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FH0832-小鼠胚胎成纤维细胞;Balb-3T3
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FH0832-小鼠胚胎成纤维细胞;Balb-3T3
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- NCTCclone929[Lcell,L-929,derivativeofStrainL](小鼠成纤维细胞)1.OriginandGeneralCharacteristicsCellNameNCTCclone929[Lcell,L-929,derivativeofStrainL]OrganismmusmusculusAge100daysTissuesubcutaneousconnectivetissue;areolarandadiposeMorphologyfibroblastGrowthPropertiesadherentDescriptionsThiscelllinehasbeentestedandfoundnegativeforectromeliavirus(mousepox).BiosafetyLevel12.CultureConditionsandHand领CompleteGrowthMediumMEM(150410)+10%FBS(164210500)+1%-P/S(180120)Removeanddiscardculturemedium.BrieflyrinsethecelllayerwithDPBSsolutiontoremovealltracesofserumthatcontainstrypsininhibitor.Add1.0to2.0mLofTrypsin-EDTAsolutiontoflaskandobservecellsunderaninvertedmicroscopeuntilcelllayerisdispersed(usuallywithin3Subculturingto5minutes).Cellsthataredifficulttodetachmaybeplacedat37°Ctofacilitatedispersal.Add4.0to6.0mLofcompletegrowthmediumandaspiratecellsbygentlypipetting.Addappropriatealiquotsofthecellsuspensiontonewculturevessels.SubcultivationRatio1:3-1:5MediumRenewal2to3timesperweekCryopreservationFreezemedium:50%basalmedium+40%FBS+10%DMSOStoragetemperature:liquidnitrogenvaporphaseCultureConditionsAtmosphere:Air,95%;CO2,5%Temperature:37℃3.SpecialFeaturesoftheCellLineTumorigenicYes,inimmunosuppressedmice.EffectsYes,inimmunosuppressedmice.ReceptorExpressionAntigenExpressionGeneExpressionApplicationsToxicitytesting;Transfectionhost收到常温细胞后如何处理?(细胞培养详细操作步骤请参照邮件附件)首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。[详细]
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2018-11-19 10:00
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- 小鼠心脏成纤维细胞说明书1、组织来源:小鼠乳鼠2、产品规格:25cm2培养瓶3、细胞简介:小鼠心脏成纤维细胞分离自正常大鼠心脏组织,细胞呈梭型、多边形等不规则形状。体外培养的小鼠心脏成纤维细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。本公司生产的小鼠心脏成纤维细胞采用酶解法制备而来,细胞总量约为1×106个/瓶,细胞纯度可达85%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。二、使用方法客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。1、取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置6-8小时,以稳定细胞状态;2、待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养;3、细胞传代(1)吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;(2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,37℃温浴1-2min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入完全培养液终止消化;(3)用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5ml,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;(4)待细胞完全贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。(备注:由于实验所用试剂与操作环境的不同,以上方法供各实验室参考。)三、注意事项1、培养基于4℃条件下可保存3-6个月;2、在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作;3、传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态;4、该细胞只可用于科研。[详细]
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