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鸡TNF-a试剂盒,肿瘤坏死因子α(TNF-a)ELISA检测试剂盒
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本文由 本生(天津)健康科技有限公司 整理汇编
2024-11-25 13:27 161阅读次数
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本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的
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鸡TNF-a试剂盒,肿瘤坏死因子α(TNF-a)ELISA检测试剂盒
- 本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的[详细]
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2024-11-25 13:27
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鸡肿瘤坏死因子α试剂盒说明书(TNF-a)说明书下载
- 鸡肿瘤坏死因子α(TNF-a)ELISA试剂盒试剂仅供研究使用试验原理:TNF-A试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知TNF-A浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将TNF-A和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中TNF-A的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制:试剂盒成份96孔配置48孔配置96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)塑料膜板盖1块半块标准品:400pg/ml1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)标准品稀释缓冲液1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)生物素标记的抗TNF-A抗体1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)亲和链酶素-HRP1瓶(12ml)1瓶(5ml)洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)自备材料:1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。样品收集、处理及保存方法:1、血清……操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清2、和红细胞迅速小心地分离。2、血浆……EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液……1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆……将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。5、保存……如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。鸡肿瘤坏死因子α试剂盒操作注意事项:●试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。●实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。●不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。●使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。●使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。●底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。●加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。●按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。安全性:1.避免直接接触终止液和底物A、B,一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实难中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。试剂的准备:1.标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:400pg/ml(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul200pg/ml(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液100pg/ml(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液50pg/ml(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液25pg/ml(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液12.5pg/ml(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0pg/ml(空白对照)原倍浓度不用稀释直接加入50ul2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。试剂盒性能:1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。ELISA试剂盒操作步骤:1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育45分钟。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入100ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育5分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断与分析:1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的TNF-A标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的TNF-A含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度,再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。3、检测值范围:0-400pg/ml4、敏感度:1.0pg/ml[详细]
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2018-11-16 10:02
产品样册
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兔(Rabbit)肿瘤坏死因子a(TNF-a)ELISA试剂盒说明书
- 兔(Rabbit)肿瘤坏死因子a(TNF-a)ELISA试剂盒说明书用途:兔TNF-αELISA试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、缓冲液中细胞上清液及各种体液中的TNF-α。本试剂盒可以检测天然和重组的TNF-α。本试剂盒专用于科研、而非用于临床诊断。试验原理:兔TNF-α试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知TNF-α浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将TNF-α和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中TNF-α的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:400pg/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗TNF-α抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(60ml)1瓶(30ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500u、1000lul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1.标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:400pg/ml(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。200pg/ml(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液100pg/ml(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液50pg/ml(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液25pg/ml(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液12.5pg/ml(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0pg/ml(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。2.洗涤缓冲液(20×)的稀释:蒸馏水20倍稀释。