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大鼠褪黑激素英文说明书上海易利为您提供
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2018-10-01 10:00
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上海易利为您提供大鼠CD163说明书
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上海易利为您提供大鼠雌二醇(E2)说明书
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2024-10-02 11:21
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上海易利为您提供Human GST elisa kit 英文说明书
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上海易利为您提供大鼠α颗粒膜蛋白(GMP-140)说明书
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2024-10-05 15:24
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上海易利为您提供大鼠白细胞介素10(IL-10)说明书
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2024-10-02 10:41
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上海易利为您提供大鼠蛋白激酶C(PKC)说明书
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2024-10-02 00:23
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上海易利为您提供大鼠髓过氧化物酶(MPO)说明书
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2024-10-02 11:56
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上海易利为您提供大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)说明书
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2018-10-01 10:01
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上海易利为您提供大鼠极低密度脂蛋白(VLDL)中英说明书
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上海易利为您提供植物蔗糖合成酶(SS)说明书
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上海易利为您提供大鼠可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)说明书
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上海易利为您提供RD 小鼠氢化可的松 中文说明书
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褪黑激素ELISA Kit使用说明书
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4褪黑激素ELISAELISAKit使用说明书(德国IBL:RE54021)1、应用范围此试剂盒可用于人血清和血浆中褪黑激素的体外定量检测。2、前言说明松果体因其在光周期现象中的重要作用,已经被人们认为是神经内分泌的传感器。松果体主要分泌的激素是:N-乙酰-5-甲氧色胺和褪黑激素,褪黑激素一般是由色氨酸合成而来的。血浆褪黑激素的浓度可在夜间达到Z高。褪黑激素特有的波动变化可以反映出一些关于时间变化的信息,如夜晚的长短。褪黑激素的分泌会受到神经系统的调节。交感神经系统在调节褪黑激素分泌方面发挥有重要作用,它主要是通过释放去甲肾上腺素来调节的。据报道,褪黑激素分泌方式和水平的变化与人的一些生理状态一致,如:失眠、时差感、情绪低落、压力大、精神分裂症、丘脑下部性闭经、妊娠、神经想食欲缺乏、某些癌症、免疫系统紊乱和青春期性成熟的影响。大多数循环褪黑激素都可在肝内代谢成6-羟基褪黑激素,之后变成6-硫酸褪黑激素而随尿液排除。