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反相柱和阴离子交换柱在DNA纯化上的应用（英文）
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本文由 上海迪发仪器仪表有限公司 整理汇编
2018-09-04 10:00 3636阅读次数
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- 粪便DNA高质纯化试剂盒产品说明书主要用途粪便DNA高质纯化试剂是一种旨在经过标准分离法以后，由粪便（人体、动物等）中分离获得的DNA，进行二度亲和纯化，Zda限度地去除复杂又难以去除的蛋白、金属成分、杂质等非核酸类物质的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其应用于即时PCR、RLPF分析、测序、杂交、遗传鉴定、突变分析、性别鉴定、司法鉴定等。产品即到即用，性能稳定，操作简单，纯度出色，重复性好，堪称国际上同类产品**。技术背景粪便中含有许多污染成分，降解DNA和YZPCR反应。针对标准处理无法有效地去除顽固干扰因子的情况下，运用特殊亲和技术，达到高度纯化的效果。产品内容缓冲液（ReagentA）2毫升亲和液（ReagentJ）2毫升产品说明书1份保存方式保存在4℃冰箱里，有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于DNA纯化操作的容器微型台式离心机（例如EPPENDORF5415）：用于沉淀反应物恒温水槽：用于孵育反应物实验步骤1．准备好从1克粪便样品分离的DNA产物（100微克DNA总量）2．移入到1.5毫升离心管3．加入适量的缓冲液（ReagentA）到总容量为100微升4．加入100微升亲和液（ReagentB）（注意：使用前，先摇匀沉淀的亲和液（ReagentB））5．用手充分混匀6．放进56℃恒温水槽孵育30分钟，期间用手混匀一次7．放进微型台式离心机离心5分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如EPPENDORF5415）8．小心移出180微升上清液到新的1.5毫升离心管9．移出适量DNA溶液进行后续PCR反应或保存在－20℃冰箱里注意事项1．本产品为20次（1克粪便样品的DNA产物）操作或50次（200毫克粪便样品的DNA产物）操作2．操作时，须戴手套3．根据用户样品量大小，相应调整试剂用量4．亲和液（ReagentB）使用前，须摇匀5．建议使用粪便DNA分离试剂盒（HL20011.1）作为标准分离法操作6．本公司提供系列粪便核酸纯化试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定纯度优异[详细]
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2018-11-18 10:00