操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度(pg/ml)A400400样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B200200样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C100100样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D5050样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E2525样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F12.512.5样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品结果分析以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的TNF-α标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的TNF-α含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。局限兔(Rabbit)肿瘤坏死因子a(TNF-a)ELISA试剂盒说明书6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能兔(Rabbit)肿瘤坏死因子a(TNF-a)ELISA试剂盒说明书1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与人其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。兔(Rabbit)肿瘤坏死因子a(TNF-a)ELISA试剂盒说明书[详细]
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2024-09-29 02:40
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兔(rabbit)肿瘤坏死因子-a(TNF-a) 试剂盒操作及注意
- 兔(rabbit)肿瘤坏死因子-a(TNF-a)试剂盒操作及注意一、试剂组成1、精密度微孔板MicrotestPlates96wells2、酶标偶合液EnzymeConjugate12.0ml3、标准品Standard 5x1.0ml4、呈色剂A、SubstrateA6.0ml5、呈色剂B、SubstrateB6.0ml6、终止液StopSolution6.0ml7、浓缩洗涤液(1:20)RinsingBuffer60.0ml8、5倍样品稀释液dilution15.0m二、注意事项此试剂为体外检测试剂,效期内使用,试剂应视为传染物,不同总批号的试剂不能混用。使用前应将盒内各试剂取出,室温放置至少30分钟。保存于2-8℃,请勿冷冻,有效期请见盒内标示。浓缩洗涤液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟三、操作步骤每孔分别加入已稀释的样品、标准品各100ul。将板置于37℃温育30分钟。甩尽板中液体,用应用洗涤液进行洗涤,每次停留30秒,在纸上拍干。重复操作5次。每孔加入酶标偶合液100ul。将板置于37℃温育30分钟。甩尽板中液体,用应用洗涤液进行洗涤,每次停留30秒,在纸上拍干。重复操作5次。每孔加底物A、底物B各50ul,置37℃恒温箱反应15分钟。8.每孔加终止液50ul,于450nm波长读O.D.值。四、结果判断仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值。检测值范围:0400pg/ml敏感度:1.0pg/mlTC-axbz-210鼠杂交瘤细胞K6H6/B5TC-axbz-211大鼠脑膜细胞RMCTC-axbz-295小鼠腺泡细胞癌细胞MPC-83TC-axbz-296小鼠白血病细胞C3TC-axbz-297小鼠β胰岛素瘤细胞RIN-m5FTC-axbz-298小鼠自发高乳腺癌细胞TA2TC-axbz-299小鼠淋巴瘤细胞Nb2-11TC-axbz-300小鼠瘤细胞NS-1TC-axbz-301小鼠肾癌细胞Kert-3人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)ELISA试剂盒HumanHepatitisCvirusIgM,HCV-IgMELISA试剂盒人丙型肝炎IgG(HCV-IgG)ELISA试剂盒HumanHepatitisCvirusIgG,HCV-IgGELISA试剂盒人糖蛋白130(gp130)ELISA试剂盒Humanglucoprotein130,gp130ELISA试剂盒人促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)ELISA试剂盒Humancorticotropin-releasingfactor,CRF人去氨加压素/1-去氨基-8-右旋-精氨酸加压素(dDAVP)ELISA试剂盒HumanDesmopressin/1-desamino-8-D-argininevasopressin,dDAVPELISA试剂盒人毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型M3(M-AChRM3)ELISA试剂盒HumanmuscarinicacetylcholinereceptorM3,M-AChRM3ELISA试剂盒人睾酮受体(TR)ELISA试剂盒HumanTestoteronerecepter,TRELISA试剂盒人毒蕈碱型乙酰胆碱受体(M-AChR)ELISA试剂盒Humanmuscarinicacetylcholinereceptor,M-AChRELISA试剂盒人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA试剂盒humanglycoprotein49A,Gp49aELISA试剂盒人YZ素β-B(Inhbb)ELISA试剂盒humaninhibinbeta-B,InhbbELISA试剂盒人食欲素受体(OXR)ELISA试剂盒HumanOrexinreceptor,OXRELISA试剂盒人生长激素释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA试剂盒Humangrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISA试剂盒人钙调素(CAM)ELISA试剂盒Humancalmodulin,CAMELISA试剂盒人真胰岛素(TI)ELISA试剂盒Humantrueinsulin,TIELISA试剂盒人重酒石酸去甲肾上腺素(NE-B)ELISA试剂盒HumanNoradrenalineBitartas,NE-BELISA试剂盒人前列环素(PGI)ELISA试剂盒Humanprostacycline,PGIELISA试剂盒人降钙素原(PCT)ELISA试剂盒HumanProcalcitonin,PCTELISA试剂盒[详细]
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2018-09-28 10:00
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人(human)肿瘤坏死因子a(TNF-a) 使用方法
- 本试剂盒仅供研究使用标本:血清或者血浆试剂组成精密度微孔板96孔(MicrotitrationStrips)1块2~8℃干燥保存酶标偶合液(Conjugate)1瓶12.0毫升2~8℃冷藏保存标准品(Standard)5瓶各1.0毫升2~8℃冷藏保存呈色剂A(SubstrateA)1瓶6.0毫升2~8℃避光冷藏保存呈色剂B(SubstrateB)1瓶6.0毫升2~8℃避光冷藏保存终止液(StoppingSolution)1瓶6.0毫升室温保存20倍浓缩洗涤液(RinsingBufferx20)1瓶60.0毫升2~8℃冷藏保存5倍浓缩样品稀释液(Diluentx5)1瓶15.0ml2~8℃冷藏保存英文说明书,中文说明书各一份室温保存二、注意事项1.此试剂为体外检测试剂,效期内使用,试剂应视为传染物,不同总批号的试剂不能混用。使用前应将盒内各试剂取出。室温放置至少30分钟,浓缩洗涤液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟。浓缩样品稀释液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟若24小时内进行实验,标本可存放于2~8℃。不需及时实验,标本-20℃保存,避免反复冻融。在反复清洗微孔板,并扣干微孔中的残余液体,否则将降低极ng确度,造成吸光度偏离的假像。加样完毕后,应注意轻微摇动微孔反应条,以便使孔中的液体充分混匀。试剂盒保存于2~8℃,请勿冷冻,有效期请见盒内标示。三、实验前准备1.使用前应将盒内各试剂取出,室温放置至少30分钟。2.准备各种实验仪器及材料,如微量移液器,吸头,医用蒸馏水等3.浓缩洗液与医用蒸馏水119倍稀释后成为应用洗涤液4.浓缩样品稀释液与医用蒸馏水14倍稀释成应用样品稀释液5.用应用样品稀释液来稀释样品,按照1:100的体积比来稀释样品如10μl的样品加入到1ml的应用样品稀释液中,充分混匀待用。)[详细]
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2018-10-03 10:00
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鸡肿瘤坏死因子(TNF-)ELISA试剂盒
- 鸡肿瘤坏死因子(TNF-)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-28 00:53
专利
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鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒说明书
- 鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。用纯化的鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入肿瘤坏死因子α(TNF-α),再与HRP标记的肿瘤坏死因子α(TNF-α)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度。鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(128ng/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒操作步骤标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。64ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液32ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液16ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液8ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液4ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2019-01-02 10:00
