FH0007-鸡胚胎成纤维细胞；UMNSAH-DF-1

本文由 上海富衡生物科技有限公司 整理汇编

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  NCTCclone929[Lcell,L-929,derivativeofStrainL]（小鼠成纤维细胞）1.OriginandGeneralCharacteristicsCellNameNCTCclone929[Lcell,L-929,derivativeofStrainL]OrganismmusmusculusAge100daysTissuesubcutaneousconnectivetissue;areolarandadiposeMorphologyfibroblastGrowthPropertiesadherentDescriptionsThiscelllinehasbeentestedandfoundnegativeforectromeliavirus(mousepox).BiosafetyLevel12.CultureConditionsandHand领CompleteGrowthMediumMEM(150410)+10%FBS(164210500)+1%-P/S(180120)Removeanddiscardculturemedium.BrieflyrinsethecelllayerwithDPBSsolutiontoremovealltracesofserumthatcontainstrypsininhibitor.Add1.0to2.0mLofTrypsin-EDTAsolutiontoflaskandobservecellsunderaninvertedmicroscopeuntilcelllayerisdispersed(usuallywithin3Subculturingto5minutes).Cellsthataredifficulttodetachmaybeplacedat37°Ctofacilitatedispersal.Add4.0to6.0mLofcompletegrowthmediumandaspiratecellsbygentlypipetting.Addappropriatealiquotsofthecellsuspensiontonewculturevessels.SubcultivationRatio1:3-1:5MediumRenewal2to3timesperweekCryopreservationFreezemedium:50%basalmedium+40%FBS+10%DMSOStoragetemperature:liquidnitrogenvaporphaseCultureConditionsAtmosphere:Air,95%;CO2,5%Temperature:37℃3.SpecialFeaturesoftheCellLineTumorigenicYes,inimmunosuppressedmice.EffectsYes,inimmunosuppressedmice.ReceptorExpressionAntigenExpressionGeneExpressionApplicationsToxicitytesting;Transfectionhost收到常温细胞后如何处理？（细胞培养详细操作步骤请参照邮件附件）首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。[详细]

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