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- 本公司新推出的全新细菌基因组纯化试剂盒，操作简便，纯化量大，可纯化革兰氏阳性和阴性菌的基因组DNA。细菌基因组DNA提取试剂盒使用说明本试剂盒可用于革兰氏阴性和阳性菌的基因组DNA提取，由细菌重悬液、裂解液、蛋白沉淀液以及DNA溶解液组成。可从1-5ml菌液中提取基因组DNA。整个提取过程不超过45分钟。提取过程包括：1菌液离心，重悬。2裂解菌体，释放基因组DNA。3盐析沉淀蛋白，分离DNA。4异丙醇沉淀脱盐并浓缩。570%乙醇清洗，晾干并用DNA溶解液溶解。本试剂盒采用复合裂解液，其中含有YZDNA酶的成分，在加热（65°C）状态下，可保证完整的细菌基因组DNA的充分裂解释放，本试剂盒即可提取异丙醇沉淀时，罕见浑浊的蛋白质杂质的共沉淀。提取的基因组可用于PCR扩增、内切酶消化以及膜杂交等。一、试剂盒组成（本试剂盒提供的组份,至少可提取100份1-5ml菌液基因组DNA的纯化，每种组份均有足够的富余量）1．复合裂解液：30ml1瓶。2．蛋白沉淀液：300ml1瓶。3．DNA溶解液：20ml1瓶。4．操作说明书一份。二、本试剂盒未提供，须用户自备的试剂为：异丙醇，70%乙醇（国产分析纯）。三、提取操作：1．菌液离心：取革兰氏阴性菌菌液1-2ml；或者革兰氏阳性菌菌液2-5ml，1000rpm离心1分钟。2．加入细菌重悬液100ul，震荡使菌体重悬。3．将复合裂解液置65°C水浴加热，使结晶成分溶解，每个细菌重悬液中分别加入300ul的复合裂解液。4．混璇器震荡混匀10秒，置65°C水浴中反应10分钟（革兰氏阴性菌），20分钟（革兰氏阳性菌）。5．各管中加入300ul蛋白沉淀液。上下颠倒5-6次使两者混匀。6．13000-16000×g,离心3-5分钟。7．将上清液转移至新的离心管中（注意：由于有些细菌含有多糖或者脂蛋白成分，离心后会出现细胞成分上浮的情况，此时取漂浮层下的均一透明液体），加入等体积异丙醇，此时可见透明的絮状物，混匀后离心，同步骤5，吸去上清。8．离心管中加入200ul，70%的乙醇溶液，来回倒置，清洗管壁，离心同上。9．移去70%乙醇，倒置离心管于干净的滤纸上，自然干燥10-15分钟，加入DNA溶解液100ul。10．快速漩涡震荡1-2秒，使DNA溶解液冲刷到所有沉淀的DNA。11．将纯化的全血基因组置65C水浴1小时，或4C过夜使DNA充分溶解（要求不严格的PCR试验可缩短时间或省去该步），轻轻弹动管壁有助于溶解基因组DNA可直接进行PCR等下一步操作。四、注意事项：1.用户可选择使用RNaseA,使用方法为：在第3步完成后1.5ulRNaseA,混匀后，37C孵育15分钟，冷却至室温。（RNaseA的配法：将RNaseA溶于TEbuffer中，浓度为4mg/ml,煮沸10分钟，以去除DNase,分装后-20C保存；也可购买配好的试剂使用。）2.革兰氏阳性菌由于细胞壁的存在，纯化的量较阴性菌要少一倍以上。3.提取得DNA样本在70%乙醇中，存于-80C，可长期保存。五、储存条件：本试剂盒在室温条件下可保存一年。[详细]
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- 干燥设备在工业上的应用1．喷雾干燥器（a）催化剂的干燥如丙烯腈催化剂、轻油转化催化剂、中温变换催化剂、高压甲醇催化剂及低压甲醇催化剂等。（b）洗涤剂的干燥如合成洗衣粉、十二醇硫酸钠及皂基等。（c）染料和颜料的干燥如活性翠蓝、咔叽绿B、增白剂及铬黄等。（d）化学肥料的干燥如尿素及氮磷钾复合肥料等。（e）聚合物的干燥如聚氯乙烯醋酸酯、聚乙烯醇、尿素甲醛树脂、三聚氰胺甲醛树脂、苯酚甲醛树脂、聚丙烯酸酯、聚碳酸酯、苯乙烯丁二烯树脂及聚甲醛等。（f）陶瓷原料的干燥如铁氧体、碳化钨、皂石、高岭土、氧化铝及钛酸盐等。