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ELISA的操作要点
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本文由 上海希美化学有限公司 整理汇编
2024-09-13 23:03 541阅读次数
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ELISA的操作要点
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ELISA的操作要点
- ELISA的操作要点[详细]
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2024-09-13 23:03
标准
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ELISA操作要点
- ELISA操作要点[详细]
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2024-09-28 05:15
产品样册
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酶联免疫吸附测定(ELISA)操作要点
- 酶联免疫吸附测定(ELISA)操作要点[详细]
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2024-09-15 17:52
专利
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食品安全elisa试剂盒技术的-操作要点
- ELISA技术的-操作要点:优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点.本文将叙述板式注意要点,要详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出准确的结果.在ELISA中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物.加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡.常见elisa试剂盒:1、细胞因子检测试剂盒:如白介素、选择素、集落刺激因子,肿瘤坏死因子,干扰素,转化生长因子,趋化因子,细胞因子受体,粘附分子,生长因子,凋亡因子等等2、心肌梗塞检测试剂盒:如肌钙蛋白,肌红蛋白,C-反应蛋白等等3、内分泌检测试剂盒:如甲状腺,,性激素,孕酮,睾酮,生长激素,生长抑素,内皮素,皮质醇,骨钙素,催乳素,促肾上腺皮质激素,促卵泡素,雌二醇,雌三醇等等4、肝纤维化检测试剂盒:如纤维连接蛋白,透明质酸,胶原,基质金属蛋白酶YZ因子,基质金属蛋白酶,层粘蛋白等等5、自身免疫检测试剂盒:如甲状腺,抗核抗体,类风湿因子,循环免疫复合物,抗胰岛细胞抗体等等6、肿瘤标志物检测试剂盒:如肿瘤标志物,组织多肽抗原,肿瘤相关因子等等7、优生优育检测试剂盒:8、传染病检测试剂盒如百日咳,EB病毒,A族链球菌等等9、特种蛋白检测试剂盒如免疫球蛋白,抗链O-aso,类风湿因子RF,C反应蛋白,微量白蛋白,β-2微球蛋白human,铁蛋白,转铁蛋白transferrin等等按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂.ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的.自配的缓冲液应用pH计测量较正.从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用.试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存.[详细]
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2024-10-05 18:10
产品样册
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人ELISA试剂盒操作步骤的注意要点
- 我司将在本章中正确讲解人ELISA试剂盒各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球兔ELSIA试剂盒,国外试剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,必能得出。Z后将人ELISA试剂盒板放在湿纱布上。湿盒应先放在保温箱中预温至规定的温度,特别是在气温较低的时候更应如此。无论是水浴还是湿盒温育,反应板均不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。室温温育的反应,人ELISA试剂盒操作时的室温应严格限制在规定的范围内,标准室温温度是指20-25℃,但具体操作时可根据的要求控制温育。人ELISA试剂盒原材料批量进口与自配的特殊配方稀释剂(预包被微孔板的批内和批间变异系数均小于10%),经过严格交叉反应和干扰测试及稳定性试验,明确了其高灵敏度对检测的样本达到好的性能。ELISA(酶联免疫吸附分析)通常用于定性和定量评估细胞因子、趋化因子、生长因子、磷酸化后目标、免疫球蛋白和其他免疫标记,保证了产品的高品质性能的同时兼顾成本。