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GeoScopeTM MK IV 第四代雷达主机
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本文由 欧美大地仪器设备中国有限公司 整理汇编
2021-02-05 00:00 393阅读次数
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GeoScopeTM MK IV 第四代雷达主机
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GeoScopeTM MK IV 第四代雷达主机
- GeoScopeTM MK IV 第四代雷达主机[详细]
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2021-02-05 00:00
其它
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激光雷达声雷达雨雷达
- 激光雷达声雷达雨雷达[详细]
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2024-09-11 17:55
选购指南
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马弗炉IV
- 马弗炉IV[详细]
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2024-09-18 06:19
安装说明
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Multiscan++256通道主机
- 意大利森斯特制造的高安全等级SIL2/3气体报警探测系统,由SMART系列可燃和有毒气体探测器、GALILEO、Multiscan++256路SIL3控制主机构成,SMART系列探测器取得了Zxin欧标和ZG的消防(3C)等系列认证,采用先进的双传感技术(工业级红外传感器+工业级催化传感器)、(工业级电化学传感器+固态传感器),整个系统做到了真正的关键件双备份,真正达到了非常高的SIL3安全等级。
更多详情,请咨询我们: www.sensitron.cn www.nenvitech.cn
电话: 010-66422878, 66422879, 63621101[详细]
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2024-09-28 11:12
标准
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雷达测速仪
- 雷达测速仪[详细]
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2012-06-26 00:00
专利
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MRR-2 微型雨雷达/测雨雷达
- MRR-2 微型雨雷达/测雨雷达[详细]
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2010-11-28 00:00
课件
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德国VEGA雷达料位计、VEGA雷达液位计
- 上海维特锐特价供应德国VEGA雷达料位计、VEGA雷达液位计、VEGA超声波料位计、VEGA雷达导波料位计、VEGA射频导纳料位计、VEGA料位开关等产品。德国VEGA公司是世界上一家的物位及压力测量仪表的制造商,其主要产品有:VEGAPULS68,VEGASON超声波料位计、超声波液位计,VEGAFLEX导向微波式,VEGACAL电容式,VEGAVIB振棒式料位开关,VEGASWING液位开关,VEGABAR压力变送器等。德国VEGA的优点主要表现为:采用非接触式测量,不受介质特性影响(高温、高压、真空、粉尘、蒸汽及测量腐蚀性极强或混合度高的介质);可测量液体或固体介质,且混合或更换介质对于测量结果都没有影响,也不需要重新调试仪表;由于采用非接触式测量,VEGASON的维护保养非常简单。多年来,德国VEGA为冶金、矿产、建材、石化、能源、电力、化工、水处理、食品、医药、造纸、造船、机械制造等领域提供了优质的产品和服务。德国VEGA公司是世界上的物位测量仪表生产厂家。主要产品有雷达物位计,料位计,导波料位计,液位计,超声波料位计,振动液位开关,振动料位开关,电容式料位开关,雷达料位计,导波液位计,超声波液位计等。VEGASON64、VEGASON65、VEGASON66可以通过万向节安装对准介质表面。对于VEGASON64…66可以有四种不同的安装类型:VEGAA型:一体式,发兰型VEGA型:一体式,安装万向节VEGAC型:分体式,安装万向节VEGAD型:分体式,螺纹安装PULS61.XXAGPHAMXX(此系列量程0...20米,温度:-40℃...80℃,压力-1...30bar)PULS62.XXDAM5HKNAX(此系列量程0...35米,温度-40...200℃,压力-1...40bar)PS63.XXPAKHKMXX(此系列量程0...20米,温度-200℃...150℃,压力-1...16bar)PS65.CXLGDHAMXX(此系列量程0...35米,温度-40℃...150℃,压力-1...16bar)PULS66.XXHFK2VDMXX(此系列量程0...35米,温度-40℃...400℃,压力-1...160bar)PS67.XXBXCHAMXX(此系列量程0...15米,温度-40℃...80℃,压力-1...3bar)PULS68.XXEGD2HKMAX(此系列量程0...70米,温度-40℃...200℃,压力-1...40bar)SON61.XXAGHKNAX(此系列量程液体0.25...5米/固体0.25...2米,温度-40℃...80℃,压力-0.2...2bar)SON62.XXAGHKNAX(此系列量程液体0.4...8米/固体0.4...3.5米,温度-40℃...80℃,压力-0.2...2bar)SON63.XXAXHKMAX(此系列量程液体0.6...15米/固体0.6...7米,温度-40℃...80℃,压力-0.2...1bar)SON64.GXALPVDMAX(此系列量程液体1...25米/固体1...15米,温度-40℃...80℃,压力-0.2...0.5bar)SON65.XXBASVDMX(此系列量程液体0.8...45米/固体0.8...25米,温度-40℃...80℃,压力-0.2...0.5bar)FLEX61.XXCGD2HAMAX(此系列量程线缆可测范围0...32米,探杆可测0...4米,温度-40℃...150℃,压力-1...40bar)FLEX62.XXAGDIHDMX(此系列量程线缆可测范围0...60米,探杆可测0...6米,温度-40℃...150℃,压力-1...40bar)FLEX63.XXBFDFKMAX(此系列量程线缆可测范围0...32米,探杆可测0...4米,温度-40℃...150℃,压力-1...16bar)VEGA产品主要用于物位测量,压力测量,温度测量等,优点在于:-通过调制解调器(模拟,ISDN,GSM)或以太网(TCP/IP)远程询问/远程诊断-通过VisualVEGA或网页浏览器显示(比如:InternetExplorer)-通过其调整功能对信号进行分析处理,可以针对容器形状进行线性化处理,刻度可选-监控限定值,可以通过e-mail或SMS报警-通过e-mail或SMS在规定的时间自动传送物位数据-功能监控(输入端短路或断路,仪表故障)-导轨安装35x7.5符合EN50022,包括插座-调整显示元件带背光灯(可以远程设定plics?-传感器)-通过安装调试软件PACTwareTM的计算机调试(连接通过接口VEGACONNECT或RS232/以太网接口)-通过WEB-VV进行数据交换传感器输入:Multidrop方式的5个防爆的或15个HART传感器;继电器输出:1x故障信号;保护方式:IP30;工作电压:20…250VAC,DC[详细]