尿液中6-羟基褪黑激素硫酸盐的浓度与血液中褪黑激素的总水平有很好的相关性。3、实验原理此ELISA试剂盒利用的是竞争法的原理。生物素和非生物素标记的抗原竞争性结合包被板上有限的抗体结合位点。生物素抗原结合到抗体上的量与样品中抗原的量成反比。系统达到平衡后,洗板除去游离的生物素抗原,结合到抗体上的生物素抗原可以用抗生物素碱性磷酸酶标记物和对硝基苯磷酸底物检测出来。用已知的标准品数据做一条标准曲线,将未知样品的酶活性与标准曲线进行比较就可以定量出未知样品的量。4、储存与稳定性试剂盒必须在2-8℃的环境下运输和储存,避免太阳直射。样品的储存与稳定性及试剂准备将在相关章节中阐述,如果将包被板密封并储存于2-8℃的环境下时,试剂在有效期内稳定。用甲醇洗提后的提取柱可用于其它样品的提取或储存于2-8℃的环境下。提取柱可重复使用4次。5、样品的采集与储存血清,血浆(EDTA,肝素)按照静脉穿刺的常规注意事项采集样品,血液样品自采集到实验时都必须保证其化学完整性。不要使用明显溶血、黄疸和脂血样品。混浊的样品应当在实验开始前离心以除去所有的颗粒性物质。储存2-8℃≤-20℃≤-70℃避免太阳直射,避免反复冻融。稳定性24小时3个月1年6、试剂盒成分数量标记成分1×12×8MTP包被板,可拆,微孔中包被了抗兔IgG(羊,多克隆)。3×2mlBIOTINLYO褪黑激素生物素,冻干,内含稳定剂。3×2mlANTISERUMLYO褪黑激素硫酸盐抗血清,冻干粉,内含抗血清(兔,多克隆)和稳定剂。1×250ulENZCONJCONC酶联物,80倍浓缩,内含碱性磷酸酶标记的抗生物素抗体(羊)、Tris缓冲液和稳定剂。1×6×2mlCALA-FLYO标准品A-F,冻干粉,内含稳定剂,提取浓度请见试剂瓶标签或QC质控品。1×2×2mlCONTROL1+2LYO质控品1+2,冻干粉,内含稳定剂,浓度/可接受范围请见试剂瓶标签。1×50mlASSAYBUFCONC检测缓冲液,10倍浓缩,内含磷酸缓冲液、吐温和稳定剂。1×9×PNPPSUBSPNPP底物片,密封于铝铂金属袋中,内含对硝基苯硫酸盐。1×27mlPNPPBUFPNPP底物缓冲液,即用,内含二乙醇氨和水。1×15mlPNPPSTOPPNPP终止液,即用,内含1M的NaOH和0.25M的EDTA。2×10EXTRCOL提取柱,即用,C18RP,1m3/100mg。另需提取柱可从IBL定够(编号:KEME761)3×FOIL粘性金属板7、实验所需器材但试剂盒不提供1)移液器,体积:50;500ul2)试管(12×75mm)3)轨道振荡器(400-600rpm)4)旋涡混合器5)带储器的8道移液器6)洗涤瓶,自动或半自动洗板机7)离心机(冷冻离心机更适宜):200-500×g,也可选用多头抽真空装置(例如:Mallinekrodt-Baker或Waters)。8)甲醇(HPLC级)9)蒸发离心机10)可在405nm处读数的酶标仪(参考波长600-650nm)11)蒸馏水或去离子水12)吸水纸、取样吸头和计时器8、实验前的准备说明注意用于96人份检测色试剂盒成分可分成3次进行。下列所述体积为检测32人份时所需要的量。8.1冻干或浓缩成分的准备稀释/溶解成分稀释剂比例备注储存稳定性15ml检测缓冲液150ml双蒸水1:102-8℃4周标准品和质控品2.0ml双蒸水静置15min,混合时避免气泡≤-20℃直至有效期褪黑激素生物素2.0ml蒸馏水静置15min,混合时避免气泡临时配置,只能使用一次褪黑激素抗血清2.0ml蒸馏水静置15min,混合时避免气泡70ul酶联物5.6ml已稀释的检测缓冲液1:813PNPP底物片8mlPNPP底物缓冲液10ml未稀释甲醇100ml蒸馏水10%(v/v)如果溶液的需要量比较大,应该将试管内的溶液混合.避免反复冻融。8.2样品的稀释如果怀疑样品中的褪黑激素浓度比Z高标准品的高,必须将样品在提取步骤前用检测缓冲液进行进一步的稀释。8.3样品、标准品和质控品的提取(提取柱)按照此步骤进行提取,提取量大约为90-1**%。为了避免柱子堵塞,提取样品前将样品过滤或离心一下。注意每份样品、标准品和质控品都必须提取,提取必须提前进行。干燥的提取物(甲醇蒸发后)可在2-8℃或-20℃下储存24个小时。用甲醇洗提后,提取柱就可以用于下一份样品的提取或是存放到2-8℃的环境下。提取柱可以反复使用4次。如果是重复使用,在再次从A.1开始(柱的调制)。A、标准版本:离心与蒸发离心步骤1.柱的调制1将提取柱放到聚苯乙烯或玻璃试管中(12×75mm)。2在提取柱中加入2×1ml的甲醇(未稀释的),200g离心1min使溶剂通过提取柱,弃取洗出液。3向提取柱中加入2×1ml的蒸馏水,200g离心1min使溶剂通过提取柱,弃取洗出液。4为了避免柱子变干,请立即提取样品。2.样品提取5将提取柱放到相应的标记聚苯乙烯或玻璃试管中(12×75mm)。6向提取柱中加入0.5ml标准品、质控品和样品,200g离心1min使溶剂通过提取柱,弃取洗出液。