产品样册
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鸡肿瘤坏死因子α试剂盒方法
- 鸡肿瘤坏死因子α试剂盒实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。用纯化的鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入肿瘤坏死因子α(TNF-α),再与HRP标记的肿瘤坏死因子α(TNF-α)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度。鸡肿瘤坏死因子α试剂盒组成120倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液3ml×1瓶2酶标试剂3ml×1瓶8标准品(128ng/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×4条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液3ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液3ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液3ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。鸡肿瘤坏死因子α试剂盒操作步骤:1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。64ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液32ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液16ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液8ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液4ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。鸡肿瘤坏死因子α试剂盒注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-11-15 10:03
产品样册
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鸡ELISA 检测试剂盒说明书
- 鸡ELISA 检测试剂盒说明书[详细]
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2016-03-16 00:00
其它
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大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒
- 大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒[详细]
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2015-07-03 00:00
选购指南
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猪 (Pig) 肿瘤坏死因子-αELISA检测试剂盒
- 试验原理:TNF-α试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知TNF-α浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将TNF-α和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中TNF-α的浓度呈比例关系。猪(Pig)肿瘤坏死因子-αELISA检测试剂盒试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:8.0ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(4.0ml)1瓶(2.0ml)即用型生物素标记的抗TNF-α抗体1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。猪(Pig)肿瘤坏死因子-αELISA检测试剂盒操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液5、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。猪(Pig)肿瘤坏死因子-αELISA检测试剂盒试剂的准备1.标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:8.0ng/ml(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。4.0ng/ml(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液2.0ng/ml(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液1.0ng/ml(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液0.5ng/ml(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液0.25ng/ml(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0ng/ml(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入60ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。猪(Pig)肿瘤坏死因子-αELISA检测试剂盒结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的TNF-α标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的TNF-α含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-8.0ng/ml4、敏感度:0.01ng/ml[详细]
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2018-09-27 10:00
产品样册
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鸡肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3 ELISA试剂盒
- 上海恒远生物长期供应进口ELISA试剂盒、免疫组化试剂盒、放免试剂盒、金标试剂盒、Omega试剂盒,种属标本齐全,有专门针对人血清、血浆、全血、分泌物、尿液、细胞培养上清液、组织匀浆、组织液等标本的试剂盒;另有可检测人源、小鼠、大鼠、豚鼠、猪、狗、猴、羊、牛、鸡、兔等各种样本的科研试剂盒。用于试剂盒生产的抗体全部美国进口。客户使用恒远生物优质产品的同时,可以享受本公司完善的售后服务和技术支持。Elisa试剂盒测试注意事项如下:1浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。2各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。3封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。4底物请避光保存。ELISA小常识:基因工程试剂对免疫测定技术发展的影响:免疫测定技术的基础在于抗原抗体之间的特异结合反应,所以任何优质的诊断试剂离不开优质的原料,如抗原抗体,酶等。以前用于免疫测定的抗原通常为各种纯化抗原,而抗体则为纯化抗原免疫动物后获得的多克隆抗体和使用杂交瘤技术得到的单克隆抗体,而抗原或抗体的标记物如酶标结合物则通过各总化学合成方法制备。近年来,随着分子生物学的发展,使用基因工程方法制备各种特殊的抗原或抗体及其酶结合物等免疫测定试剂几成为现实的新一代试剂,各种新型使用的测定方法也不断出现。[详细]
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2018-11-16 10:02
产品样册
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鸡白介素1ELISA检测试剂盒使用方法
- 鸡白介素1ELISA检测试剂盒使用方法[详细]
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2015-04-21 00:00
其它
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鸡白介素1ELISA检测试剂盒说明书
- 鸡白介素1ELISA检测试剂盒说明书[详细]
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2015-06-04 00:00
操作手册
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鸡心肌肌钙蛋白ELISA 检测试剂盒
