资料库
蛋白质纯化及复性
本文由 北京康林科技有限责任公司 整理汇编
2007-10-11 00:00 196阅读次数
文档仅可预览首页内容，请下载后查看全文信息！
立即下载
蛋白质纯化及复性
登录或新用户注册
请用手机微信扫描下方二维码登录 或注册新账号
微信扫码，手机电脑联动
更多资料
蛋白质纯化及复性 蛋白质纯化及复性[详细]
2007-10-11 00:00
应用文章
蛋白质复性基本信息说明 蛋白质因受某些物理或化学因素的影响，分子的空间构象被破坏，从而导致其理化性质发生改变并失去原有的生物学活性的现象称为蛋白质的变性作用（denaturation）。变性作用并不引起蛋白质一级结构的破坏，而是二级结构以上的高级结构的破坏，变性后的蛋白质称为变性蛋白。包涵体复性，蛋白质折叠，如果变性条件剧烈持久，蛋白质的变性是不可逆的。如果变性条件不剧烈，这种变性作用是可逆的，说明蛋白质分子内部结构的变化不大。这时，如果除去变性因素，在适当条件下变性蛋白质可恢复其天然构象和生物活性，这种现象称为蛋白质的复性（renaturation）。例如胃蛋白酶加热至80～90℃时，失去溶解性，也无消化蛋白质的能力，如将温度再降低到37℃，则又可恢复溶解性和消化蛋白质的能力。分离步骤分离包含体并复性蛋白质的操作步骤并不复杂，从破碎细胞开始，然后将细胞匀浆离心，回收包含体后，加入变性剂溶解包含体，使之成为可溶性伸展态，再除去变性剂使表达产物折叠恢复天然构象及活性。但在实际研究中发现，在体外折叠时，蛋白质分子间由于存在大量错误折叠和聚合，复性效率往往很低。究其原因，蛋白质的立体结构虽然由其氨基酸顺序决定，然而伸展肽链折叠为天然活性结构的过程还受到周围环境的影响。1995年，Karuppiah和Sharma发表文章，介绍了使用环糊精辅助碳酸酐酶B的复性［9］。环糊精由淀粉通过环糊精葡萄糖基转移酶降解制得，是由D-吡喃葡萄糖单元以α-1，4-糖苷键相互结合成互为椅式构象的环状低聚糖，其分子通常含有6～12个吡喃葡萄糖单元。有实用意义的是含6、7、8个吡喃葡萄糖单元的α、β、γ-环糊精，但α-环糊精空腔较小，γ-环糊精价格昂贵，常用的是β-环糊精［10］。环糊精的特征是能形成包络化合物，客体分子从宽口端进入其分子空腔。包络物的形成主要靠非共价键相互作用如范德华力、氢键、疏水相互作用、几何形状匹配等。利用环糊精的疏水性空腔结合变性蛋白质多肽链的疏水性位点，可以YZ其相互聚集失活，从而促进肽链正确折叠为活性蛋白质。1999年，Sundari等报道了用直链糊精辅助胰岛素、碳酸酐酶和鸡蛋白溶菌酶复性［11］，发现直链糊精基本上能够模拟环糊精在辅助蛋白质复性方面的作用，而且具有这样一些优点：直链糊精的螺旋结构形成一个疏水性空管，可以结合更多的蛋白质分子；在水中溶解度较高，有利于提高复性酶浓度和实验操作；价格比环糊精便宜，实际应用前景广阔。[详细]
2018-09-28 10:00
产品样册
蛋白质的分离纯化 蛋白质的分离纯化[详细]
2013-03-31 00:00
专利
蛋白质提取与纯化技术 蛋白质提取与纯化技术[详细]
2013-04-09 00:00
安装说明
蛋白质提取与纯化技术 蛋白质提取与纯化技术[详细]
2024-09-18 19:23
期刊论文
蛋白质提取与纯化技术.doc 蛋白质提取与纯化技术.doc[详细]
2024-09-14 01:23
专利
有机溶剂沉淀法分离与纯化蛋白质 有机溶剂沉淀法分离与纯化蛋白质[详细]
2024-09-17 02:00
操作手册
肉食的危害及蛋白质神话 肉食的危害及蛋白质神话[详细]
2024-09-11 18:03
报价单
PCR纯化试剂盒/DNA纯化试剂盒 PCR纯化试剂盒/DNA纯化试剂盒[详细]
2015-09-11 00:00
标准
PCR 纯化试剂盒/DNA 纯化试剂盒 PCR 纯化试剂盒/DNA 纯化试剂盒[详细]
2014-12-11 00:00
期刊论文
实验室超纯水设备的原理及纯化过程 实验室超纯水设备的原理及纯化过程[详细]
2024-09-18 18:06
报价单
乳及乳制品蛋白质掺假检测研究进展 乳及乳制品蛋白质掺假检测研究进展[详细]
2011-03-14 00:00
产品样册
非蛋白质脂肪族氨基酸及衍生物 非蛋白质脂肪族氨基酸及衍生物[详细]
2010-09-16 00:00
报价单
乳及乳制品蛋白质掺假检测研究进展 乳及乳制品蛋白质掺假检测研究进展[详细]
2024-09-29 00:41
报价单
酸纯化蒸馏器 酸纯化蒸馏器[详细]
2014-12-22 00:00
报价单
水纯化方法 水纯化方法[详细]
2014-03-28 00:00
产品样册