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2018-10-09 10:00
产品样册
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太阳电池IV测试仪
- 太阳电池IV测试仪[详细]
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2012-12-10 00:00
安装说明
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大鼠IV型胶原(Collagen IV)ELISA试剂盒说明书
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com大鼠IV型胶原(CollagenIV)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗大鼠CollagenIV单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的CollagenIV与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠CollagenIV,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,CollagenIV浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中CollagenIV浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):2000ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成2000ng/ml的溶液。设标准管8管,每管加入标本稀释液300ul。在**管中加入2000ng/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出300ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0ng/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应CollagenIV含量。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的CollagenIV检测浓度小于10ng/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的大鼠CollagenIV。不与大鼠其它因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于12%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:00
产品样册
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小鼠IV型胶原(Collagen IV)ELISA试剂盒说明书
- 小鼠IV型胶原(CollagenIV)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠CollagenIV单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的CollagenIV与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠CollagenIV,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫,在450nm处测OD值,CollagenIV浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中CollagenIV浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):2000ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成2000ng/ml的溶液。设标准管8管,每管加入标本稀释液300ul。在**管中加入2000ng/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出300ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0ng/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应CollagenIV含量。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的CollagenIV检测浓度小于10ng/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的小鼠CollagenIV。不与小鼠其它因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于12%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
产品样册
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大鼠 IV型胶原 (Co IV) ELISA 检测试剂盒
- 试验原理:CoIV试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知CoIV浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将CoIV和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中CoIV的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:800ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗CoIV抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料蒸馏水。加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。[详细]
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2018-09-19 10:01
产品样册
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中期因子(MK)检测试剂盒
- 中期因子(MK)检测试剂盒[详细]
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2015-06-24 00:00
专利