欢迎来电咨询我司人Elisa试剂盒产品:人腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)ELISA试剂盒人酰化刺激蛋白(ASP)ELISA试剂盒人血纤肽/纤维蛋白肽A(FPA)ELISA试剂盒人细胞外基质磷酸糖蛋白(MEPE)ELISA试剂盒人细胞毒素相关蛋白A(CagA)ELISA试剂盒人胃泌素释放多肽(GRP)ELISA试剂盒人复制蛋白A(RPA-70)ELISA试剂盒人未磷酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1ELISA试剂盒人嗜铬蛋白A(CgA)ELISA试剂盒人视网膜母细胞瘤YZ蛋白(pRB)ELISA试剂盒人生长激素结合蛋白(GHBP)ELISA试剂盒人神经激肽B(NKB)ELISA试剂盒人软骨寡聚基质蛋白(COMP)ELISA试剂盒人去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)ELISA试剂盒人羟脯氨酸糖蛋白(HRGP)ELISA试剂盒人强啡肽(Dyn)ELISA试剂盒人胃泌素释放肽前体(ProGRP)ELISA试剂盒[详细]
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2018-09-19 10:00
产品样册
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气相色谱仪检测器操作要点
- 气相色谱仪检测器操作要点[详细]
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2010-08-23 00:00
期刊论文
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薄层层析操作要点
- 铺板用的匀浆不宜过稠或过稀:过稠,板容易出现拖动或停顿造成的层纹;过稀,水蒸发后,板表面较粗糙。匀浆配比一般是硅胶G:水=1:2~3,硅胶G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2。研磨匀浆的时间,根据经验来定,与空气湿度有关,一般通过拿起研棒时匀浆下滴的情况来判断,越稠越难下滴。匀浆的稀稠除影响板的平滑外,也影响板涂层的厚度,进一步影响上样量。涂层薄,点样易过载;涂层厚,显色不那么明显。通常,板的质量对薄层鉴别的影响不是很大,影响Zda的是展开剂的配制和展开系统的饱和。[详细]
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2018-08-10 10:58
产品样册
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士锋生物酶联免疫吸附试验(ELISA)操作要点
- 士锋生物酶联免疫吸附试验(ELISA)操作要点[详细]
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2014-01-14 00:00
其它
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电热恒温培养箱操作要点
- 电热恒温培养箱操作要点[详细]
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2012-01-06 00:00
实验操作
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高效液相色谱仪操作三要点
- GX液相色谱仪操作三要点[详细]
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2024-09-29 14:09
专利
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操作生化培养箱时应该注意的几个要点
- 操作生化培养箱时应该注意的几个要点[详细]
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2024-09-15 14:00
标准
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操作生化培养箱时应该注意的几个要点
- 操作生化培养箱时应该注意的几个要点[详细]
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2024-09-20 13:35
操作手册
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ELISA的技术要点--试剂的制备
- ELISA的技术要点--试剂的制备试剂的制备 ELISA的主要试剂有固相的抗原或抗体、酶标记的抗原或抗体和与标记酶直接关联的酶反应底物。以下分别介绍这些试剂的原料和制备方法。 (一)固相载体 检测中可作ELISA中载体的物质很多,Z常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯为塑料,可制成各种形式。在ELISA测定过程中,它作为载体和容器,不参与化学反应。重要的是聚苯乙烯具有较强的吸附蛋白质的性能,抗体或蛋白质抗原吸附其上后依然保留原来的免疫活性。加之它的价格低廉,所以被普遍采用。 ELISA载体的形状主要有三种:小试管、小珠和微量反应板。小试管的特点是兼作反应的容器,Z后放入分光光度计中比色。小珠一般为直径0.6cm的圆球,表面经磨砂处理后吸附面积大增加。如用特殊的洗涤器,在洗涤过程中使圆珠滚动淋洗,效果更好。Z常用的载体为微量反应板,专用于ELISA测定的产品也称为ELISA试剂盒,国际通用的标准板形是8×12的96孔式。为便于作少量标本的检测,有制成8联或12联孔条的,放入座架后,大小与标准ELISA板相同。ELISA试剂盒的特点是可以同时进行大量标本的检测,并可在特定的比色计上迅速读出结果。