（g）矿物的干燥如铜精矿、镍精矿、铂精矿、氧化铜精矿、铝精矿、锌精矿、锡精矿、沉淀铜、沉淀氢氧化铝、沉淀碳酸镍，贵重金属泥、皂土、冰晶石及磷酸盐等。（h）农药的干燥如除草剂、杀虫剂及杀菌剂等。（i）药品干燥如维生素、KJ素、酶、糊精、肝精、培养基及中草药植物抽取液等。（j）速溶食品的干燥如全脂奶粉、脱脂奶粉、麦乳精、可溶性鱼粉、鱼浆及鱼蛋白质等。2．流化床干燥器（a）单层圆筒形流化床已用于硫酸铵、氯化铵、无水亚硫酸钠、食盐、聚四氟乙烯、葡萄糖酸钙、碱性青莲染料、催化剂颗粒等物料的干燥。（b）多层圆筒形流化床干燥器已用于涤纶切片、聚丙烯树脂、尼龙1010、邻氯苯甲酸、四环素、土霉素、氯霉素、合霉素、肝粉、糖粉、S.M.P、A.P.C等物料的干燥。（c）卧式多室流化床干燥器已用于聚氯乙烯树脂、聚丙烯树脂、尼龙1010、邻氯苯甲酸、四环素、土霉素、氯霉素、合霉素、肝粉、糖粉、S.M.P、A.P.C等物料的干燥。（d）带有搅拌器的流化床已用于硫酸铵、硫酸铜、氯化钠、氨基酸、酐酪素、聚丙烯树脂、酚醛树脂等物料的干燥。（e）惰性粒子流化床干燥器已用于代森锌、颜料、染料、硅藻土、腐殖酸钠、腐殖酸等物料的干燥。（f）振动流化床已用于糖、石棉矿、奶粉等物料的干燥。（g）喷雾流化造粒干燥已用于尿素、葡萄糖、溴化钠、溴化钾、溴化铵、丙二酸钠、醋酸钾、氯化钙等物料的干燥。3．气流干燥器（a）直管式气流干燥器已用于硫酸铵、磷酸三钠、磷酸氢钙、苏打、氯化锂、亚硫酸钠、硼砂、保险粉、催化剂、聚氯乙烯、聚乙烯、对氨基酚、醋酸钠、草酸、717离子交换树脂、、水杨酸钠、阿司匹林、扑热息痛、安乃近、吡唑酮、四环素、金霉素等物料的干燥。（b）脉冲式气流干燥器已用于聚氯乙烯、聚丙烯、硫酸钠、焦亚硫酸钠、苯甲酸、糠氯酸等物料的干燥。（c）倒锥式气流干燥器已用于小苏打、聚氯乙烯、重铬酸钾等物料的干燥。（d）旋风式气流干燥器已用于四环素、合霉素、氯霉素、土霉素、YY淀粉、硬脂酸镁、二乙苯胺、磷酸镁、磷酸钙等物料的干燥。（e）带分散器的气流干燥器已用于淀粉、氧化铁、粉末活性炭、沉淀炭粉、粘土、醋酸纤维絮等物料的干燥。4．回转圆筒干燥机已用于硫酸铵、尿素、焦亚硫酸钠、钙镁磷肥、轻质碳酸钙、磷矿、硫精矿、石棉矿等物料的干燥。5．滚筒干燥机用于硫化蓝、淀粉、轻质碳酸钙、苯甲酸钠、三盐基硫酸铝、葡萄糖、草酸、酵母、煤粉、味精、硝酸钠、立德粉、增白剂、重碱、拉开粉、电玉粉、碳酸氢钠、盐基锌、硫酸铬、骨胶、活性炭等物料的干燥。6．箱式、洞道式干燥器常压箱式干燥器已用于纸张、皮革、棉纱、人造丝束、羊毛、染料、颜料、盐类、催化剂半成品、催化剂、陶瓷、耐火砖、木材等物料的干燥。真空箱式干燥器已用于电玉粉、香料、人造纤维、皂基、糖、味精、催化剂、丁苯橡胶等物料的干燥。7．真空耙式干燥器已应用于还原染料中间体、蒽醌磺酸、还原橄榄绿R、卡普龙聚合体、二氨基蒽醌、水杨酸中间体等物料的干燥。8．竖式（移动床）干燥器已用于矿石、煤、涤纶切片、合成树脂、谷物等物料的干燥。9．红外线干燥器已用于食品、木材、皮革、纸张、浆纱、各种油漆涂料层等物料的干燥。10．高频干燥器已用于烟叶捆、玻璃钢、皮革、布匹、陶瓷坯、木材等物料的干燥。上海凯朗仪器设备厂专业生产鼓风干燥箱、真空干燥箱、马弗炉、生化培养箱、二氧化碳培养箱、电热恒温培养箱、试验箱、恒温摇床、水槽、水浴锅等实验室设备。咨询电话：021-57180039[详细]
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