3、洗涤7向提取柱中加入2×1ml的10%甲醇(蒸馏水稀释),500g离心1min使溶剂通过提取柱,弃取洗出液。4、提取物的洗脱8将提取柱放到新的标记聚苯乙烯或玻璃试管中(12×75mm)9向提取柱中加入1ml未稀释的甲醇,200g离心1min使溶剂通过提取柱。10将提取柱从试管中移出,避免液滴还停留在柱子中。将柱子用于下一份样品的提取或存放于2-8℃的环境下。提取柱可重复使用四次。5.提取物的蒸发和重新配置11用蒸发离心机将甲醇蒸发掉。12用0.15ml的蒸馏水重新稀释配置样品13旋涡混和1分钟,并立即检测样品。B、选择性版本:用多头抽真空装置代替离心机提取步骤仍然按照A1-5进行,柱子不变。用真空和≤5ml/min的流速使溶剂通过柱子。样品和提取物用≤2ml/min的流速。用蒸发离心机或氮气蒸发干燥溶剂。9、实验步骤1将提取好的标准品、质控品和样品分别50ul加入到相应的微孔中。2在每一微孔中加入50ul褪黑激素生物素。3在每一微孔内加入50ul褪黑激素抗血清。4盖板,轻轻震板,2-8℃下温育14-20小时。5移去粘性金属板,弃取孔内反应液,每孔用250ul稀释好的检测缓冲液洗板3次,吸水纸上拍干以除出残余液体。6在每一微孔中加入150ul临时配置好的酶联物。7盖板,室温(18-25℃)轨道振荡器上(500rpm)温育120min。8大约在温育结束10分钟前准备好PNPP底物液。9移去粘性金属板,弃取孔内反应液,每孔用250ul稀释好的检测缓冲液洗板3次,吸水纸上拍干以除出残余液体。10如果有8道移液器,请用8道移液器加底物液和终止液,加底物液和终止液的时间间隔应当相同。使用主动置换型移液器并避免气泡产生。11在每一微孔中加入200ul临时配置好的PNPP底物液。12室温(18-25℃)轨道振荡器上(500rpm)温育20-40min。13在每一微孔中加入50ulPNPP终止液,轻轻震板以使溶液混合均匀。14加终止液后60min内在405nm处读取OD值。(参考波长:600-650nm)10、结果计算在半对数坐标纸上或自动计算的方法,以标准品的OD值(Y轴,线性)对其浓度(X轴,对数)做一条标准曲线。使用三次回归、四参数或双对数曲线方程可以得到更好的标准曲线。在推算标准曲线时,应当充分利用好每一个标准品数值(明显逸出的数值应当被忽略,再使用更加合理的数值代替它)。样品的浓度可以从标准曲线上直接读取。从坐标纸上读取结果时应当把起始的稀释倍数考虑进去。将稀释了的样品结果乘以稀释因子即可得到其相应的结果。样品中抗体浓度高于Z高标准品的样品,应当按实验前准备说明所述的方法进行稀释,并重新检测。转换系数:褪黑激素(pg/ml)×4.30=pmol/l典型标准曲线(例子:不能用来定量)标准品褪黑激素(pg/ml)平均OD值OD/ODmax(%)A0.01.517100B3.01.38391.1C101.21480.1D300.86757.1E1000.43428.6F3000.26017.111、期望值实验结果不能当作确定ZL结果的**因素,疾病的判断还应当与其它临床观察和诊断检测相结合。对明显健康的一组人群进行研究发现,人体内的褪黑激素水平有着明显的生理周期变化,褪黑激素白天的水平很低,而晚上的水平则很高,而且个体之间的差异也很大。此外,褪黑激素的水平也与年龄有关系,其Z高浓度是在婴儿(3岁)样品中发现的。对6个明显健康献血者的褪黑激素生理周期进行研究。褪黑激素大概在白天下午四点Zdi,其平均值是4.6pg/ml;早晨4点达到**,平均值为77.5pg/ml。健康个体之间的褪黑激素Z高值差异很大,建议每个实验室都确定自己实验室的正常值范围。本译文仅供参考,详情请以原文为准。ZGdu家总代理:深圳市科润达生物工程有限公司办公地址:深圳市蛇口太子路18号海景广场11C研发ZX:深圳市蛇口沿山路10号6层电话:0755-26814430,26680196邮政编码:518067免费电话:800-8306296传真:0755-26814431[详细]
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2018-11-14 10:00
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上海沪峰为您提供大鼠超氧化物歧化酶(SOD)说明书
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2018-09-19 10:01
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2024-09-28 07:04
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上海易利为您提供 猪口蹄疫O型抗体ELISA检测试剂盒 说明书
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褪黑激素硫酸盐ELISA Kit使用说明书
