细胞与分化间的相互作用

本文由 上海谷研实业有限公司 整理汇编

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• 细胞与分化间的相互作用

  细胞与分化间的相互作用细胞间的相互作用是各式各样的，可以是诱导作用，也可以是YZ作用。就作用方式来说，有的作用需要细胞的直接接触，另一些所需要的可能是间隔一定距离的化学物质的扩散。①诱导作用。两栖类胚胎背部的外胚层细胞，在脊索中胚层的作用下，分化为神经细胞，以后发育为神经系统。这种中轴器官的诱导作用在脊椎动物具有普遍性，一般认为，脊索中胚层细胞释放某种物质，诱导外胚层细胞分化为神经组织。②YZ作用。如在蝾螈幼虫或成体摘除水晶体后，可以从背部的虹彩再生出一个新的。进一步的分析指出，再生水晶体的能力局限在虹彩背部的边缘层。如把这部分组织移到另一个摘除水晶体的眼睛，不是位于背部，而是使它位于腹部，仍旧可以由它再生出水晶体。细胞分化中基因表达的调节控制是一个十分复杂的过程，在蛋白质合成的各个水平，从mRNA的转录、加工到翻译，都会有调控的机制。在DNA水平也存在调控机制（如基因的丢失、放大、移位重组、修筛以及染色质结构的变化等）。不同的细胞在其发育中的基因表达的调节控制不同；相同的细胞在其发育的各阶段中，调节控制的机制不同。[详细]

  2024-10-03 20:16

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  2016-09-07 00:00

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  2024-09-10 23:19

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  漩涡间相互作用及空穴生成机理[详细]

  2024-10-08 03:07

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• Insphero 3D悬滴板：研究肿瘤与间质细胞的相互作用

  文章标题：（文章请下载查看）DevelopmentofanInnovative3DCellCultureSystemtoStudyTumour-StromaInteractionsinNon-SmallCellLungCancerCells采用创新的三维细胞培养系统，研究非小细胞肺癌细胞与间质细胞的相互作用介绍：使用新颖的三维（3D）共培养模型----InspheroAG研发的GravityPLUS3D悬滴培养系统（GravityPLUS3Dcellcultureplatform),研究非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系和肺成纤维细胞的共培养。使用GravityPLUS3D悬滴培养系统可以研究肿瘤-间质间的相互作用，是更接近于体内的细胞培养模型。方法：使用多孔悬滴微量培养板（GravityPLUS3Dcellcultureplatform），研究单细胞的3D培养和多细胞的3D共培养。在悬滴培养板中，研究NSCLC细胞系之A549细胞的单独培养、NSCLC细胞系之Colo699细胞的单独培养、A549与肺成纤维细胞的共培养、和Colo699与肺成纤维细胞的共培养。肿瘤微球体形成并稳定后（培养5天和10天后），使用AnnexinV/PropidiumIodide（膜联蛋白V/碘化丙啶）对微球体染色并用流式观测；肿瘤成纤维细胞微球体形成后用电镜（SEM）、荧光显微镜、半薄切片和免疫组化（IHC）观测；除了这些常规组织学检测，还用免疫组化的方法检测钙粘素、波形蛋白、肿瘤增殖抗原Ki67、纤连蛋白、角蛋白7和平滑肌肌动蛋白(a-SMA)的表达量。结果：A549单细胞微球体与A549与成纤维细胞培养共培养的微球体相比，生存能力要差一些；而Colo699微球体的生存能力要比Colo699共培养的强。ki67的表达量在单细胞培养和共培养也存在很大的差异。波形蛋白表达量的增加和钙粘素表达量的减少都能被监测到，表明三维培养过程中存在间质表型的转变。除此之外，只有成纤维细胞系与A549细胞系共培养的时候，才有表达a-SMA，从而表明一种间质状态向另一种间质状态转换。结论：证明GravityPLUS3D悬滴培养系统（GravityPLUS3Dcellcultureplatform)是研究肿瘤微球体共培养的很有利的工具。而且，这些微球体可以进一步探讨肿瘤与间充质间的相互作用，可以更好的反映出肿瘤细胞在体内微环境的状态。Insphero开发的GravityPLUS3D悬滴培养系统将会为研发剂及寻找生物标记物做出一些贡献。Insphero3D悬滴培养板产品介绍：http://www.qbiotec.com/qxky001-Brand-24075/[详细]

  2018-11-01 10:00

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• 细胞间粘附分子试剂检测说明

  细胞间粘附分子试剂检测说明本试剂盒仅供研究使用。检测范围：：96T5ng/L-240ng/L使用目的：：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中细胞间粘附分子1(ICAM-1)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1)水平。用纯化的大鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入细胞间粘附分子1(ICAM-1)，再与HRP标记的细胞间粘附分子1(ICAM-1)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的细胞间粘附分子1(ICAM-1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（480ng/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。240ng/L5号标准品150l的原倍标准品加入150l标准品稀释液120ng/L4号标准品150l的5号标准品加入150l标准品稀释液60ng/L3号标准品150l的4号标准品加入150l标准品稀释液30ng/L2号标准品150l的3号标准品加入150l标准品稀释液15ng/L1号标准品150l的2号标准品加入150l标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50l，待测样品孔中先加样品稀释液40l，然后再加待测样品10l（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50l，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50l，再加入显色剂B50l，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50l，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结：：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2024-10-03 09:18

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  2024-09-18 19:03

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  电话：021-6533363955229872网址：http://www.westang.com大鼠细胞间粘附分子（sICAM-1）ELISA试剂盒（用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内）原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗大鼠sICAM-1单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的sICAM-1与单抗结合，加入生物素化的抗大鼠sICAM-1，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，Z后加终止液硫酸，在450nm处测OD值，sICAM-1浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中sICAM-1浓度。试剂盒组成（2-8℃保存）酶标板（CoatedWells）96孔酶标抗体工作液（EnzymeConjugate）12ml10×标本稀释液（SampleBuffer）12ml20×浓缩洗涤液（WashBuffer）50ml标准品（Standards）：1.2ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗体工作液（BiotinylatedAntibody）12ml终止液（StopSolution）12ml准备试剂与收集血样1.收集标本：血清、血浆（EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，避免反复冻融。标本测定前用标本稀释液至少作1：100稀释（取10ul，加标本稀释液990ul,稀释100倍）。2.标准品液配制：使用前加入0.3ml蒸馏水混匀，配成4000pg/ml的溶液。设标准管8管，每管加入标本稀释液200ul。在**管中加入4000pg/ml的标准品溶液200ul混匀后用加样器吸出200ul，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出200ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）检测程序1.加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板：同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应sICAM-1含量，再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的sICAM-1检测浓度小于15pg/ml。2.特异性：可同时检测重组或天然的大鼠sICAM-1。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性：板内、板见变异系数均小于10％。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！[详细]

  2018-09-13 10:00

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  鼓风干燥箱箱体与工作室间的作用[详细]

  2014-05-05 00:00

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