现在已有多种自动化仪器用于微量反应板型的ELISA检测,包括加样、洗涤、保温、比色等步骤,对操作的标准化有重要意义。 良好的ELISA试剂盒应该是吸附性能好,空白值低,孔底透明度高,各板之间和同一板各孔之间性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于配料的不同和制作工艺的差别,各种产品的质量差异很大。因此每一批号的聚苯乙烯制品在使用前须检查其性能。常用的检查方法为:以一定浓度的人IgG(一般为10ng/ml)包被ELISA板各孔后,每孔内加入适当稀释的酶标抗人IgG抗人IgG抗体,保温后洗涤,加底物显色,终止酶反应后分别测每孔溶液的吸光度。控制反应条件,使各读数在0.8左右。计算所有读数的平均值。所有单个读数与平均读数之差应小于10%。 与聚苯乙烯类似的塑料为聚氯乙烯。作为ELISA固相载体,聚氯乙烯板的特点为质软板薄,可切割,价廉、但光洁度不如聚苯乙烯板。聚氯乙烯对蛋白质的吸附性能比聚苯乙烯高,但空白值有时也略高。 为比较不同固相在某一ELISA测定中的优劣,可用以下方法加以检验:用其它免疫学测定方法选出一个典型的阳性标本和一个典型的阴性标本。将它们分别进行一系列稀释后,在不同的固相载体上按预定的ELISA操作步骤进行测定,然后比较测定结果。在哪一种载体上阳性结果与阴性结果判别Zda,这种载体就是这一ELISA测定的Z合适的固相载体。 除塑料制品外,固相酶免疫测定的载体还有两种材料:一是微孔滤膜,如硝酸纤维素膜、尼龙膜等。另一种载体是以含铁的磁性微粒制作的,反应时固相微粒悬浮在溶液中,具有液相反应的速率,反应结束后用磁铁吸引作为分离的手段,洗涤也十分方便,但需配备特殊的仪器。 (二)抗原和抗体 在ELISA实施过程中,抗原和抗体的质量是实验是否成功的关键因素。本法要求所用抗原纯度高,抗体效价高、亲和力强。 ELISA所用抗原有三个来源:天然抗原、重组抗原和合成多肽抗原。天然抗原取材于动物组织或体液、微生物培养物等,一般含有多种抗原成分,需经纯化,提取出特定的抗原成分后才可应用,因此也称提纯抗原(purifiedantigen)。重组抗原(recombinantantigen)和多肽抗原(peptideantigen)均为人工合成品,使用安全,而且纯度高,干扰物质少。因此虽然制备合成抗原有较高的技术难度且要求较为昂贵的仪器设备和试剂,其应用仍十分普遍,特别是对那些天然抗原不易得到的试验,更显出其独到之处。 用于ELISA的抗体有多克隆的和单克隆的。抗血清成分复杂,应从中提取IgG才可用于包被固相或酶标记。含单克隆抗体的小鼠腹水中的特异性抗体含量较高,有时可适当稀释后直接进行包被。制备酶结合物用的抗体的质量往往要求有较高的纯度。经硫酸铵盐析纯化的IgG可进一步用各种分子筛层析提纯。也可用亲和层析法提纯特异性IgG,如用酶消化IgG后提取的Fab片段,则效果更好。 (三)免疫吸附剂 固相的抗原或抗体称为免疫吸附剂。将抗原或抗体固相化的过程称为包被(coating)。由于载体的不同,包被的方法也不同。如以聚苯乙烯ELISA板为载体,通常将抗原或抗体溶于缓冲液(Z常用的为pH9.6的碳酸缓冲液)中,加于ELISA板孔中在4℃,经清洗后即可应用。如果包被液中的蛋白质浓度过低,固相载体表面有能被此蛋白质完全覆盖,其后加入的血清标本和酶结合物中的蛋白质也会部分地吸附于固相载体表面,Z后产生非特异性显色而导致本底偏高。在这种情况下,如在包被后再用1%~5%牛血清白蛋白包被一次,可以消除这种干扰。这一过程称为封闭(blocking)。包被好的ELISA试剂盒在低温可放置一段时间而不失去其免疫活性。 (四)酶和底物 ELISA中所用的酶要求纯度高、催化反应的转化率高、专一性强、性质稳定、来源丰富、价格不贵、制备成的酶标抗体或抗原性质稳定,继续保留着它的活性部分和催化能力。**在受检标本中不存在与标记酶相同的酶。另外它的相应底物应易于制备和保存,价格低廉,有色产物易于测定,光吸收高。ELISA中Z常用的酶为辣根过氧化酶(HRP)和从牛肠粘膜或大肠杆菌提取的碱性磷酸酶(AP)。HRP在蔬菜作物辣根中含量很高,纯化方法也不复杂。它是一种糖蛋白,含糖量约18%;分子量为44kD;是一种复合酶,由主酶(酶蛋白)和辅基(亚铁血红素)结合而成的一种卟啉蛋白质。主酶为无色糖蛋白,在275nm波长处有Z高吸收峰;辅基是深棕色的含铁卟啉环.[详细]
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2018-09-27 10:00
产品样册
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臭氧老化试验箱应用领域和操作要点
- 臭氧老化试验箱应用领域和操作要点[详细]
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2011-11-14 00:00
课件
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双层不锈钢玻璃反应釜操作要点
- 双层不锈钢玻璃反应釜操作要点[详细]
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2016-06-20 00:00
产品样册
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BURKERT电磁阀操作注意要点资料