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4褪黑激素硫酸盐ELISAKit使用说明书(德国IBL:RE54031)1、应用范围此试剂盒可用于人尿液中褪黑激素硫酸盐(又叫6-羟基褪黑激素硫酸盐和6-硫酸褪黑激素)的体外定量检测。2、前言说明松果体因其在光周期现象中的重要作用,已经被人们认为是神经内分泌的传感器。松果体主要分泌的激素是:N-乙酰-5-甲氧色胺和褪黑激素,褪黑激素一般是由色氨酸合成而来的。血浆褪黑激素的浓度可在夜间达到**。褪黑激素特有的波动变化可以反映出一些关于时间变化的信息,如夜晚的长短。褪黑激素的分泌会受到神经系统的调节。交感神经系统在调节褪黑激素分泌方面发挥有重要作用,它主要是通过释放去甲肾上腺素来调节的。据报道,褪黑激素分泌方式和水平的变化与人的一些生理状态一致,如:失眠、时差感、情绪低落、压力大、精神分裂症、丘脑下部性闭经、妊娠、神经想食欲缺乏、某些癌症、免疫系统紊乱和青春期性成熟的影响。大多数循环褪黑激素都可在肝内代谢成6-羟基褪黑激素,之后变成6-硫酸褪黑激素而随尿液排除。尿液中6-羟基褪黑激素硫酸盐的浓度与血液中褪黑激素的总水平有很好的相关性。3、实验原理此ELISA试剂盒利用的是竞争法的原理。样品中未知量的抗原和一定量的酶标抗原竞争性结合到包被在微孔中的抗体结合位点上。温育后洗板以终止竞争反应。加入底物液后,溶液所显示的颜色强度与样品中抗原的量成反比。样品的实验结果可以从标准曲线上直接获取。4、储存与稳定性试剂盒必须在2-8℃的环境下运输和储存,避免太阳直射。样品的储存与稳定性及试剂准备将在相关章节中阐述。如果将包被板密封并储存于2-8℃的环境下时,试剂在有效期内稳定。5、样品的采集与储存尿液实验必须使用自然产生的尿液,也可使用24小时内产生的尿液。收集病人24小时内产生的尿液,将它加入到含10-15ml6NHCl防腐剂的容器中。为了计算结果,请确定尿液的总体积。实验开始前请先将样品离心。储存2-8℃2-8℃避免太阳直射,避免反复冻融稳定性4天15年6、试剂盒成分数量标记成分1×12×8MTP包被板,可拆,微孔中包被了抗兔IgG(羊,多克隆)。1×5mlANTISERUM褪黑激素硫酸盐抗血清,即用,内含:兔抗血清、Tris缓冲液和0.01%的硫柳汞1×0.2mlENZCONJCONC酶联物,40倍浓缩,内含过氧酶标记的褪黑激素硫酸盐、Tris缓冲液和1%的硫柳汞。1×7×0.1mlCALA-G标准品A-G,0;1.7;5.2;15.6;46.7;140;420ng/mL0;5.2;15.9;47.6;142;427;1281nmol/L。即用,内含褪黑激素硫酸盐、Tris缓冲液和0.01%的硫柳汞。1×2×0.1mlCONTROL1+2质控品1+2,即用,内含0.02%的;硫柳汞。具体浓度及可允许范围请见试剂瓶标签。1×60mlASSAYBUFCONC检测缓冲液,红色,即用,内含Tris缓冲液、BSA和0.01%的硫柳汞。1×50mlWASHBUFCONC洗涤液,20倍浓缩,内含磷酸缓冲液、吐温和0.1%的硫柳汞。1×0.9mlTMBSUBSCONCTMB底物液,31倍浓缩,内含TMB、缓冲液和稳定剂。1×27mlTMB缓冲液TMB底物缓冲液,储存时避免太阳直射,即用,内含H2O2、柠檬酸盐缓冲液和稳定剂。1×12mlTMBSTOPTMB终止液,即用,1M的H2SO4。3×FOIL粘性金属板7、实验所需器材但试剂盒不提供1)移液器,体积:10;50;100;1000ul2)试管(12×75mm)3)试管架4)振荡器(500rpm)5)旋涡混合器(500rpm)6)带储器的8道移液器7)洗涤瓶,自动或半自动洗板机8)酶标仪(参考波长:600-650nm)9)蒸馏水或去离子水10)吸水纸、取样吸头和计时器8、实验前的准备说明8.1冻干或浓缩成分的准备稀释/溶解成分稀释剂比例备注储存稳定性15ml洗涤液300ml双蒸水1:2018-25℃将晶体溶解掉2-8℃4周50ul酶联物2ml检测缓冲液1:41临时配置,只能使用一次18-25℃30min300ulTMB底物液9mlTMB底物缓冲液1:31临时配置,只能使用一次18-25℃10min8.2标准品、质控品和病人尿液样品的稀释1将标准品、质控品和病人尿液样品分别10ul加入到聚苯乙烯或聚丙烯或玻璃试管中,避免太阳直射。2在每一试管中加入500ul检测缓冲液,旋涡混合。褪黑激素硫酸盐浓度高于Z高标准品浓度的样品必须用检测缓冲液进行进一步的稀释。9、实验步骤1将已稀释好的标准品、质控品和病人样品分别50ul加入到相应的微孔中。2在每一微孔中加入50ul临时配置好的酶联物。3在每一微孔内加入50ul褪黑激素硫酸盐抗血清。4盖板,室温(18-25℃)包被板振荡器(500rpm)温育2小时。5在温育快要结束的10分钟前,请将TMB底物液准备好。6移去粘性金属板,弃取孔内反应液,每孔用250ul稀释好的洗涤液洗板4次,吸水纸上拍干以除出残余液体。