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大鼠去甲肾上腺素(NA)elisa测试盒使用说明书
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本文由 上海士锋生物科技有限公司 整理汇编
2013-10-21 00:00 225阅读次数
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大鼠去甲肾上腺素(NA)elisa测试盒使用说明书
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大鼠去甲肾上腺素(NA)elisa测试盒使用说明书
- 大鼠去甲肾上腺素(NA)elisa测试盒使用说明书[详细]
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2013-10-21 00:00
报价单
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大鼠去甲肾上腺素(NA)ELISA试剂盒
- 大鼠去甲肾上腺素(NA)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗大鼠NA(Norepinephrine,Noradrenaline)单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的NA与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠NA,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,NA浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中NA浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):1280ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。2.标准品液配制:使用前加入0.5ml蒸馏水混匀,配成2560ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入2560ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品256、128、64、32、16、8、4、0ng/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应NA含量即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的NA检测浓度小于2ng/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的大鼠NA。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:00
产品样册
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大鼠去甲肾上腺素(NA)ELISA试剂盒
- 大鼠去甲肾上腺素(NA)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-29 12:38
操作手册
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去甲肾上腺素(NA)
- 去甲肾上腺素(NA)上海elisa试剂盒厂家,广锐生物为高质量elisa的生产商及供应商,回馈各位老师们的大力支持,部分ELISA试剂盒年底促销优惠,限时购买。可来电了解详情,我们讲及时为您提供专业的技术服务。苯丙氨酸斜面营养肉汤(不含糖)小鼠水通道蛋白5(AQP-5)elisa试剂盒小鼠脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PL-A2)elisa试剂盒大鼠瘦素(LEP)elisa试剂盒人前列环素(PGI)elisa试剂盒人游离前列腺特异性抗原(fPSA)elisa试剂盒人抗DNA酶B抗体(anti-DNaseB)elisa试剂盒假单胞菌琼脂基础培养人骨粘连蛋白(ON)elisa试剂盒去甲肾上腺素(NA)elisa实验方法操作标准,加血清样本及反应试剂在现在的elisa商品试剂盒中,血清样本的加入几乎是**的要使用微量加样器加入样本的步骤。使用微量加样器加样必须注意的关键点是:加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡。加样太快,无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。试剂的加入在国产试剂盒中基本上均是从滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出现重复滴加或加在两孔之间的现象,这样就会在孔内的非包被区出现非特异吸附,从而引起非特异显色。所以,有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致。去甲肾上腺素(NA)1、elisa规格:96孔/48孔2、货期:库存现货。3、产品订购以订货当日Zxin价格为准。4、Elisa试剂盒技术服务要求:专业,规范,GX。5、种属多,产品质量好,灵敏度高,免费技术代测。6、人、小鼠、大鼠、豚鼠、兔子、犬、鸡、马、猴、羊、猪、牛、各类植物等种属标本。[详细]
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2018-10-23 10:30
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人去甲肾上腺素(NA) ELISA试剂盒
- 人去甲肾上腺素(NA) ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-06 00:00
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兔 (Rabbit) 去甲肾上腺素 (NA) ELISA 检测试剂盒
- 试验原理:NA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知NA浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将NA和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中NA的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液5、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1.标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:1600pg/ml(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。800pg/ml(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液400pg/ml(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液200pg/ml(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液100pg/ml(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液50pg/ml(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0pg/ml(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入60ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度(pg/ml)A16001600样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B800800样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C400400样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D200200样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E100100样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F5050样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的NA标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的NA含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-1600pg/ml4、敏感度:1.0pg/ml[详细]