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大鼠MK(Midkine)ELISA试剂盒
- 大鼠MK(Midkine)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗大鼠Midkine单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的Midkine与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠Midkine,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,Midkine浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中Midkine浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):80ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。2.标准品液配制:使用前加入4ml蒸馏水混匀,配成20ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应Midkine含量。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的Midkine检测浓度小于16pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的大鼠Midkine。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于12%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:00
产品样册
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MIRA-36云雷达
- MIRA-36云雷达[详细]
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2010-11-29 00:00
选购指南
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工程雷达RD60
- 详情资料[详细]
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2017-12-05 10:16
产品样册
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雷达测速仪 ;HAD-SAR3000
- 雷达测速仪/车辆测速仪/型号;HAD-SAR3000雷达测速仪技术参数:测速范围5to199MPHor8to320KM/H测速视野范围球类:18米车:300米显示器3位数字显示是否可配三脚架是快速阅读模式有统计功能平均速度统计电源6节AAA碱性电池电源特点自动关机,低电量报警重量400克保修一年雷达测速仪技术特点:雷达测速仪Tracer可以测量垒球或者汽车等移动的物体,可以英里和公里切换,并有平均速度功能。[详细]
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2024-09-30 05:23
产品样册
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雷达测速仪 HAD-BASIC
- 雷达测速仪/车辆测速仪/测速雷达型号;HAD-BASIC技术指标:类型:手持式固定多普勒测速雷达静态测速范围:8~322kmh。环境要求:温度:零下30度~零上60度;湿度:0%~90%微波频率:24.15Ghz(K-band),发射角:15度;Zda发射功率:10毫瓦高度:193毫米长度:218毫米宽度:71毫米精度:+/-1kph测程:约1000米电池类型:AA型可充电镍氢电池组电池容量:960mAh机械指标:重量?700克(含电池)高度?193毫米长度?218毫米宽度?71毫米外壳材料?高强度聚碳酸酯塑料雷达测速仪HAD-BASIC型具体配置说明:测速雷达枪数量:1镍氢电池组数量:1测速雷达枪至打印机电缆线数量:1校验音叉数量:1充电器数量:1中文说明书数量:1微型打印机数量:1微型打印机充电器数量:1微型打印机说明书数量:1出厂精度检验卡数量:1[详细]
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2024-09-30 05:23
产品样册
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Star A系列主机升级软件
- Star A系列主机升级软件[详细]
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2013-03-12 00:00
安装说明
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美国Bacti-Cinerator IV红外灭菌器
- 美国Bacti-Cinerator IV红外灭菌器[详细]
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2024-09-11 19:52
专利
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大鼠(Rat)IV型胶原(Co IV)ELISA试剂盒英文说明书
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Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4Goatanti-RatCollagenTypeIVCollectSampleserumorbloodplasmaStorage:2-8°CPackagesize:96determinationsPRINCIPLEOFTHEMETHODTheCoIVkitisasolidphasephasesandwichenzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA).Samples,includingstandardsofknownCoIVconcentrationsandunknownsarepipettedintothesewells.Duringthefirstincubation,theCoIVantigenandabiotinylatedmonoclonalantibodyspecificforCoIVaresimultaneouslyincubated.Afterwashing,theenzyme(streptavidin-peroxydase)isadded.Afterincubationandwashingtoremovealltheunboundenzyme,asubstratesolutionwhichisactingontheboundenzymeisaddedtoinduceacolouredreactionproduct.TheintensityofthiscolouredproductisdirectlyproportionaltotheconcentrationofCoIVpresentinthesamples.REAGENTSPROVIDEDANDRECONSTTTUTIONREAGENTS(Storeat2-8℃)1×96WELLS0.5×96WELLSRECONSTTTUTION96/48-wellsmicrotiterplates10.5Ready