- BURKERT电磁阀操作注意要点资料我公司为德国BURKERT宝德的经销商,专业销售BURKERT全系列产品,主要产品有角座阀,电磁阀,蒸汽阀,隔膜阀,膜片阀等产品,电磁阀选用主要提供,阀体材质,介质,流量,压力,电压等。德国BURKERT电磁阀的工作电源德国BURKERT电磁阀的工作电源有直流和交流之分,在使用电磁阀时必须注意。否则,直流电磁阀接入了交流电源,其电磁吸力很小导致无法工作;如果交流电磁阀接入了直流电源,就会出现电流过大使线圈温度升高把电磁阀烧坏。电磁阀的供电电源应与铭牌上的额定电压相符,因为电源电压过高,会使电磁阀电流过大而温升异常,且电磁吸力太大导致冲击力过大,而影响阀的可靠性。如果电源电压过低,则电磁阀电磁吸力下降过多,会影响到开阀能力,其难以可靠工作。德国BURKERT电磁阀介质的属性德国BURKERT电磁阀的属性包括温度、粘度、腐蚀性等,电磁阀选型的时候这些也是很重要的参考因素。而每个电磁阀产品,其介质的适应性能均有一定的限定范围,在实际的工作中,介质的属性又会发生一些变化,所以使用电磁阀产品的时候,要注意介质的属性的变化。BURKERT电磁阀操作注意要点资料德国BURKERT电磁阀介质的属性德国BURKERT电磁阀的属性包括温度、粘度、腐蚀性等,电磁阀选型的时候这些也是很重要的参考因素。而每个电磁阀产品,其介质的适应性能均有一定的限定范围,在实际的工作中,介质的属性又会发生一些变化,所以使用电磁阀产品的时候,要注意介质的属性的变化。德国BURKERT电磁阀的流量大小和口径过大的电磁阀口径会增加费用成本,过小的口径则会影响电磁阀的工作效率,工作压差是指电磁阀能可靠开、关的阀入口与出口间的压力差,是电磁阀能否正常工作的关键,也是选择时S要考虑的问题,可根据工艺管路条件等参数,再结合电磁阀的选型样本来进行选择。BURKERT电磁阀操作注意要点资料[详细]
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2018-09-21 10:01
产品样册
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霉菌培养箱的日常操作使用维护及注意要点
- 霉菌培养箱的日常操作使用维护及注意要点:霉菌培养箱一般应用于YL卫生、生物制药、农业科研、环境保护等研究应用领域,是水体分析、BOD测定,细菌、菌种、微生物的培养、保存和植物栽培、育种实验生物培养的专用设备。1、插上电源插座(电源应有良好接地),按下电源开关,显示屏亮,此时显示屏所显示的是培养箱室内的实际温度和湿度。2、如箱内不需杀菌时,应将面板上的杀菌开关置于“关”的位置。3.当温度设定好之后,不能随便将控温旋钮来回多次旋转,以免压缩机启动频繁,造成压缩机出现过载现象,影响压缩机的使用寿命。4.若湿度长期不用时,请将盒内水倒尽.5、当使用温度较低时,应定期倒掉位于箱内底部积水盘内的积水。6、本机背部装有二组保险盒,2A?为制冷加热负载保险丝盒,8A?为控制电源保险丝盒,若机器运转出现故障,例如控温失灵,不加热或不制冷,须切断电源,分别检查保险丝是否完好,再检查相应部位。7、搬运时必须小心,搬运时与水平面的夹角不得小于45°。8.温度调节:按下温度设定按钮,数字显示即为设定值,旋转温度调节电位器到所需温度值,松开按钮,数字显示即为培养室内的实际温度。此时如培养箱内的实际温度比设定温度小,加热指示灯亮,加热器开始加热;如培养箱内的实际温度比设定温度大,制冷指示灯亮,制冷系统开始制冷;如加热指示灯与制冷指示灯均暗,则培养箱处于恒温状态。9.用霉菌培养箱底部调节螺钉调节高度,使箱体安置平稳。10.当湿度传感器长时间处于高湿状态,会形成结露即湿度显示值会居高不下,若需要准确的湿度显示值,则应关机后,将培养箱箱门打开,让湿度传感器处于室温中,自然干燥后,即可继续使用。11、加湿器若有故障,请按加湿器使用说明书上的保修点,就近修理。12、加湿器的安装:将加湿器的电源插头插在仪器背面的电源插座上,再将仪器的加湿管与加湿器相连,相连处一定要紧密连接。加湿器水箱里加水一定要按说明书上正确操作。13、为了保持设备的美观,不准用酸或碱及其它腐蚀性物品来擦表面,箱内可以用干布定期擦干。14、当仪器在停止使用时,应拔掉电源插头。请各位客户在使用霉菌培养箱过程中,能注意以上几点,做好霉菌培养箱日常维护.15、湿度调节:按下湿度设定按钮,数字显示即为设定值,旋转湿度调节电位器到所需湿度值,松开按钮,数字显示即为霉菌培养箱内的实际湿度。当培养室内的实际湿度比设定的湿度小时,此时加湿对培养室内加湿,加湿指示灯亮;当培养室内的实际湿度比设定的湿度值大时,此时加湿器停止工作,加湿指示灯灭。上海凯朗仪器设备厂专业生产鼓风干燥箱、真空干燥箱、马弗炉、二氧化碳培养箱、霉菌培养箱、电热恒温培养箱、试验箱、恒温摇床、水槽、水浴锅等实验室设备。[详细]
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2018-10-01 10:00
产品样册
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色谱仪常识:色谱仪各种检测器操作要点
- 色谱仪常识:色谱仪各种检测器操作要点[详细]
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2011-11-07 00:00
选购指南
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LC-TS3系列数显式铁水分析仪操作要点
- LC-TS3系列数显式铁水分析仪操作要点[详细]
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2015-08-17 00:00
标准
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背负式机动喷雾喷粉机操作要点
- 背负式机动喷雾喷粉机操作要点[详细]
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2024-09-27 23:57
专利
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