- 鸡心肌肌钙蛋白(cTn-I)ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用试验原理:鸡心肌肌钙蛋白ELISA检测试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知cTn-I浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将cTn-I和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中cTn-I的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:80ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(4.0ml)1瓶(2.0ml)即用型生物素标记的抗cTn-I抗体1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1.鸡心肌肌钙蛋白ELISA检测试剂盒应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液5、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1.标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:80ng/ml(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。40ng/ml(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液20ng/ml(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液10ng/ml(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液5.0ng/ml(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液2.5ng/ml(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0ng/ml(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入60ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的cTn-I标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的cTn-I含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-80ng/ml4、敏感度:0.1ng/ml[详细]
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2018-11-04 10:00
产品样册
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人肿瘤坏死因子-αELISA检测试剂盒说明书下载
- 人肿瘤坏死因子-αELISA检测试剂盒说明书下载[详细]
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2015-06-15 00:00
应用文章
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猪 (Pig) 肿瘤坏死因子-α(TNF-α) ELISA 检测试剂盒
- 猪(Pig)肿瘤坏死因子-α(TNF-α)ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用试验原理:TNF-α试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知TNF-α浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将TNF-α和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中TNF-α的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:8.0ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(4.0ml)1瓶(2.0ml)即用型生物素标记的抗TNF-α抗体1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料蒸馏水。加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:8.0ng/ml(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。4.0ng/ml(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液2.0ng/ml(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液1.0ng/ml(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液0.5ng/ml(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液0.25ng/ml(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0ng/ml(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入60ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度(ng/ml)A8.08.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B4.04.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C2.02.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D1.01.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E0.50.5样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F0.250.25样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的TNF-α标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的TNF-α含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-8.0ng/ml4、敏感度:0.01ng/ml[详细]
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2018-09-14 10:00
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肿瘤坏死因子受体2(TNF-R2) ELISA 检测试剂盒
- ELISA检测试剂盒试验原理: TNF-R2试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知TNF-R2浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将TNF-R2和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中TNF-R2的浓度呈比例关系。 ELISA检测试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:8.0ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗TNF-R2抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料蒸馏水。加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。ELISA检测试剂盒操作注意事项试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。[详细]
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2018-09-19 10:00
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猪肿瘤坏死因子α(TNF-α)定量检测试剂盒(ELISA)
- 上海金穗生物科技有限公司是一家专门从事生物技术相关产品研发和销售的综合性生命科学公司,公司以超前的市场观念、良好的产品形象以及雄厚的技术实力取得了多家国内外知名公司的代理权,目前拥有国内外各产品,坐拥上海,辐射全ZG。面向各地科研院所、高等院校、卫生检验检疫部门、工农业部门、环境保护部门相关实验室和制药、食品、饮料、化工、畜牧、水产等企业提供服务。市场业务遍布全国各地,公司始终坚持不懈地跟踪Zxin科研方向,掌控Zxin国际前沿科学新技术,不断进取,为广大客户提供**、Z快的服务和优质产品而不懈努力。400-021-1237[详细]
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2018-10-08 10:00
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人肿瘤坏死因子α(TNF-α)酶联免疫检测ELISA试剂盒
- 人试剂盒,人肿瘤坏死因子α(TNF-α)酶联免疫检测ELISA试剂盒使用说明书国内权威的科研试剂供应商,乔羽生物专业经营进口分装和原装、国产的Elisa试剂盒,品质保证,技术严格,无效果退款退货。Elisakit规格:48孔配置/96孔配置酶标试剂:3ml×1瓶(48)/6ml×1瓶(96)本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆上海乔羽生物专业供应:使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。试验原理:TNF-α试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知TNF-α浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将TNF-α和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中TNF-α的浓度呈比例关系。[详细]
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2018-11-09 10:00
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