-to-usePlastivcover21Ready-to-useStandard:800ng/ml1Vials(0.6ml)0.5Vials(0.3ml)Seereagentspreparationonpage3Blankcontrol1Vials(1.0ml)1Vials(0.5ml)Ready-to-useStandardDiluent1Vials(5ml)1Vials(2.5ml)Ready-to-useBiotinylatedanti-CoIV1Vials(6ml)1Vials(3.0ml)Ready-to-useStreptavidin-HRP1Vials(10ml)1Vials(5.0ml)Ready-to-useWashingBuffer1Vials(20ml)1Vials(10ml)50×concentrateSubstrateA1Vials(6.0ml)1Vials(3.0ml)Ready-to-useSubstrateB1Vials(6.0ml)1Vials(3.0ml)Ready-to-useStoppingSolution1Vials(6.0ml)1Vials(3.0ml)Ready-to-useSampleDiluent1Vials(12ml)1Vials(6.0ml)Ready-to-useMATERIALREQUIREDBUTNOTPROVIDEDlDistilledwaterlPipettes:10ul、50ul、100ul、200ul、1000ul。lVortexmixerandmagneticstirrer.SAFETYlForresearchuseonlylAvoidanyskincontactwithH2SO4andTMB.Incaseofcontact,washthoroughlywater.lDonoteat,drink,smokeorapplycosmeticswherekitreagentsareused.lDonotpipettebymouth.PROCEDURALNOTES/LAB.QUALITYCONTROLlWhennotinuse,kitcomponents首ldbestoredrefrigeratedorfrozenasindicatedonvialsorbottles.Allreagents首ldbewarmedtoroomtemperaturebeforeuse.Lyophilizedstandards首ldbediscardedafteruse.lOncethedesirednumberofstripshasbeenremoved,immediatelyresealthebagtoprotecttheremainingstripsfromedterioration.lCoverorcapallreagentswhennotinuse.lDonotmisorinterchangereagentsbetweendifferentlots.lDonotusereagentsbeyondtheexpirationdateofthekit.lUseacleandisposableplasticpipettetipforeachreagent,standard,orspecimenadditioninordertoavoidcross-contamination,forthedispensingofH2SO4andsubstratesolution,avoidpipetteswithmetalparts.lUseacleanplasticcontainertopreparethewashingsolution.lThoroughlymixthereagentsandsamplesbeforeusebyagitationorswir领.lAllresidualwashingliquidmustbedrainedfromthewellsbyefficientaspirationorbydecantationfollowedbytappingtheplateforcefullyonabsorbentpaper.Neverinsertabsorbentpaperdirectlyintothewells.lTheTMBsolutionislightsensitive.Avoidprolongedexposuretolight,also,avoidcontactoftheTMBsolutionwithmetaltopreventcolourdevelopment.WarningTMBistoxicavoiddirectcontactwithhands.Disposeoffproperly.Ifadarkbluecolourdevelopswithinafewminutesafterpreparation,thisindicatesthattheTMBsolutionhasbeencontaminatedandmustbediscarede.Readabsorbanceswithin1houraftercompletionoftheassay.lWhenpipettingreagents,maintainaconsistentorderofadditionfromwell-to-well.Thiswillensureequalincubationtimesforallwells.lRespectincubationtimesdescribedintheassayprocedure.SPECIMENCOLLECTION\PROCESSINGANDSTORAGElSerum---Avoidanyinintentionalstimulationofthecellsbytheprocedure.Usepyrogen\endotoxinfreecollectingtubes.Serum首ldberemovedrapidlyandcarefullyfromtheredcellsafterclothing.Forthat,afterclothing,centrifugeatapproximately1000×gfor10minandremoveserum.lPlasma---EDTA\citrateandheparinplasmacanbeassayed.Spinsamplesat1000×gfor30minremoveparticulates.Harvestplasma.lCellculturesupernatants---Removeparticulatesandaggregatesbyspinningatapproximately1000×gfor10min.lStorage---Ifnotanalyzedshortlyaftercollection,samples首ldbealiquoted(250-500ul)toavoidfreeze-thawcyclesandstoredfrozenat-70℃.Avoidmultiplefreeze-thawcyclesoffrozenspecimens.Whenpossible,avoiduseofbadlyhemolyzedorlipemicsera.Iflargeamountsofparticlesarepresent,this首ldberemovedpriortoassaybycentrifugationorfiltration.lRecommendation---Donotthawbyheatingat37℃or56℃.Thawatroomtemperatureandmakesurethatsampleiscompletelythawedandhomogenousbeforeassaying.PREPARATIONOFREAGENTSlStandards:Standardhavetobereconstituledwiththevolumeofstandardbufferdiluentindicatedonthevial.Thisreconstitutionproducesastocksolutionof800ng/mlCoIV.Allowstandardtostandfor5lminuteswithgentleswir领priortomakingdilutions.Serialdilutionsofstandardmustbemadebeforeeachassysandcannotbestored.800ng/ml(6Standard)Originaldensity50ul。