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2024-09-28 07:02
产品样册
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去甲肾上腺素ELISA Kit使用说明书
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4去甲肾上腺素ELISAKit使用说明书(德国IBL:RE59261)1、应用范围此试剂盒可用于人血清和尿液中去甲肾上腺素的体外定量检测。2、临床意义儿茶酚胺类激素肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺主要由肾上腺髓质、交感神经系统和大脑产生。它们几乎影响所有的组织,并与其它激素和神经系统一起参与各种生理过程的调节。在许多疾病中,儿茶酚胺激素及其代谢产物变肾上腺素和去甲变肾上腺素的分泌量都会增加,因而这些激素可用于疾病的诊断。所以,这些激素的检测对于疾病的诊断及神经系统肿瘤疾病的具有重要意义。它主要用于嗜铬细胞瘤的诊断,当然也用于成神经细胞瘤和神经节细胞瘤的诊断。因为在实验一开始时有提取步骤,用户可使用各种动物材料进行实验。所有动物的儿茶酚胺的化学结构相同,因此此试剂盒可用于测大鼠、小鼠或其它动物。3、实验原理此固相ELISA试剂盒利用的夹心法原理。微孔中包被了羊抗兔抗体。之后加入的液态抗体可以结合到抗原分子的一个抗原决定簇上,而抗原分子可在温育期内结合到固相抗体上。样品中的抗原与酶标二抗一起在微孔内温育,此酶标二抗可结合到抗原分子上的另一不同表位上。加入底物液后,溶液所显示的颜色强度与样品中抗原的量成正比。样品的结果可直接从标准曲线上读取。4、贮存与稳定性试剂盒和运输环境和储存环境温度为2-8℃,避免热源或太阳直射。样品的储存与稳定性及试剂的准备将在相关章节中阐述。开封的试剂盒在有效期内稳定,前提是将试剂盒用袋子密封并储存于2-8℃的环境下。5、样品的采集与储存注意人体内的儿茶酚氨和间甲肾上腺素的释放会受到一些食品和药物的影响。因此在样品采集前72小时内病人应禁止服用下列食物和药品:维生素B,咖啡,香蕉,α甲基多巴,MAO,COMTYZ剂,还有降血压类药物。血浆(EDTA)注意血液采集后两小时内,将血液样品冷藏于2-8℃的环境下直致离心获取血浆。注意静脉穿刺采集全血的常规注意事项。从采集到血液样品的那一刻起到检测时都应保持血液样品的化学整体性。不要使用明显溶血、黄疸的和脂血样品。如果样品出现混浊,则在实验前应当离心以除去所有的微粒物质。贮存2-8℃≤-20℃避免热源或太阳直射,避免反复冻融,冷冻状态下运输样品。稳定性6h1个月尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。将病人24h内的所有尿液都收集到,并混合于含10-15ml6N的HCl防腐剂的试剂瓶中。贮存≤-20℃避免热源或太阳直射,避免反复冻融,冷冻状态下运输样品。稳定性6个月6、试剂盒成分注意:试剂盒有足够做96份单孔检测或48份双孔检测所需的试剂成分数量标志成分1×12×8MTP包被板,可拆,微孔中包被了抗兔IgG(羊,单克隆)。1×6×2.5mlCALA-F标准品A-F,即用肾上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml(0;8;27;82;273;819nmol/L)去甲肾上素:0;5;15;50;150;500ng/mL(0;30;89;296;887;2955nmol/L)多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL(0;78;228;750;2938;14688nmol/L)内含[-]肾上腺素,[-]去甲肾上腺素,[-]多巴胺(有生物活性),0.1M的HCl1×2×2.5mlCONTROL1+2质控品1+2即用,含:[-]肾上腺素,[-]去甲肾上腺素,[-]多巴胺(具有生物活性),0.1M的HCl,具体浓度及可允许范围请见试剂瓶标签.1×250μLENZCONJCONC酶联物浓缩型(100×)内含:碱性磷酸酶标记的抗体,Tris缓冲液,HCl,0.01%的NaN32×EXTRPLATE提取板(微孔板)每板24孔,包被了硼酸亲和凝胶。1×60mlEXTRBUF提取缓冲液粉红色,即用,内含:0.016%的NaN32×1.25mlCOMTLYOCOMT冻干粉内含:儿茶酚-氧位-甲基转移酶(猪肝),NaN31×2mlCOMTADDCOMT添加剂内含:人血浆,稳定剂,0.01%硫柳汞。1×7mlANTISERUMDO去甲肾上腺素抗血清紫罗兰色,即用,内含:抗去甲肾上腺素抗体(兔),缓冲液,稳定剂。2×1.25mlCOENZ酶联复合物即用,内含:S-腺苷-L-蛋白酸,稳定剂。1×3mlENZBUF酶缓冲液即用,内含:Tris缓冲液,HCl,稳定剂。1×17mlRELEASEBUFRelease缓冲液黄色,即用,内含:0.1M的HCl,指示剂。1×3mlACYLREAG酰化试剂即用,内含:二甲基甲酰胺,乙醇。注意:有毒,高可燃性。1×50mlWASHBURCONC洗涤液浓缩型(10×)内含:Tris缓冲液,HCl,吐温,0.2%的NaN31×9×PNPPSUBSPNPP底物片内含:对硝基苯磷酸(PNPP)1×27mlPNPPBUFPNPP底物缓冲液即用,内含:二乙醇胺,水,0.05%的NaN31×15mlPNPPSTOPPNPP终止液即用,内含:1M的NaOH,0.25M的EDTA3×FOIL粘性金属板7、实验所需器材(但试剂盒不提供)1)移液器(10;10-100;100-1000μL)2)轨道摇床(200-900rpm)3)旋涡混合器4)带储器的8通道移液器5)洗涤瓶,自动或半自动包被板清洗系统6)酶标仪7)双蒸水或去离子水8)吸水纸,取样吸头,计时器8、实验前说明注意用于96人份检测色试剂盒成分可分成两次进行。,下列所述体积为做48人份时所需要的量。8.1样品的稀释如果样品中去甲肾上腺素浓度高于Z高标准品的应按照下列所述进行稀释:样品待稀释稀释液备注血浆去甲肾上腺素浓度高于Z高标准品中去甲肾上腺素的浓度双蒸水提取步骤前尿液去甲肾上腺素浓度高于Z高标准品中去甲肾上腺素的浓度0.1N的HCl提取步骤前8.2样品、标准品和质控品的提取(提取板,手动操作版)1)将标准品、已稀释好的质控品、已稀释好的尿液样品各20μL和500μL血浆样品加入到提取板相应的微孔中。除血浆样品孔外,在所有的微孔中加入500μL双蒸水以消除体积差别。2)在每一微孔中加入1000μL提取缓冲液3)盖板。在轨道摇床(600-900rpm)上18-25℃的环境下提取30min。在提取过程中,液体的表面应该会浸湿粘性金属板,但液体的量不能超过微孔的2/3。液体是否溅出并不会影响实验结果。4)移去粘性金属板,快速弃取孔内反应液,在吸水纸上拍干。5)每孔加入2ml双蒸水6)用新的粘性金属板盖板。在轨道摇床上(600-900rpm)18-25℃的环境下振荡5min。液体是否溅出并不会影响实验结果。7)移去粘性金属板,快速弃取孔内反应液,在吸水纸上拍干。8)每孔加入150μL提取缓冲液,再向每孔中加入50μL酰化试剂,立即混合均匀。9)在轨道摇床(400-600rpm)上18-25℃的环境下提取20min。(无需盖板)10)快速弃取孔内反应液,在吸水纸上拍干。11)每孔加入2ml双蒸水。12)用新的粘性金属板盖板。在轨道摇床上(600-900rpm)18-25℃的环境下振荡5min。