Milli-Q®IQ Element水纯化及取水装置产品样册 使用来自Milli-Q® IQ 7000或Milli-Q® IQ 7003/05/10/15系统的新制备超纯水，Milli-Q® IQ Element装置进一步对水进行纯化。在使用点取用的水被证实含有极低水平的元素污染物，从单个ppt到亚ppt检测水平。专门从事超痕量元素分析的独立实验室已经验证了本装置的水质。[详细]
2024-09-15 05:00
产品样册
可溶性包涵体蛋白复性（化学稀释II）试剂盒产品说明书 可溶性包涵体蛋白复性（化学稀释II）试剂盒产品说明书主要用途可溶性包涵体蛋白复性（化学稀释II）试剂是一种旨在使用化学稳定方法，使可溶性变性纯化蛋白重新折叠，恢复其蛋白功能和活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种可溶性纯化蛋白，尤其是细菌内重组蛋白（融合蛋白）以及盐酸胍或Sarkosyl可溶性处理的包涵体蛋白。可后续用于蛋白功能、酶活性等分析。产品即到即用，性能稳定，参数优化，操作便捷，复性效果理想。技术背景在蛋白纯化和融化过程中，特别是包涵体蛋白，变性剂（denaturant）提供了Z有效的手段，其获得的纯化蛋白属于变性蛋白（denaturedprotein）。为了使变性蛋白恢复为天然蛋白（nativeprotein），即具有蛋白质的自然结构和活性，需要进行蛋白复性（renaturation）或重新折叠（refolding）。蛋白复性是一个复杂的过程，诸如pH、离子强度、低分子添加剂、氧化还原电位（redoxpotential）和温度等物化因子，影响体外蛋白复性的效率。通常体外复性的方法包括稀释法和缓冲交换法。前者通过化学处理，而后者采用物理方法（例如透析、膜过滤（diafiltration）、凝胶过滤层析（gel-filtrationchromatography）等，以达到蛋白复性的效果。L-精氨酸（L－arginine）、聚乙二醇（PEG）、硫代甜菜碱（sulfobetaine）、去垢剂、变性剂等将影响化学稀释复性处理的效率。产品内容稳定液（ReagentA）20毫升产品说明书1份保存方式保存在4℃冰箱里，有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于样品保存的容器恒温摇床：用于反应孵育实验步骤准备好可溶性纯化变性蛋白样品移取50微升蛋白样品（10毫克/毫升）到1.5毫升离心管加入950微升稳定液（ReagentA）放进20℃恒温摇床孵育2小时，速度为200RPM（选择步骤）移取10微升进行生物检测，例如蛋白功能或活性：比色法、HPLC、受体结合实验等确定复性蛋白活性值即刻放进－70℃冰箱里保存注意事项本产品为20次操作操作时须戴手套本产品的复性效率达80％以上建议与本公司系列包涵体蛋白溶解试剂盒配套使用由于样品的特异性，用户可以优化温度、孵育时间、蛋白浓度，以获得Zda复性效率如果复性效率过低，建议使用可溶性包涵体蛋白复性（物理透析）试剂盒－HL30044.5如果获得满意的复性效果，用户可以按比例扩大复性容量本公司提供系列包涵体蛋白处理试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定无蛋白酶污染[详细]
2018-11-18 10:00
产品样册
蛋白质抽取 上海金穗生物公司是一家专业经营生物试剂、标准品、试剂耗材的公司，生物引擎在广大用户的帮助和支持下，经过不懈的努力，已成为国内生命科学领域产品的主要供应商之一，主要经营ELISA试剂盒、细胞、血清、抗体、金标试剂盒、生物试剂、耗材、培养基、一抗、二抗等产品，产品畅销国内大部分地区，销售额逐年稳步提高。上海金穗生物公司拥有雄厚的实力、合理的价格和优良的服务，能够及时解决和满足客户的各方面的需求，公司的服务和业务网络遍及全国，在同行获得一致好评。www.shjsbio.com[详细]
2018-10-08 10:00
产品样册
产品应用（27）核酸及蛋白质检测方法集锦（上） 如何能够准确和灵敏对核酸及蛋白质进行定量检测是许多实验成败与否的重要环节。Molecular Devices®酶标仪为核酸及蛋白质检测提供了多种可靠方案。结合SoftMax Pro® 软件强大的数据处理功能，可一键生成定量结果，并可根据用户需求定制格式并导出数据。[详细]
2021-02-19 14:03
应用文章
Copyright 2004-2025 yiqi.com All Rights Reserved , 未经书面授权 , 页面内容不得以任何形式进行复制
蛋白质复性基本信息说明
蛋白质提取与纯化技术
在线留言
沪公网安备 31011502008050号
参与评论
登录后参与评论