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瓦氏黄颡鱼在稻田和池塘养殖中的生长性能和肌肉品质比较
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2024-09-15 21:13 761阅读次数
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瓦氏黄颡鱼在稻田和池塘养殖中的生长性能和肌肉品质比较
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瓦氏黄颡鱼在稻田和池塘养殖中的生长性能和肌肉品质比较
- 瓦氏黄颡鱼在稻田和池塘养殖中的生长性能和肌肉品质比较[详细]
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2024-09-15 21:13
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EN12469和NSF49标准在生物安全柜性能和测试中的比较
- EN12469和NSF49标准在生物安全柜性能和测试规矩中的比较 1、对安全柜性能和测试的规定 EN12469和NSF49都是以规范性能为基础的标准,换句话说,标准并不侧重安全柜结构设计,不是通过细节规格要求去规定生产商如何制作安全柜;相反的,生产商拥有很大的自由去设计自己的安全柜,只要可以符合性能测试标准。EN12469和NSF49的主要内容是规定各项测试的参数和合格标准(大约70%的内容),测试包括有人员、试验品和环境保护的微生物测试、气流速度数据(进气流速率、进气流体积、下沉气流速率和均匀性测试)和气流烟雾测试测试等,下文将会着重介绍各项测试以及两大标准的区别。[详细]
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2018-08-21 10:00
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2024-09-20 13:31
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黄颡鱼神经肽Y(NP-Y)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
- 黄颡鱼神经肽Y(NP-Y)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定黄颡鱼血清,血浆及相关液体样本中神经肽Y(NP-Y)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中黄颡鱼神经肽Y(NP-Y)水平。用纯化的黄颡鱼神经肽Y(NP-Y)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入神经肽Y(NP-Y),再与HRP标记的神经肽Y(NP-Y)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的神经肽Y(NP-Y)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中黄颡鱼神经肽Y(NP-Y)浓度。黄颡鱼神经肽Y(NP-Y)酶联免疫分析样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。黄颡鱼神经肽Y(NP-Y)酶联免疫分析操作步骤1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为1200ng/L,800ng/L,400ng/L,200ng/L,100ng/L)。2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。黄颡鱼神经肽Y(NP-Y)酶联免疫分析试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围:50ng/L-1500ng/L保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-11-04 10:00
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2018-09-14 10:00
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