液体是否溅出并不会影响实验结果。13)移去粘性金属板,快速弃取孔内反应液,在吸水纸上拍干。14)每孔加入300μLRelease缓冲液。15)在轨道摇床(400-500rpm)上18-25℃的环境下振荡30min。(无需盖板)已准备好的样品应当在当天就进行检测。如果不行的话,您可将提取板用粘性金属板盖好,在2-8℃的环境下可存放一夜。9、实验步骤9.1COMT酶溶液的准备注意:COMT酶溶液应在使用前直接临时配置。在COMT冻干粉中加入1.25ml双蒸水,充分混和。再加入1.25ml酶联溶液,然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加剂以充分混合溶解的COMT试剂*,COMT酶溶液Z后的体积为每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋涡混合器混合,但要避免气泡产生,配置好的COMT溶液可在室温下稳定存放1小时。*如果只需要一定量的COMT溶液,则剩余的COMT溶液应立即冻存于-20℃的环境下。COMT溶液可在此环境下稳定存放1-2个月。9.2样品、标准品和质控品的酶分化注意如果要检测肾上腺素和去甲肾上腺素,我们建议您先检测肾上腺素。如果使用自动置换型衣液器加样,请将取样吸头内的残余液体加入到提取板的相应微孔内,否则剩余的提取液不够去甲肾上腺素检测用。将提取板放到有一定坡度的位置上。实验开始前,确定好肾上腺素和去甲肾上腺素的检测孔并标记好。9.3尿液与血浆中的去甲肾上腺素1在每一微孔内加入25ul临时配制的COMT酶溶液,轻轻振板以使溶液混合均匀。2将提取好的标准品、质控品和样品分别25ul加入到相应的微孔内。在此步骤中,我们可以将取样吸头直接深入到COMT溶液里。加样后,溶液颜色变成粉色,轻轻振板以使溶液混合均匀。3向每一微孔中加入50ul去甲肾上腺素抗血清(蓝色)。4盖板,在轨道摇床上(400-600rpm)18-25℃的环境下孵育120min。8.4冻干粉或浓缩成分的准备稀释成分稀释液比例备注贮存稳定性20ml洗涤液180ml双蒸水1:10充分混合2-8℃4W60μL酶联物6ml洗涤缓冲液(已稀释好)1:101临时配置,仅能使用一次,混合时避免气泡产生18-25℃30min4PNPP底物片10.7mlPNPP底物缓冲液临时配置,仅能使用一次18-25℃10min9.5ELISA实验步骤1)移去粘性金属板,弃取孔内反应液,每孔用250-300ul稀释好的洗涤液洗板4次。Z后在吸水纸上拍干以除去残余液体。2)在每一微孔中加入100ul临时配置好的酶联物。3)盖板,在轨道摇床上(400-600rpm)18-25℃的环境下孵育60min。4)移去粘性金属板,弃取孔内反应液,每孔用250-300ul稀释好的洗涤液洗板4次。Z后在吸水纸上拍干一除去残余液体。5)如果可以的话,使用8道移液器加底物液和终止液。加底物液和终止液的时间间隔应当相同,使用自动置换型移液器并避免气泡产生。6)在每一微孔中加入200ul底物液。7)不要盖板,在轨道摇床上(400-600rpm)18-25℃的环境下孵育60min。8)在每一微孔内加入50ulPNPP终止液以终止酶反应。轻轻振板以使溶液混合均匀。9)加终止液后60min内405nm处读取OD值。10、期望值实验结果不能当作判断任何ZL结果的**因素,疾病的判断还应当与其它临床观察和诊断检测相结合。以下结果为正常人群的正常值(5%-95%),建议每个实验室读确定自己的正常值范围:尿液血浆μg/dnmol/dpg/mLnmol/L去甲肾上腺素<90<535<600<3.55本译文仅供参考,详情请以原文为准。ZGdu家总代理:深圳市科润达生物工程有限公司办公地址:深圳市蛇口工业区太子路18号海景广场11C研发基地:深圳市蛇口沿山路10号6层电话:0755-26814430,26680196邮政编码:518067免费电话:800-8306296传真:0755-26814431[详细]
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2018-11-14 10:00
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大鼠间羟去甲肾上腺素(NMN)ELISA试剂盒使用说明书
- 南京森贝伽现货供应,质量保证,价格优惠,试剂盒森贝伽。本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中间羟去甲肾上腺素(NMN)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠间羟去甲肾上腺素(NMN)水平。用纯化的大鼠间羟去甲肾上腺素(NMN)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入间羟去甲肾上腺素(NMN),再与HRP标记的间羟去甲肾上腺素(NMN)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的间羟去甲肾上腺素(NMN)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠间羟去甲肾上腺素(NMN)含量。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:540pg/mL0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为360pg/mL,240pg/mL,120pg/mL,60pg/mL,30pg/mL)。加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围:12pg/mL-500pg/mL保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-11-07 14:16
产品样册
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小鼠去甲肾上腺素(NA)的操作步骤
- 小鼠去甲肾上腺素(NA)的操作步骤[详细]
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2015-04-02 00:00
应用文章
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大鼠 (Rat) 去甲肾上腺素 (NOR) ELISA 检测试剂盒说明书
- 本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆试验原理:NOR试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知NOR浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将NOR和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中NOR的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:800pg/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗NOR抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料蒸馏水。加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:800pg/ml(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。400pg/ml(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液200pg/ml(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液100pg/ml(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液50pg/ml(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液25pg/ml(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0pg/ml(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度(pg/ml)A800800样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B400400样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C200200样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D100100样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E5050样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F2525样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的NOR标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的NOR含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/ml[详细]
