小鼠心脏成纤维细胞说明书

本文由 上海谷研实业有限公司 整理汇编

2024-10-03 20:19 648阅读次数

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• 小鼠心脏成纤维细胞说明书

  小鼠心脏成纤维细胞说明书1、组织来源：小鼠乳鼠2、产品规格：25cm2培养瓶3、细胞简介：小鼠心脏成纤维细胞分离自正常大鼠心脏组织，细胞呈梭型、多边形等不规则形状。体外培养的小鼠心脏成纤维细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。本公司生产的小鼠心脏成纤维细胞采用酶解法制备而来，细胞总量约为1×106个/瓶，细胞纯度可达85%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。二、使用方法客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。1、取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置6-8小时，以稳定细胞状态；2、待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养；3、细胞传代（1）吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次；（2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，37℃温浴1-2min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；（3）用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5ml，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；（4）待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。（备注：由于实验所用试剂与操作环境的不同，以上方法供各实验室参考。）三、注意事项1、培养基于4℃条件下可保存3-6个月；2、在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作；3、传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态；4、该细胞只可用于科研。[详细]

  2024-10-03 20:19

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• 小鼠成纤维细胞

  NCTCclone929[Lcell,L-929,derivativeofStrainL]（小鼠成纤维细胞）1.OriginandGeneralCharacteristicsCellNameNCTCclone929[Lcell,L-929,derivativeofStrainL]OrganismmusmusculusAge100daysTissuesubcutaneousconnectivetissue;areolarandadiposeMorphologyfibroblastGrowthPropertiesadherentDescriptionsThiscelllinehasbeentestedandfoundnegativeforectromeliavirus(mousepox).BiosafetyLevel12.CultureConditionsandHand领CompleteGrowthMediumMEM(150410)+10%FBS(164210500)+1%-P/S(180120)Removeanddiscardculturemedium.BrieflyrinsethecelllayerwithDPBSsolutiontoremovealltracesofserumthatcontainstrypsininhibitor.Add1.0to2.0mLofTrypsin-EDTAsolutiontoflaskandobservecellsunderaninvertedmicroscopeuntilcelllayerisdispersed(usuallywithin3Subculturingto5minutes).Cellsthataredifficulttodetachmaybeplacedat37°Ctofacilitatedispersal.Add4.0to6.0mLofcompletegrowthmediumandaspiratecellsbygentlypipetting.Addappropriatealiquotsofthecellsuspensiontonewculturevessels.SubcultivationRatio1:3-1:5MediumRenewal2to3timesperweekCryopreservationFreezemedium:50%basalmedium+40%FBS+10%DMSOStoragetemperature:liquidnitrogenvaporphaseCultureConditionsAtmosphere:Air,95%;CO2,5%Temperature:37℃3.SpecialFeaturesoftheCellLineTumorigenicYes,inimmunosuppressedmice.EffectsYes,inimmunosuppressedmice.ReceptorExpressionAntigenExpressionGeneExpressionApplicationsToxicitytesting;Transfectionhost收到常温细胞后如何处理？（细胞培养详细操作步骤请参照邮件附件）首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。[详细]

  2018-11-19 10:00

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