甲状腺素(T4)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠甲状腺素(T4)水平。用纯化的小鼠甲状腺素(T4)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入甲状腺素(T4),再与HRP标记的甲状腺素(T4)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的甲状腺素(T4)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠甲状腺素(T4)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(480μg/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个[详细]
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2018-10-08 10:01
产品样册
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小鼠促性腺激素(GTH)ELISA试剂盒操作步骤
- 使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清和细胞上清液样本中促性腺激素(GTH)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠促性腺激素(GTH)水平。用纯化的小鼠促性腺激素(GTH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入促性腺激素(GTH),再与HRP标记的促性腺激素(GTH)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的促性腺激素(GTH)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠促性腺激素(GTH)浓度。标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。160ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液80ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液40ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液20ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液10ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-12-30 10:00
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人百日咳(PT)ELISA试剂盒操作步骤
- 使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中百日咳(PT)含量。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(2400ng/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。1200ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液600ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液300ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液150ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液75ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-12-30 10:00
产品样册
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人癌胚抗原(CEA)elisa试剂盒操作步骤
- 人癌胚抗原(CEA)elisa试剂盒操作步骤试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(96ng/ml)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。48ng/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液24ng/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液12ng/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液6ng/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液3ng/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-12-30 10:00
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ELISA试剂盒实验原理与操作步骤
- 上海劲马生物科技有限公司ELISA试剂盒实验原理与操作步骤实验方法:酶联免疫法/酶免法(ELISA)检测原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法操作步骤:具体请参照说明书(详细说明书请联系我司业务人员:021-60517348,13817140470。)注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:2-8℃2.有效期:6个月[详细]
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2024-09-11 18:03
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供应植物几丁质酶(chitinase)ELISA试剂盒操作步骤
- 供应植物几丁质酶(chitinase)ELISA试剂盒操作步骤[详细]
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2015-03-18 00:00
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人ELISA试剂盒操作步骤的注意要点
- 我司将在本章中正确讲解人ELISA试剂盒各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球兔ELSIA试剂盒,国外试剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,必能得出。Z后将人ELISA试剂盒板放在湿纱布上。湿盒应先放在保温箱中预温至规定的温度,特别是在气温较低的时候更应如此。无论是水浴还是湿盒温育,反应板均不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。室温温育的反应,人ELISA试剂盒操作时的室温应严格限制在规定的范围内,标准室温温度是指20-25℃,但具体操作时可根据的要求控制温育。人ELISA试剂盒原材料批量进口与自配的特殊配方稀释剂(预包被微孔板的批内和批间变异系数均小于10%),经过严格交叉反应和干扰测试及稳定性试验,明确了其高灵敏度对检测的样本达到好的性能。ELISA(酶联免疫吸附分析)通常用于定性和定量评估细胞因子、趋化因子、生长因子、磷酸化后目标、免疫球蛋白和其他免疫标记,保证了产品的高品质性能的同时兼顾成本。欢迎来电咨询我司人Elisa试剂盒产品:人腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)ELISA试剂盒人酰化刺激蛋白(ASP)ELISA试剂盒人血纤肽/纤维蛋白肽A(FPA)ELISA试剂盒人细胞外基质磷酸糖蛋白(MEPE)ELISA试剂盒人细胞毒素相关蛋白A(CagA)ELISA试剂盒人胃泌素释放多肽(GRP)ELISA试剂盒人复制蛋白A(RPA-70)ELISA试剂盒人未磷酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1ELISA试剂盒人嗜铬蛋白A(CgA)ELISA试剂盒人视网膜母细胞瘤YZ蛋白(pRB)ELISA试剂盒人生长激素结合蛋白(GHBP)ELISA试剂盒人神经激肽B(NKB)ELISA试剂盒人软骨寡聚基质蛋白(COMP)ELISA试剂盒人去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)ELISA试剂盒人羟脯氨酸糖蛋白(HRGP)ELISA试剂盒人强啡肽(Dyn)ELISA试剂盒人胃泌素释放肽前体(ProGRP)ELISA试剂盒[详细]
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2018-09-19 10:00
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人硫氧还蛋白还原酶ELISA检测试剂盒操作步骤
- 人(Human)硫氧还蛋白还原酶(TrxR)ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆试验原理:TrxR试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知TrxR浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将TrxR和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中TrxR的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:80ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗TrxR抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。人(Human)硫氧还蛋白还原酶(TrxR)ELISA检测试剂盒操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液5、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1.标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:80ng/ml(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。40ng/ml(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液20ng/ml(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液10ng/ml(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液5.0ng/ml(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液2.5ng/ml(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0ng/ml(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度(ng/ml)A8080样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B4040样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C2020样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D1010样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E5.05.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F2.52.5样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品人(Human)硫氧还蛋白还原酶(TrxR)ELISA检测试剂盒局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的TrxR标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的TrxR含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-80ng/ml4、敏感度:0.1ng/ml[详细]
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2018-09-19 10:00
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兔子乙醛脱氢酶(ALDH)ELISA试剂盒操作步骤
- 1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。24ng/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液12ng/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液6.0ng/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液3.0ng/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液1.5ng/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加液后15分钟以内进行。[详细]
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2018-10-01 10:00
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犬瘟酶联elisa试剂盒操作步骤
- 试剂盒组成120倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液3ml×1瓶2酶标试剂3ml×1瓶8标准品(120ng/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×4条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液3ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液3ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液3ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。[详细]
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2018-10-01 10:00
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大鼠活性氧簇(ROS)ELISA试剂盒操作步骤
- 大鼠活性氧簇(ROS)ELISA试剂盒操作步骤使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中活性氧簇(ROS)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠活性氧簇(ROS)水平。用纯化的大鼠活性氧簇(ROS)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入活性氧簇(ROS),再与HRP标记的活性氧簇(ROS)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的活性氧簇(ROS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠活性氧簇(ROS)浓度。标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。360IU/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液180IU/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液90IU/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液45IU/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液22.5IU/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-10-01 10:00
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