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2018-09-28 10:00
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大鼠Ⅳ型胶原剂盒使用说明书
- 使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中Ⅳ型胶原(ColⅣ)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠Ⅳ型胶原(ColⅣ)水平。用纯化的大鼠Ⅳ型胶原(ColⅣ)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入Ⅳ型胶原(ColⅣ),再与HRP标记的Ⅳ型胶原(ColⅣ)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的Ⅳ型胶原(ColⅣ)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠Ⅳ型胶原(ColⅣ)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(96μg/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。大鼠Ⅳ型胶原剂盒使用说明书操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。48μg/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液24μg/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液12μg/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液6μg/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液3μg/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。大鼠Ⅳ型胶原剂盒使用说明书操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。大鼠Ⅳ型胶原剂盒使用说明书保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-27 10:00
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钙测试盒说明书
- 钙测试盒说明书[详细]
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2015-08-27 00:00
应用文章
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大鼠白介素1β酶联免疫分析剂盒使用说明书
- 样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为60ng/L,40ng/L,20ng/L,10ng/L,5ng/L)。加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。[详细]
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2018-11-19 10:00
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血清铁测试盒说明书
- 血清铁测试盒说明书[详细]
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2018-11-18 10:00
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抗坏血酸(Vc)测试盒说明书
- 抗坏血酸(Vc)测试盒说明书(货号:HL00950T/48样)试剂盒组成及配制(50T/48样):试剂一:液体10ml×1瓶,4℃保存6个月。用时加水至150ml,混匀,配成应用液。试剂二:粉剂×1支,4℃保存6个月。用时加1.8ml的冰醋酸再加水至200ml,4℃保存。试剂三:白色结晶体的粉剂×1支,4℃保存6个月。因较难溶解,在使用前2-4小时加95%酒精或无水乙醇60ml充分溶解,4℃保存。试剂四:黄色贮备液10ml×1瓶,冰箱4-8℃避光保存,贮存时间6个月。每次测定时取0.3ml贮备液加水试剂五:液体6ml×1瓶,4℃保存6个月。维生素C标准品:粉剂6mg×3支,每瓶内含维生素C,4℃避光保存6个月。6μg/ml标准品应用液的配制:将一支标准品溶于10ml的1号试剂应用液中,混匀后取0.1m再加1号试剂应用液至10ml,现用现配。注:维生素C标准品氧化,因此,**在样本上清液制备好后再配标准,并在10分钟内进行检测。本人内容由上海哈灵生物科技有限公司提供[详细]
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2018-11-18 10:00
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人去甲肾上腺素(NE)ELISA试剂盒说明书
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com人去甲肾上腺素(NE)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和唾液等其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人NE单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的NE与单抗结合,加入生物素化的抗人NE,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,NE浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中NE浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):40ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、唾液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清、血浆、细胞培养上清用标本稀释液作1:10稀释(取20ul,加标本稀释液180ul,稀释10倍)。唾液不作稀释,直接检测。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成40ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入40ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应NE含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的NE检测浓度小于31pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人NE。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