7如果可以的话,请用8道移液器加底物液和终止液。加底物液和终止液的时间间隔应当相同,使用8在每一微孔中加入200ulTMB底物液。9室温(18-25℃)包被板振荡器(500rpm)温育30min。10在每一微孔中加入100ulTMB终止液,轻请振板以混合溶液。11加终止液后60min内在450nm处读取OD值。10、期望值实验结果不能当作确定ZL结果的**因素,疾病的判断还应当与其它临床观察和诊断检测相结合。以下为明显正常人群褪黑激素硫酸盐的正常值:年龄数目褪黑激素硫酸盐24小时尿液(ug)夜间尿液(ug/h)平均值90%的比例平均值90%的比例20-352636.815.6-58.12.80.9-5.636-501729.69.9-52.92.10.6-3.651-651620.412.3-32.81.50.9-2.5>1615.87.5-32.71.00.3-2.3建议每个实验室读确定自己的正常值范围本译文仅供参考,详情请以原文为准。ZGdu家总代理:深圳市科润达生物工程有限公司办公地址:深圳市蛇口太子路18号海景广场11C研发ZX:深圳市蛇口沿山路10号6层电话:0755-26814430,26680196邮政编码:518067免费电话:800-8306296传真:0755-26814431[详细]
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2018-11-14 10:00
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上海沪峰为您提供大鼠微量白蛋白1说明书
- 上海沪峰生物技术有限公司是一家专业经营生物、仪器、试剂、耗材的公司,在广大用户的帮助和支持下,经过不懈的努力,已成为国内生命科学领域产品的主要供应商之一,代理许多国际先进水平的高科技产品,包括分子生物学、细胞生物学、免疫学、诊断等多个研究及应用领域。公司的服务和业务网络遍及全国,在同行获得一致好评。特别是生物试剂和细胞产品更是种类齐全、价格实惠,进口原代细胞,专业培养基,常用传统培养基,细胞培养用的相关试剂,氨基酸,抗生素,维他命类产品品种齐全,试剂耗材种类繁多。并代理国内外许多品牌等等。公司的规模和产品种类日益扩大和更新,我们一直秉承着代理优质品牌的产品,服务好每一位顾客,将ZxinZxian极n的科学技术和方法推荐顾客的服务宗旨为广大客户提供各类服务,产品、技术咨询、国际国内信息,每年组织大批员工出国学习,掌握国际先进的技术和信息。公司的理念是:为您提供全方位的产品及服务,产品价格极具竞争力。Z后,感谢您对我们的支持与信赖!同时也祝您的事业更上一层楼![详细]
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2018-09-19 10:01
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鸡褪黑激素 (MT)酶联免疫分析
- www.biokanu.com鸡褪黑激素(MT)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定鸡血清,组织及相关液体样本中褪黑激素(MT)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡褪黑激素(MT)水平。用纯化的鸡褪黑激素(MT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入褪黑激素(MT),再与HRP标记的褪黑激素(MT)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的褪黑激素(MT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中鸡褪黑激素(MT)浓度。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:54ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤:1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为36ng/L,24ng/L,12ng/L,6ng/L,3ng/L)。2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。(此图仅供参考)试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。2.批内与批见应分别小于9%和15%检测范围:1ng/L-40ng/L保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-22 10:00
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