400ng/ml(5Standard)100ul6Standard+100uldiludent200ng/ml(4Standard)100ul5Standard+100uldiludent100ng/ml(3Standard)100ul4Standard+100uldiludent50ng/ml(2Standard)100ul3Standard+100uldiludent25ng/ml(1Standard)100ul2Standard+100uldiludent0ng/mlBlankControl50ul。lWashingbuffer50×concentrate:Dilute50timesindistilledwater.ASSAYMETHODlBeforeuse,mixallreagentsthoroughlywithoutmakingfoam.lDeterminethenumberofmicrowellstripsrequiredtotestthedesirednumberofsamples,plusappropriatenumberofwellsneededforrunningblanksstandards.Eachsample,standardandblank首ldbeassayedinduplicate.Removesufficientmicrowellstripsfromthepouch.lAdd50ulofstandarddiluenttostandardwellsB1,B2,C1,C2,D1,D2,E1,E2,F1,F2.Reconstitutestandardvialwiththeappropriatevolumeasdescribedinthechapterreagentspreparation.Preparation.Pipet100ulofstandardintowellsA1andA2(seeplateschemebelow).Transfer50ulfromA1andA2toB1andB2wells.Mixthecontentsbyrepeatedaspirationsandejections.Takecarenottoscratchtheinnersurfaceofmicrowells.RepatthisprocedurefromthewellsB1,B2towellsC1,C2andfromwellsC1,C2toD1,D2andsooncreatingtwoparallelrowsofCoIVstandarddilutionsranging,Add50ulofstandarddiluenttotheblandwells.lDilutesamples1:1distribing50ulofsampleinto50ulofdilluent,Add50ulofdilutedsampletowells..lAdd50ulofdilutedbiotinylatedanti-CoIVtoallwells.lCoverwithaplatevoverandincubatefor1hourat37℃.lRemovethecoverandwashtheplateasfollows:⑴ aspiratetheliquidfromeachwell,⑵ dispensse0.3mlofwashingsolutionintoeachwell.⑶ Aspirateagainthecontetofeachwellafter0.5minute.⑷ Repeatsteps⑵and⑶threetimes.lDistribute80ulofstreptavidin-HRPsolutiontoallwells,includingblankwells.lCoverandincubate30minat37℃.lRemovethecoverandemptywells,Washmicrowellstripsaccordingtostep,Proceedimmediatelytothenextstep.lAdd50ulSubstrateAandSubstrateBtoeachwell。Incubatefor10minat37℃。lTheenzyme-substratereactionisstoppedbyquicklypipetting50ulofH2SO4.stopreagentintoeachwell,includingtheblankwells,tocompletelyanduniformlyinactivatetheenzyme.ResultsmustberedimmediatelyaftertheadditionofH2SO4.lReadabsorbanceofeachwellonaspectrophotometerusing450nmastheprimarywavelengthandoptionally620nm(610nmto650nmisacceptable)asthereferencewavelength.SUGGESTEDPLATESCHEMEStandardconcentrations(ng/ml)A800800samplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesampleB400400samplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesampleC200200samplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesampleD100100samplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesampleE5050samplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesampleF2525samplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesampleG00samplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesampleHsamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesampleLIMITATIONSOFTHEPROCEDUREDonotextrapolatethestandardcurvebeyondthemaxstandardcurvepoint.Thedose-responseisnon-linearinthisregionandgoodaccruacyisdifficulttoobtain.CALCULATIONOFRESULTSTheminimumdetectableconcentrationinthisassayisestimatedtobe1.0ng/ml[详细]
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2018-11-16 10:02
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