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大鼠碱性磷酸酶elisa试剂盒使用说明书
- 大鼠碱性磷酸酶elisa试剂盒使用说明书使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中碱性磷酸酶(ALP)含量。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。40IU/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液20IU/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液10IU/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液5IU/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液2.5IU/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。[详细]
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2018-10-01 10:00
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大鼠γ干扰素ELISA试剂盒使用说明书
- 检测范围:96T75pg/ml-2400pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中γ干扰素(IFN-γ)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠γ干扰素(IFN-γ)水平。用纯化的大鼠γ干扰素(IFN-γ)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入γ干扰素(IFN-γ),再与HRP标记的γ干扰素(IFN-γ)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的γ干扰素(IFN-γ)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠γ干扰素(IFN-γ)浓度。[详细]
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2018-10-08 10:01
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大鼠α干扰素ELISA试剂盒使用说明书
- 大鼠α干扰素ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。实验原理大鼠α干扰素ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠α干扰素(IFN-α)水平。用纯化的大鼠α干扰素(IFN-α)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入α干扰素(IFN-α),再与HRP标记的α干扰素(IFN-α)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的α干扰素(IFN-α)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠α干扰素(IFN-α)浓度。大鼠α干扰素ELISA试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(80ng/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。大鼠α干扰素ELISA试剂盒操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。40ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液20ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液10ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液5ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液2.5ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。大鼠α干扰素ELISA试剂盒注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。大鼠α干扰素ELISA试剂盒保存条件及有效期1.试剂盒保存:2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-11-22 10:00
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大鼠癌胚抗原ELISA试剂盒使用说明书
- 大鼠癌胚抗原ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。实验原理大鼠癌胚抗原ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠癌胚抗原(CEA)水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入癌胚抗原(CEA),再与HRP标记的抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的癌胚抗原(CEA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠癌胚抗原(CEA)浓度。大鼠癌胚抗原ELISA试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(48ng/ml)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。大鼠癌胚抗原ELISA试剂盒操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。24ng/ml5号标准品150l的原倍标准品加入150l标准品稀释液12ng/ml4号标准品150l的5号标准品加入150l标准品稀释液6ng/ml3号标准品150l的4号标准品加入150l标准品稀释液3ng/ml2号标准品150l的3号标准品加入150l标准品稀释液1.5ng/ml1号标准品150l的2号标准品加入150l标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50l,待测样品孔中先加样品稀释液40l,然后再加待测样品10l(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50l,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50l,再加入显色剂B50l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.10.终止:每孔加终止液50l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。大鼠癌胚抗原ELISA试剂盒注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。大鼠癌胚抗原ELISA试剂盒保存条件及有效期1.试剂盒保存:2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-11-23 10:00
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